Moleculaire markers en prognosticering van het DLBCL, M. Chamuleau

Transcriptie

1

2 Moleculaire markers en prognosticering van het DLBCL, consequenties voor het beleid? M. Chamuleau

3 Belangenverklaring In overeenstemming met de regels van de Inspectie van de Gezondheidszorg (IGZ) Naam: [ M. Chamuleau ] Organisatie: [ VUMC] Ik heb geen 'potentiële' belangenverstrengeling Ik heb de volgende mogelijke belangenverstrengelingen: Type van verstrengeling / financieel belang Naam van commercieel bedrijf Ontvangst van subsidie(s)/research ondersteuning: Ontvangst van honoraria of adviseursfee: Lid van een commercieel gesponsord speakersbureau : Financiële belangen in een bedrijf (aandelen of opties): Andere ondersteuning (gelieve te specificeren): Wetenschappelijke adviesraad: Roche

4 DLBCL: IPI score in rituximab tijdperk nog steeds van waarde, maar. Ziepert/Pfreundschuh JCO 2010

5 Moleculaire markers met prognostische waarde en therapeutische consequenties voor DLBCL Moleculaire markers gen expressieprofielen: ABC vs GCB subtype MYC en BCL2 relatie MYC met ABC en GCB Therapeutische consequenties aangrijpingspunten de novo DLBCL recidief/refractair DLBCL

6 Moleculaire markers met prognostische waarde en therapeutische consequenties voor DLBCL Moleculaire markers gen expressieprofielen: ABC vs GCB subtype MYC en BCL2 relatie MYC met ABC en GCB Therapeutische consequenties aangrijpingspunten de novo DLBCL recidief/refractair DLBCL

7 DLBCL prognosis: cell of origin (COO) ABC vs GCB subtype dmv GEP ABC subtype -activatie van NFĸB pathway -slechtere prognose op R-CHOP Lenz/Staudt/Wilson NEJM 2002/2008/2010, Blood 2013

8 DLBCL prognosis: cell of origin -GEP niet haalbaar in upfront setting (frozen materiaal) -Immunohistochemie (Hans algoritme) onvoldoende correlatie met outcome -Multiplex PCR technologie beschikbaar op formaline blokjes 20 genen (van 180) goede correlatie met gouden standaard Scott, Blood 2014

9 Frequency of mutations in ABC and GCB DLBCL ABC subtype mutaties betrokken bij BCR signalling en NFkB pathway GCB subtype relatief meer mutaties in EZH2 Bohers, Genes 2014

10 Targeting NF-kB pathway in ABC DLBCL BTK inh Proteasome inhibitors Yang en Staudt, Cancer Cell 2012

11 Targeting GCB DLBCL In GCB geen duidelijke pathway ontregeld/geactiveerd EZH2 (gene silencer) vooral rol bij epigenetische modulatie HDAC inhibitors en hypomethylerende middelen effectief, in fase I/II studies Preklinisch: EZH2 inhibition as a therapeutic strategy for lymphoma with EZH2-activating mutations. Beguelin, Cell 2013 & Mc Gabe, Nature 2012

12 Moleculaire markers met prognostische waarde en therapeutische consequenties voor DLBCL Moleculaire markers gen expressieprofielen: ABC vs GCB subtype MYC en BCL2 relatie MYC met ABC en GCB Therapeutische consequenties aangrijpingspunten de novo DLBCL recidief/refractair DLBCL

13 MYC in DLBCL 1. Translokatie waarbij het MYC gen betrokken is t(8;14), t(2;8), t(8;22) aantonen mbv FISH leidt tot hoge expressie van MYC eiwit 10% van de novo DLBCL 2. Hoge expressie van het MYC eiwit Kan ook zonder bekende translokatie (door mutaties, post-transcriptionele veranderingen) Aantonen mbv IHC (immuunhistochemische kleuring) 30% van de novo DLBCL

14 Hoe wordt MYC opgereguleerd? 3 meest voorkomendemyc translokaties Overexpressie MYC eiwit door plaatsing MYC gen in buurt van enhancer van zware keten, kappa of lambda

15 MYC in DLBCL 1. Translokatie waarbij het MYC gen betrokken is t(8;14), t(2;8), t(8;22) aantonen mbv FISH leidt tot hoge expressie van MYC eiwit 10% van de novo DLBCL 2. Hoge expressie van het MYC eiwit Kan ook zonder bekende translokatie (door mutaties, post-transcriptionele veranderingen) Aantonen mbv IHC (immuunhistochemische kleuring) 30% van de novo DLBCL

16 MYC als centrale transcriptiefactor MYC - reguleert 10-15% van al onze genen - bindt niet aan promotoren van silent genen - werkt als activator/stimulator van bestaand programma Miller, Clin Cancer Res 2012 Dang, Cell 2012

17 Effect hoge MYC expressie Single MYC overexpressie Apoptose Activeert p53 Activeert Fas/FasL Reguleert Bax op apoptose proliferatie Proliferatie Verhoogt Cycline D1 Verhoogt Cycline D2 Activeert CDK4 Activeert CDK2 Verlaagt p21 Verlaagt p27 Zowel verhoogde apoptose als proliferatie

18 MYC in Burkitt, DLBCL en BCL-u WHO 2008 DLBCL BCL-U BL Genomische complexiteit DH lymfoom zal zich vaak hierin bevinden MYC in Burkitt lymfoom MYC in DLBCL

19 MYC in Burkitt lymfoom vs MYC in DLBCL Single MYC overexpressie Apoptose Activeert p53 Activeert Fas/FasL Reguleert Bax op apoptose proliferatie Proliferatie Verhoogt Cycline D1 Verhoogt Cycline D2 Activeert CDK4 Activeert CDK2 Verlaagt p21 Verlaagt p27 Zowel verhoogde apoptose als proliferatie MYC en BCL2 (anti-apoptose) overexpressie apoptose proliferatie Proliferatie krijgt overhand

