VALIDATIEPLAN PLAN DE VALIDATION

Transcriptie

1 VALIDATIEPLAN PLAN DE VALIDATION Analysemethode Méthode d analyse Techniek Technique Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices Type validatie Type de validation Verantwoordelijke (Naam en functie) Responsable (Nom et fonction) Opgesteld door Rédaction par I-MET-FLVVT-156: Bepaling van Residu s van Benzimidazolen in ei LC-MS Ei Totaal Eva Wevers Sectieverantwoordelijke Contaminanten Eva Wevers Handtekeningen - Signatures: Sectieverantwoordelijke Contaminanten 14/04/2014 Get. Goedgekeurd door Eva Wevers Sectieverantwoordelijke Contaminanten 14/04/2014 Handtekeningen - Signatures: Get. LAB 00 P 180 F 002 Template validatieplan Modèle plan de validation v /34

2 Stap Phase 1: Bepaling van het toepassingsgebied Déterminer le champs d application Matrices: Ei Componenten: Benzimidazolen: Albendazol-2-amino-sulfon (ABZ-NH2-SO2) Albendazol-sulfoxide (ABZ-SO) Albendazol-sulfon (ABZ-SO2) Albendazol (ABZ) Hydroxy-mebendazol (MBZ-OH) Amino-mebendazol (MBZ-NH2) Mebendazol (MBZ) Keto-triclabendazol (TCB-keto) Triclabendazol-sulfoxide (TCB-SO) Triclabendazol-sulfon (TCB-SO2) Triclabendazol (TCB) Oxfendazol (= fenbendazol-sulfoxide) (OFZ) Oxfendazol-sulfon (= fenbendazol-sulfon) (OFZ-SO2) Fenbendazol (FBZ) Febantel (FEB) Hydroxy-thiabendazol (TBZ-OH) Thiabendazol (TBZ) Amino-flubendazol (FLU-NH2) Flubendazol (FLU) Levamisol (LEV) Oxibendazol (OXI) Foxim (FOX) Closantel (CLOS) Albendazol som = 1,109x ABZ-NH2-SO2 + 0,94x ABZ-SO + 0,89x ABZ-SO2 Mebendazol som = 0,994x MBZ-OH + 1,244x MBZ-NH2 + 1x MBZ Triclabendazol som = 1x TCB-keto + 0,878x TCB-SO + 0,842x TCB-SO2 + 0,916x TCB Oxfendazol som = 1,051x OFZ + 1x OFZ-SO + 1,107x FBZ Fenbendazol som = 1,051x OFZ + 1x OFZ-SO + 1,107x FBZ Febantel som = 1,051x OFZ + 1x OFZ-SO + 1,107x FBZ Thiabendazol som = 1x TBZ-OH + 1x TBZ Flubendazol som LVM = 1x FLU-NH2 + 1x FLU Flubendazol som ei = 1x FLU LAB 00 P 180 F 002 Template validatieplan Modèle plan de validation v /34

3 Werkgebied: éénpuntskalibratie: op basis van controlemonster belast op de relevante concentratie Kalibratiecurve: meerdere punten onder en boven MRL (voor toegelaten benzimidazolen) of relevante concentratie (voor verboden benzimidazolen) (concentraties worden vastgelegd na lineariteitsonderzoek) Stap Phase 2: Doel en statuut van de analysemethode Le but et status de la méthode d analyse Het betreft een: Kwantitatieve methode Interne (in-house) methode Screeningsmethode: kwantificatie aan de hand van éénpuntskalibratie op basis van controlemonster belast op de relevante concentratie Bevestigingsmethode: kwantificatie aan de hand van kalibratiecurve Stap Phase 3: Keuze validatieparameters Choisir les paramètres à valider De volgende validatieparameters zullen bepaald worden tijdens het validatieonderzoek: Werkgebied Lineariteit Juistheid/terugvinding Precisie: herhaalbaarheid en reproduceerbaarheid Selectiviteit/specificiteit CC-α en CC-β Meetonzekerheid De acceptatiecriteria voor de verschillende validatieparameters worden beschreven in stap 4: Externe eisen voor validatieparameters LAB 00 P 180 F 002 Template validatieplan Modèle plan de validation v /34

4 Stap Phase 4: Externe eisen voor validatieparameters Des exigences externes pour les paramètres à valider De MRL s voor benzimidazolen in ei zijn terug te vinden in Verordening (EU) nr. 37/2010 van de Commissie van 22 december 2009 betreffende farmacologisch werkzame stoffen en de indeling daarvan op basis van maximumwaarden voor residuen in levensmiddelen van dierlijke oorsprong De validatieprocedure wordt uitgevoerd volgens de richtlijnen in Beschikking 2002/657/EG van de Commissie van 12 augustus 2002 ter uitvoering van Richtlijn 96/23/EG van de Raad wat de prestaties van analysemethoden en de interpretatie van resultaten betreft Overzicht van de validatieparameters en de criteria Validatieparameter Criteria Bron Lineariteit R 2 minimum 0.98 Minimaal 5 kalibratiepunten Afwijking maximaal 30 % voor laagste LAB 25-P 03 Resultaatvalidatie LC-MS methoden kalibratiepunt, maximaal 20% voor tweede kalibratiepunt en maximaal 15% voor de overige kalibratiepunten Juistheid/terugvinding 1 µg/kg: % Beschikking 2002/657/EG > 1 µg/kg tot 10 µg/kg: % 10 µg/kg: % Precisie: RSD r en RSD wr RSD r RSD r max Beschikking 2002/657/EG Selectiviteit/specificiteit CC-α en CC-β RSD wr RSD wr max Zo laag mogelijk (gehalte < 100 ppb) (volgens vergelijking van Horwitz) Conformiteit van blanco monsters t.o.v. overeenkomstige belaste monsters CC-α = MRL x standaardafwijking CC-β = CC-α x standaardafwijking LAB 00 P 180 Validatie van analysemethoden Beschikking 2002/657/EG LAB 00 P 180 F 002 Template validatieplan Modèle plan de validation v /34

5 Overzicht van de criteria voor identificatie door middel van massaspectrometrie (bron Verordening (EG) nr. 396/2005) Relatieve retentietijd van de analyt moet overeenkomen met die van de ijkoplossing binnen een marge van ± 2.5% voor LC-MS Maximaal toelaatbare marges voor relatieve ionenintensiteiten voor LC-MS Relatieve intensiteit (% van hoofdpiek) Maximaal toelaatbare marge > 50% ± 20% > 20% tot 50% ± 25% > 10% tot 20% ± 30% 10% ± 50% Stap Phase 5: Keuze van de monsters Le choix d échantillons Wegens het ontbreken van gecertificeerd referentiemateriaal wordt het validatieonderzoek uitgevoerd op monsters die belast worden met een standaardoplossing. Voor het validatieonderzoek werd gebruik gemaakt van eieren uit de supermarkt. LAB 00 P 180 F 002 Template validatieplan Modèle plan de validation v /34

6 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode Méthode d analyse Techniek Technique Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices Datum laatste aanpassing / Date de la dernière adaption I-MET-FLVVT-156: Bepaling van Residu s van Benzimidazolen in ei LC-MS Ei 17/03/2015 LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

7 Overzicht van de prestatiekenmerken: o Juistheid (zie paragraaf 3) o Precisie (zie paragraaf 4) o CC-α en CC-β (zie paragraaf 5) De validatie voldoet aan procedure LAB 00 P180 De laboratoria die deze methode willen overnemen, moeten aantonen dat de criteria hieronder aangegeven voldaan zijn: o Beschikking 2002/657/EG van de Commissie van 12 augustus 2002 ter uitvoering van Richtlijn 96/23/EG van de Raad wat de prestaties van analysemethoden en de interpretatie van resultaten betreft. Historiek validatie Versie Herziening door/datum Reden van herziening Wijzigingen Versie 01 Eva Wevers 03/2015 / / LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

8 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode Méthode d analyse Techniek Technique Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices Type validatie Type de validation Verantwoordelijke (Naam en functie) Responsable (Nom et fonction) Opgesteld door Rédaction par I-MET-FLVVT-156: Bepaling van Residu s van Benzimidazolen in ei LC-MS Ei Totaal Eva Wevers Sectieverantwoordelijke Contaminanten Eva Wevers Handtekeningen - Signatures: Sectieverantwoordelijke Contaminanten 17/03/2015 Get. Medewerkers (Naam en functie) Collaborateurs (Nom et fonction) Periode van validatie Période de validation Methode goedgekeurd en geschikt bevonden door Méthode approuvée et jugé convenable pour la routine par Sara Crauwels - Analist Kirsten Putzeys - Analist Siebe Timmerman - Stagiair Mieke Van Thienen - Analist Start - Début: 22/07/2014 Einde - Fin: 13/03/2015 Eva Wevers Sectieverantwoordelijke Contaminanten 17/03/2015 Handtekeningen - Signatures: Get. Hierna volgt een beschrijving van de resultaten van het validatieonderzoek zoals aangegeven in stap 8 van de procedure LAB 00 P 180. Ce qui suit est une description des résultats de l'étude de validation comme indiqué dans l'étape 8 de la procédure LAB P LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