20 prognose DLBCL: MYC translokaties -245 patiënten, retrospectieve studie -de novo DLBCL -R-CHOP therapie Barrans, JCO % van alle DLBCL heeft een translokatie waarbij het MYC gen betrokken is -Hiervan heeft grootste gedeelte (+/- 83%) ook BCL2 en/of BCL6 translokatie, dan double hit (DH) of triple hit (TH) genoemd -Prognose op R-CHOP is slecht Aukema /Kluin, Blood 2011

21 MYC translokaties: prognose op salvage therapie met auto PSCT -N=161, MYC translokatie in 17% -R-ICE vs R-DHAP, BEAM auto PSCT -Ook in relapse setting prognose voor MYC+ DLBCL slechter Cuccuini, Blood 2012

22 MYC en BCL2: is double hit anders dan single hit? Op translocatieniveau SH = DH = TH -zelfde prognose -ook moleculair geen verschil (GEP, genomische complexiteit, fusiepartner MYC) -zodra MYC translokatie: prognose slecht Aukema & Kluin Haematologica 2013, Wang ASH 2013 (abs 4313),

23 Prognose DLBCL bij hoge MYC eiwitexpressie Ook zonder de aanwezigheid van translokaties kan MYC eiwit hoog tot expressie komen 30% van DLBCL Aantonen met immuunhistochemische kleuring -Ook dan prognose op RCHOP slecht -discussie over afkappunt Hu, Blood 2013

24 Op eiwitniveau lijkt DH wel slechtere prognose dan SH N=466 DLBCL, behandeld met R-CHOP HU, Blood 2013

25 Moleculaire markers met prognostische waarde en therapeutische consequenties voor DLBCL Moleculaire markers gen expressieprofielen: ABC vs GCB subtype MYC en BCL2 relatie MYC met ABC en GCB Therapeutische consequenties aangrijpingspunten de novo DLBCL recidief/refractair DLBCL

26 MYC en BCL2 translokaties en eiwit overexpressie komen in beiden subtypen voor en is in beide subtypen gecorreleerd met slechtere prognose op R-CHOP HU, Blood 2013

27 Andere frequenties van voorkomen MYC translokaties en hoog eiwitexpressie in ABC en GCB GCB type ABC type DH DHtranslokatie DH eiwit DH op eiwitniveau vaker ABC subtype (46%) vs GCB (21%) DH op translocatieniveau vaker GCB subtype (90%) vs ABC (10%) Kluk, PLos One 2012 Green, JCO 2012 Johnson, JCO 2012, Horn, Blood 2013 Hu, Blood 2013

28 MYC en BCL2 hoog eiwit expressie in relatie tot ABC en GCB In aanwezigheid van MYC en BCL2 lijkt ABC of GCB subtype minder belangrijk HU, Blood 2013

29 Moleculaire markers met prognostische waarde en therapeutische consequenties voor DLBCL Moleculaire markers gen expressieprofielen: ABC vs GCB subtype MYC en BCL2 relatie MYC met ABC en GCB Therapeutische consequenties aangrijpingspunten de novo DLBCL recidief/refractair DLBCL

30 Targeting NF-kB pathway in ABC DLBCL BTK inh Proteasome inhibitors Yang en Staudt, Cancer Cell 2012

31 Targeting MYC en BCL2 - MYC zelf moeilijk targettable - Lenalidomide downreguleert aantal door MYC opgereguleerde genen (oa IRF4) - BCL2 inhibitor oraal beschikbaar (fase II/III CLL)

32 Moleculaire markers met prognostische waarde en therapeutische consequenties voor DLBCL Moleculaire markers gen expressieprofielen: ABC vs GCB subtype MYC en BCL2 relatie MYC met ABC en GCB Therapeutische consequenties aangrijpingspunten de novo DLBCL: nu, binnenkort en wens recidief/refractair DLBCL

33 Therapeutische consequenties, binnenkort in NL patients with DLBCL and BCLu ABC subtype GCB subtype R-CHOP + ibrutinib R-CHOP + lenalidomide (industriestudies) R-CHOP (buiten studieverband) MYC+ Screen MYC FISH MYC- R-CHOP + lenalidomide (HOVON studie) R-CHOP

34 GCB type ABC type DH IHC DH FISH RCHOP + lenalidomide HOVON studie Industrie studie

35 Therapeutische consequenties, wens in NL Screen all patients with DLBCL and BCLu op MYC (FISH en IHC) MYC+ MYC- R-CHOP + MYC specifiek Lena, BCL2inh, BET inh (HOVON studie) GEP ABC GCB R-CHOP + X target (HOVON studie) R-CHOP + epigenetische therapie (HOVON studie)

36 Moleculaire markers met prognostische waarde en therapeutische consequenties voor DLBCL Moleculaire markers gen expressieprofielen: ABC vs GCB subtype MYC en BCL2 relatie MYC met ABC en GCB Therapeutische consequenties aangrijpingspunten de novo DLBCL recidief/refractair DLBCL

37 Targeting NF-kB pathway in ABC DLBCL, relapse CD79b PKC PI3K inh. Combinaties BTK inh IMID mtor CD79b ADC Open LLPC gepland LLPC, 3 studies

38 Conclusies Biologische verschillen DLBCL belangrijk voor prognose COO subtype: ABC of GCB gaat binnenkort eerstelijns therapie bepalen In aanwezigheid van MYC translokatie en/of MYC en BCL2 eiwitexpressie COO minder relevant. Screening hierop wordt belangrijk Aantal studies naar combinatie-attaque BCR signalling/nfkb pathway voor recidief/refractaire setting