9 Inhoudstabel VALIDATIEPLAN PLAN DE VALIDATION... 1 STAP PHASE 1: BEPALING VAN HET TOEPASSINGSGEBIED DÉTERMINER LE CHAMPS D APPLICATION... 2 STAP PHASE 2: DOEL EN STATUUT VAN DE ANALYSEMETHODE LE BUT ET STATUS DE LA MÉTHODE D ANALYSE... 3 STAP PHASE 3: KEUZE VALIDATIEPARAMETERS CHOISIR LES PARAMÈTRES À VALIDER... 3 STAP PHASE 4: EXTERNE EISEN VOOR VALIDATIEPARAMETERS DES EXIGENCES EXTERNES POUR LES PARAMÈTRES À VALIDER... 4 STAP PHASE 5: KEUZE VAN DE MONSTERS LE CHOIX D ÉCHANTILLONS... 5 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION... 6 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION... 8 INHOUDSTABEL... 9 VALIDATIEDOSSIER WERKGEBIED LINEARITEIT JUISTHEID TERUGVINDING VOLGENS ÉÉNPUNTSKALIBRATIE TERUGVINDING VOLGENS KALIBRATIECURVE PRECISIE PRECISIE VOLGENS ÉÉNPUNTSKALIBRATIE PRECISIE VOLGENS KALIBRATIECURVE CC-Α EN CC-Β SELECTIVITEIT / SPECIFITEIT IDENTIFICATIECRITERIA DOOR MIDDEL VAN MASSASPECTROMETRIE ROBUUSTHEID MEETONZEKERHEID BIJLAGEN OVERZICHT MRL S VOOR BENZIMIDAZOLEN FOTO S LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

10 Validatiedossier 1 Werkgebied De methode voor de bepaling van residu s van benzimidazolen wordt toegepast op de matrixsubcategorie Ei en ei-producten, matrixcategorie Dierlijke weefsels. Het validatieonderzoek wordt uitgevoerd met eieren uit de supermarkt. Sommige benzimidazolen zijn verboden in eieren, terwijl er voor andere MRL s bestaan. De MRL s voor benzimidazolen in eieren zijn terug te vinden in Verordening (EU) nr. 37/2010 van de Commissie van 22 december 2009 betreffende farmacologisch werkzame stoffen en de indeling daarvan op basis van maximumwaarden voor residuen in levensmiddelen van dierlijke oorsprong In bijlage wordt een overzicht gegeven van de benzimidazolen, en de bijhorende MRL s in ei in het geval van toegelaten componenten. De benzimidazolen worden in de eerste fase van het validatieonderzoek allemaal beschouwd als verboden componenten. Hiermee wordt bedoeld dat voor alle benzimidazolen (ook de toegelaten componenten) nagegaan wordt welke concentratie bepaald kan worden (zie relevante concentratie in onderstaande tabel). In het validatierapport wordt hiernaar verwezen met de term éénpuntskalibratie. In de tweede fase van het validatieonderzoek worden de benzimidazolen kwantitatief gevalideerd aan de hand van een volledige kalibratiecurve. Voor de toegelaten benzimidazolen gebeurt dit op MRL-niveau, terwijl er voor de verboden benzimidazolen gewerkt wordt rond de relevante concentratie. In het validatierapport wordt hiernaar verwezen met de term kalibratiecurve. In routine wordt de werkwijze éénpuntskalibratie toegepast, m.a.w. monsters worden vergeleken met een controlemonster gedopeerd op de relevante concentratie. Indien er toegelaten benzimidazolen teruggevonden worden, dan worden deze vervolgens kwantitatief bepaald volgens de werkwijze kalibratiecurve. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

11 MRL s voor benzimidazolen in ei Benzimidazolen Afkorting Verboden / toegelaten MRL (µg/kg) Relevante concentratie (µg/kg) Albendazol-2-amino-sulfon ABZ-NH2-SO2 verboden - 0,5 µg/kg Albendazol-sulfoxide ABZ-SO verboden - 0,5 µg/kg Albendazol-sulfon ABZ-SO2 verboden - 0,5 µg/kg Albendazol ABZ verboden - 0,5 µg/kg Hydroxy-mebendazol MBZ-OH verboden - 0,5 µg/kg Amino-mebendazol MBZ-NH2 verboden - 0,5 µg/kg Mebendazol MBZ verboden - 0,5 µg/kg Keto-triclabendazol TCB-keto verboden - 5 µg/kg Triclabendazol-sulfoxide TCB-SO verboden - 2 µg/kg Triclabendazol-sulfon TCB-SO2 verboden - 0,5 µg/kg Triclabendazol TCB verboden - 0,5 µg/kg Oxfendazol OFZ toegelaten ± 430 µg/kg (1/3 van 1300 µg/kg) 0,5 µg/kg Oxfendazol-sulfon OFZ-SO2 toegelaten ± 430 µg/kg (1/3 van 1300 µg/kg) 0,5 µg/kg Fenbendazol FBZ toegelaten ± 430 µg/kg (1/3 van 1300 µg/kg) 0,5 µg/kg Febantel FEB toegelaten ± 430 µg/kg (1/3 van 1300 µg/kg) 0,5 µg/kg Hydroxy-thiabendazol TBZ-OH verboden - 0,5 µg/kg Thiabendazol TBZ verboden - 0,5 µg/kg Amino-flubendazol FLU-NH2 toegelaten (niet inbegrepen bij definitie ei) 2 µg/kg Flubendazol FLU toegelaten 400 µg/kg 2 µg/kg Levamisol LEV verboden - 0,5 µg/kg Oxibendazol OXI verboden - 0,1 µg/kg Foxim FOX toegelaten 60 µg/kg - Closantel CLOS verboden - - Albendazol * 1 verboden - 1,5 µg/kg Mebendazol * 2 verboden - 1,6 µg/kg Triclabendazol * 3 verboden - 8,1 µg/kg Oxfendazol * 4 toegelaten 1300 µg/kg 1,6 µg/kg Fenbendazol * 5 toegelaten 1300 µg/kg 1,6 µg/kg Febantel * 6 toegelaten 1300 µg/kg 1,6 µg/kg Thiabendazol * 7 verboden - 1,0 µg/kg Flubendazol LVM * 8 toegelaten (aparte definitie voor ei) 4,0 µg/kg Flubendazol ei * 9 toegelaten 400 µg/kg 2,0 µg/kg * 1 Albendazol = 1,109x ABZ-NH2-SO2 + 0,94x ABZ-SO + 0,89x ABZ-SO2 * 2 Mebendazol = 0,994x MBZ-OH + 1,244x MBZ-NH2 + 1x MBZ * 3 Triclabendazol = 1x TCB-keto + 0,878x TCB-SO + 0,842x TCB-SO2 + 0,916x TCB LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

12 * 4 Oxfendazol = 1,051x OFZ + 1x OFZ-SO + 1,107x FBZ * 5 Fenbendazol = 1,051x OFZ + 1x OFZ-SO + 1,107x FBZ * 6 Febantel = 1,051x OFZ + 1x OFZ-SO + 1,107x FBZ * 7 Thiabendazol = 1x TBZ-OH + 1x TBZ * 8 Flubendazol LVM = 1x FLU-NH2 + 1x FLU (LVM: levensmiddel) * 9 Flubendazol ei = 1x FLU Deze formules zijn afkomstig uit de aanvraag om een formeel advies van het Nationaal Referentielaboratorium ILVO ( ). De kalibratiecurve zal zodanig samengesteld worden dat minimum vijf punten zich zowel onder als boven de MRL/relevante concentratie bevinden. Opmerking: uit het validatieonderzoek is gebleken dat de methode voor de bepaling van benzimidazolen in eieren niet geschikt is voor de kwantitatieve bepaling van foxim en closantel. Het is wel mogelijk om de aanof afwezigheid van deze componenten te detecteren. De gegevens voor deze componenten zijn terug te vinden in de bijlagen, maar worden niet opgenomen in het validatierapport. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

13 2 Lineariteit De kalibratiecurve wordt aangemaakt in de matrix ei. De eieren wordt belast op volgende concentraties: Concentraties voor kalibratiecurve VERBODEN benzimidazolen in ei Kalibratiecurve Concentratie A B C D E (µg/kg product) Level 1 0,5 RC 0,05 µg/kg 0,25 µg/kg 0,5 µg/kg 1 µg/kg 2,5 µg/kg Level 2 1,0 RC 0,1 µg/kg 0,5 µg/kg 1 µg/kg 2 µg/kg 5 µg/kg Level 3 2,0 RC 0,2 µg/kg 1 µg/kg 2 µg/kg 4 µg/kg 10 µg/kg Level 4 5,0 RC 0,5 µg/kg 2,5 µg/kg 5 µg/kg 10 µg/kg 25 µg/kg Level 5 10,0 RC 1 µg/kg 5 µg/kg 10 µg/kg 20 µg/kg 50 µg/kg Level 6 15,0 RC 1,5 µg/kg 7,5 µg/kg 15 µg/kg 30 µg/kg 75 µg/kg Level 7 20,0 RC 2 µg/kg 10 µg/kg 20 µg/kg 40 µg/kg 100 µg/kg RC: relevante concentratie A: OXI B: ABZ-NH2-SO2, ABZ-SO, ABZ-SO2, ABZ, MBZ-OH, MBZ-NH2, TCB, TBZ-OH, TBZ, LEV C: TCB-SO2 D: TCB-SO, CLO E: TCB-keto Concentraties voor kalibratiecurve TOEGELATEN benzimidazolen in ei Kalibratiecurve Concentratie F G (µg/kg product) Level 1 0,25 MRL 15 µg/kg 100 µg/kg Level 2 0,5 MRL 30 µg/kg 200 µg/kg Level 3 1,0 MRL 60 µg/kg 400 µg/kg Level 4 2,5 MRL 150 µg/kg 1000 µg/kg Level 5 5,0 MRL 300 µg/kg 2000 µg/kg Level 6 7,5 MRL 450 µg/kg 3000 µg/kg Level 7 10,0 MRL 600 µg/kg 4000 µg/kg F: FOX G: OFZ, OFZ-SO2, FBZ, FEB, FLU-NH2, FLU LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

14 Drie kalibratiecurven werden geanalyseerd. De bekomen respons ratio s werden onderworpen aan statistische analyse m.b.v. het programma StatGraphics waaruit bleek dat voor alle componenten de curve voldoet aan een lineair model, uitgezonderd voor FBZ, TCO-SO en TCB-SO2. Deze laatste componenten voldoen aan een kwadratisch model. Daarnaast waren de criteria voor de R² (minimaal 0.98) en het aantal kalibratiepunten (minimaal vijf) voldaan voor alle kalibratiecurven. Ook de percentages afwijking (maximaal 30% voor het laagste kalibratiepunt, maximaal 20% voor het tweede punt en maximaal 15% voor de overige kalibratiepunten) waren voldaan voor alle kalibratiecurven. De statistische analyse toonde ook aan dat voor alle componenten (uitgezonderd FOX en CLOS) de kalibratiecurve door het nulpunt gaat. Hierdoor is het mogelijk om voor de screeningsmethode te werken met een éénpuntskalibratie op basis van een controlemonster belast op de relevante concentratie. Alle monsters met een concentratie boven de helft van de concentratie van het controlemonster worden opnieuw geanalyseerd volgens de bevestigingsmethode waarbij de kwantificatie gebeurt a.d.h.v. de volledige kalibratiecurve. Evaluatiecriteria Alle kalibratiecurven (uitgezonderd FOX en CLOS) voldoen aan: Kalibratiecurven voldoen aan lineair of kwadratisch model R² > 0.98 Minimaal vijf kalibratiepunten Percentage afwijking maximaal 30% voor het laagste kalibratiepunt, maximaal 20% voor het tweede punt en maximaal 15% voor de overige kalibratiepunten Kalibratiecurven gaan door het nulpunt => éénpuntskalibratie mogelijk voor screeningsmethode (a.d.h.v. controlemonser belast op relevante concentratie) LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

15 3 Juistheid Wegens het ontbreken van gecertificeerd referentiemateriaal werd de terugvinding bepaald. De terugvinding werd bepaald op één niveau (relevante concentratie, kwantificatie op basis van een éénpuntskalibratie) en op drie niveaus (1/2 MRL of relevante concentratie, MRL of 2x relevante concentratie en 3/2 MRL of 3x relevante concentratie, kwantificatie op basis van een volledige kalibratiecurve). Voor elk concentratieniveau werden 20 monsters geanalyseerd. In onderstaande tabellen is een overzicht te vinden van de gemiddelde terugvinding. 3.1 Terugvinding volgens éénpuntskalibratie Terugvinding (%) voor concentratieniveau relevante concentratie (éénpuntskalibratie) relevante Toegevoegde Teruggevonden Terugvinding (%) concentratie concentratie (µg/kg) concentratie (µg/kg) ABZ-NH2-SO2 0,5 0, ABZ-SO 0,5 0,50 99 ABZ-SO2 0,5 0, ABZ 0,5 0, MBZ-OH 0,5 0,45 89 MBZ-NH2 0,5 0,45 91 MBZ 0,5 0, TCB-keto 5,0 4,70 94 TCB-SO 2,0 1,92 96 TCB-SO2 1,0 0,98 98 TCB 0,5 0, OFZ 0,5 0,49 97 OFZ-SO2 0,5 0, FBZ 0,5 0, FEB 0,5 0,45 89 TBZ-OH 0,5 0,46 91 TBZ 0,5 0,48 97 FLU-NH2 2,0 1,82 91 FLU 2,0 2, LEV 0,5 0,49 98 OXI 0,1 0,10 98 FOX 10,0 aanwezig - CLOS 2,0 aanwezig - Albendazol 1,5 1, Mebendazol 1,6 1,51 93 Triclabendazol 8,1 7,69 95 Oxfendazol 1,6 1, Fenbendazol 1,6 1, Febantel 1,6 1, Thiabendazol 1,0 0,94 94 Flubendazol LVM 4,0 3,85 96 Flubendazol ei 2,0 2, LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

16 3.2 Terugvinding volgens kalibratiecurve Terugvinding (%) voor concentratieniveau 1/2 MRL (toegelaten benzimidazolen) of relevante concentratie (verboden benzimidazolen) (kalibratiecurve) 1/2 MRL - RC Toegevoegde Teruggevonden Terugvinding (%) concentratie (µg/kg) concentratie (µg/kg) ABZ-NH2-SO2 0,5 0,46 92 ABZ-SO 0,5 0,46 92 ABZ-SO2 0,5 0,46 91 ABZ 0,5 0,48 96 MBZ-OH 0,5 0,45 91 MBZ-NH2 0,5 0,48 96 MBZ 0,5 0,49 97 TCB-keto 5,0 4,84 97 TCB-SO 2,0 1,93 96 TCB-SO2 1,0 0,99 99 TCB 0,5 0,48 96 OFZ 200,0 197,79 99 OFZ-SO2 200,0 199, FBZ 200,0 195,90 98 FEB 200,0 188,81 94 TBZ-OH 0,5 0,48 97 TBZ 0,5 0,49 98 FLU-NH2 200,0 191,91 96 FLU 200,0 193,02 97 LEV 0,5 0,47 95 OXI 0,1 0, FOX 30,0 aanwezig - CLOS 2,0 aanwezig - Albendazol 1,5 1,35 92 Mebendazol 1,6 1,53 95 Triclabendazol 8,1 7,81 97 Oxfendazol 631,6 624,36 99 Fenbendazol 631,6 624,36 99 Febantel 631,6 624,36 99 Thiabendazol 1,0 0,97 97 Flubendazol LVM 400,0 384,92 96 Flubendazol ei 200,0 193,02 97 LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

17 Terugvinding (%) voor concentratieniveau MRL (toegelaten benzimidazolen) of 2x relevante concentratie (verboden benzimidazolen) (kalibratiecurve) MRL - 2 RC Toegevoegde Teruggevonden Terugvinding (%) concentratie (µg/kg) concentratie (µg/kg) ABZ-NH2-SO2 1,0 0,92 92 ABZ-SO 1,0 0,89 89 ABZ-SO2 1,0 0,98 98 ABZ 1,0 1, MBZ-OH 1,0 0,97 97 MBZ-NH2 1,0 1, MBZ 1,0 1, TCB-keto 10,0 10, TCB-SO 4,0 3,91 98 TCB-SO2 2,0 1,95 97 TCB 1,0 0,91 91 OFZ 400,0 405, OFZ-SO2 400,0 414, FBZ 400,0 382,63 96 FEB 400,0 384,77 96 TBZ-OH 1,0 0,96 96 TBZ 1,0 1, FLU-NH2 400,0 377,07 94 FLU 400,0 393,41 98 LEV 1,0 0,93 93 OXI 0,2 0,20 98 FOX 60,0 aanwezig - CLOS 4,0 aanwezig - Albendazol 2,9 2,73 93 Mebendazol 3,2 3,22 99 Triclabendazol 16,1 15,90 99 Oxfendazol 1263,2 1264, Fenbendazol 1263,2 1264, Febantel 1263,2 1264, Thiabendazol 2,0 1,95 98 Flubendazol LVM 800,0 770,48 96 Flubendazol ei 400,0 393,41 98 LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

18 Terugvinding (%) voor concentratieniveau 3/2 MRL(toegelaten benzimidazolen) of 3x relevante concentratie (verboden benzimidazolen) (kalibratiecurve) 3/2 MRL - 3 RC Toegevoegde Teruggevonden Terugvinding (%) concentratie (µg/kg) concentratie (µg/kg) ABZ-NH2-SO2 1,5 1,32 88 ABZ-SO 1,5 1,30 87 ABZ-SO2 1,5 1,45 96 ABZ 1,5 1,48 99 MBZ-OH 1,5 1,45 97 MBZ-NH2 1,5 1,45 97 MBZ 1,5 1, TCB-keto 15,0 13,80 92 TCB-SO 6,0 5,84 97 TCB-SO2 3,0 2,98 99 TCB 1,5 1,38 92 OFZ 600,0 608, OFZ-SO2 600,0 609, FBZ 600,0 563,05 94 FEB 600,0 609, TBZ-OH 1,5 1, TBZ 1,5 1, FLU-NH2 600,0 562,71 94 FLU 600,0 572,29 95 LEV 1,5 1,37 91 OXI 0,3 0,29 97 FOX 90,0 aanwezig - CLOS 6,0 aanwezig - Albendazol 4,4 3,97 90 Mebendazol 4,9 4,75 98 Triclabendazol 24,2 22,70 94 Oxfendazol 1894,8 1872,42 99 Fenbendazol 1894,8 1872,42 99 Febantel 1894,8 1872,42 99 Thiabendazol 3,0 3, Flubendazol LVM 1200,0 1135,00 95 Flubendazol ei 600,0 572,29 95 Evaluatiecriteria Alle berekende percentages terugvinding voldoen aan: Terugvinding tussen (volgens Beschikking 2002/657/EG) 50% en 120% voor concentraties 1 µg/kg 70% en 110% voor concentraties > 1 µg/kg en < 10 µg/kg 80% en 110% voor concentraties 10 µg/kg LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

19 4 Precisie Wegens het ontbreken van gecertificeerd referentiemateriaal werd de precisie bepaald aan de hand van belaste monsters. De precisie werd bepaald op één niveau (relevante concentratie, kwantificatie op basis van een éénpuntskalibratie) en op drie niveaus (1/2 MRL of relevante concentratie, MRL of 2x relevante concentratie en 3/2 MRL of 3x relevante concentratie, kwantificatie op basis van een volledige kalibratiecurve). Voor elk concentratieniveau werden 20 monsters geanalyseerd. In onderstaande tabellen is een overzicht te vinden van de bekomen waarden voor herhaalbaarheid en reproduceerbaarheid. 4.1 Precisie volgens éénpuntskalibratie Precisie voor concentratieniveau relevante concentratie (éénpuntskalibratie) relevante Herhaalbaarheid Reproduceerbaarheid concentratie Concentratie (µg/kg) %RSD r r [2,8 * s r ] %RSD R R [2,8 * s R ] ABZ-NH2-SO2 0,5 5,64 0,08 7,26 0,10 ABZ-SO 0,5 5,55 0,08 6,29 0,09 ABZ-SO2 0,5 5,25 0,08 6,56 0,10 ABZ 0,5 5,07 0,07 7,37 0,10 MBZ-OH 0,5 8,23 0,10 11,08 0,14 MBZ-NH2 0,5 5,09 0,06 7,96 0,10 MBZ 0,5 5,25 0,07 5,35 0,07 TCB-keto 5,0 11,38 1,50 12,25 1,61 TCB-SO 2,0 8,56 0,46 10,27 0,55 TCB-SO2 1,0 10,76 0,29 11,04 0,30 TCB 0,5 4,99 0,07 6,62 0,10 OFZ 0,5 10,33 0,14 10,33 0,14 OFZ-SO2 0,5 8,51 0,12 8,91 0,12 FBZ 0,5 4,60 0,07 4,72 0,07 FEB 0,5 10,76 0,14 13,35 0,17 TBZ-OH 0,5 5,05 0,06 9,32 0,12 TBZ 0,5 5,66 0,08 8,89 0,12 FLU-NH2 2,0 6,39 0,33 12,07 0,62 FLU 2,0 4,46 0,25 4,92 0,28 LEV 0,5 3,83 0,05 4,61 0,06 OXI 0,1 4,83 0,01 7,25 0,02 FOX 10, CLOS 2, Albendazol 1,5 4,92 0,20 6,03 0,25 Mebendazol 1,6 5,35 0,23 7,15 0,30 Triclabendazol 8,1 9,08 1,95 10,19 2,19 Oxfendazol 1,6 6,16 0,27 6,16 0,27 Fenbendazol 1,6 6,16 0,27 6,16 0,27 Febantel 1,6 6,16 0,27 6,16 0,27 Thiabendazol 1,0 4,85 0,13 8,61 0,23 Flubendazol LVM 4,0 4,99 0,54 7,32 0,79 Flubendazol ei 2,0 4,46 0,25 4,92 0,28 LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

20 4.2 Precisie volgens kalibratiecurve Precisie voor concentratieniveau 1/2 MRL(toegelaten benzimidazolen) of relevante concentratie (verboden benzimidazolen) (kalibratiecurve) 1/2 MRL - RC Herhaalbaarheid Reproduceerbaarheid Concentratie (µg/kg) %RSD r r [2,8 * s r ] %RSD R R [2,8 * s R ] ABZ-NH2-SO2 0,5 8,63 0,11 12,87 0,17 ABZ-SO 0,5 14,25 0,18 16,43 0,21 ABZ-SO2 0,5 13,27 0,17 15,40 0,20 ABZ 0,5 11,73 0,16 18,28 0,25 MBZ-OH 0,5 11,31 0,14 20,22 0,26 MBZ-NH2 0,5 4,02 0,05 7,57 0,10 MBZ 0,5 4,23 0,06 8,54 0,12 TCB-keto 5,0 7,80 1,06 8,19 1,11 TCB-SO 2,0 11,21 0,61 11,66 0,63 TCB-SO2 1,0 11,11 0,31 12,02 0,33 TCB 0,5 4,99 0,07 6,50 0,09 OFZ 200,0 6,39 35,39 6,44 35,66 OFZ-SO2 200,0 6,12 34,21 6,51 36,40 FBZ 200,0 6,95 38,10 8,62 47,26 FEB 200,0 8,97 47,42 9,86 52,15 TBZ-OH 0,5 11,42 0,15 14,26 0,19 TBZ 0,5 11,45 0,16 14,19 0,20 FLU-NH2 200,0 7,80 41,93 8,32 44,68 FLU 200,0 3,00 16,22 7,42 40,11 LEV 0,5 8,89 0,12 16,29 0,22 OXI 0,1 7,09 0,02 12,82 0,04 FOX 30, CLOS 2, Albendazol 1,5 11,51 0,43 14,46 0,55 Mebendazol 1,6 4,28 0,18 9,03 0,39 Triclabendazol 8,1 7,16 1,57 7,80 1,71 Oxfendazol 631,6 3,27 57,18 4,87 85,11 Fenbendazol 631,6 3,27 57,18 4,87 85,11 Febantel 631,6 3,27 57,18 4,87 85,11 Thiabendazol 1,0 11,19 0,31 14,06 0,38 Flubendazol LVM 400,0 4,69 50,58 6,87 74,02 Flubendazol ei 200,0 3,00 16,22 7,42 40,11 LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

21 Precisie voor concentratieniveau MRL (toegelaten benzimidazolen) of 2x relevante concentratie (verboden benzimidazolen) (kalibratiecurve) MRL - 2 RC Herhaalbaarheid Reproduceerbaarheid Concentratie (µg/kg) %RSD r r [2,8 * s r ] %RSD R R [2,8 * s R ] ABZ-NH2-SO2 1,0 17,13 0,44 17,28 0,44 ABZ-SO 1,0 22,18 0,56 22,18 0,56 ABZ-SO2 1,0 16,00 0,44 16,00 0,44 ABZ 1,0 9,30 0,27 11,04 0,32 MBZ-OH 1,0 12,69 0,34 12,69 0,34 MBZ-NH2 1,0 15,18 0,43 15,18 0,43 MBZ 1,0 8,44 0,24 8,44 0,24 TCB-keto 10,0 8,63 2,41 8,81 2,47 TCB-SO 4,0 9,38 1,03 11,54 1,26 TCB-SO2 2,0 8,39 0,46 11,25 0,61 TCB 1,0 5,11 0,13 14,25 0,36 OFZ 400,0 4,78 54,23 4,78 54,23 OFZ-SO2 400,0 6,08 70,57 6,58 76,44 FBZ 400,0 11,14 119,30 11,14 119,30 FEB 400,0 8,69 93,62 8,71 93,80 TBZ-OH 1,0 11,23 0,30 11,23 0,30 TBZ 1,0 7,27 0,20 7,27 0,20 FLU-NH2 400,0 7,78 82,19 7,91 83,52 FLU 400,0 3,47 38,19 4,55 50,09 LEV 1,0 21,70 0,56 21,97 0,57 OXI 0,2 14,35 0,08 14,35 0,08 FOX 60, CLOS 4, Albendazol 2,9 15,93 1,22 15,93 1,22 Mebendazol 3,2 11,16 1,01 11,16 1,01 Triclabendazol 16,1 7,05 3,14 8,02 3,57 Oxfendazol 1263,2 3,03 107,38 3,45 122,16 Fenbendazol 1263,2 3,03 107,38 3,45 122,16 Febantel 1263,2 3,03 107,38 3,45 122,16 Thiabendazol 2,0 8,39 0,46 8,39 0,46 Flubendazol LVM 800,0 4,78 103,22 5,11 110,17 Flubendazol ei 400,0 3,47 38,19 4,55 50,09 LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

22 Precisie voor concentratieniveau 3/2 MRL (toegelaten benzimidazolen) of 3x relevante concentratie (verboden benzimidazolen) (kalibratiecurve) 3/2 MRL - 3 RC Herhaalbaarheid Reproduceerbaarheid Concentratie (µg/kg) %RSD r r [2,8 * s r ] %RSD R R [2,8 * s R ] ABZ-NH2-SO2 1,5 11,62 0,43 11,69 0,43 ABZ-SO 1,5 14,22 0,52 14,22 0,52 ABZ-SO2 1,5 11,68 0,47 11,68 0,47 ABZ 1,5 8,74 0,36 8,74 0,36 MBZ-OH 1,5 8,87 0,36 8,87 0,36 MBZ-NH2 1,5 9,96 0,40 9,96 0,40 MBZ 1,5 2,87 0,12 4,01 0,17 TCB-keto 15,0 10,93 4,22 10,93 4,22 TCB-SO 6,0 10,76 1,76 11,71 1,91 TCB-SO2 3,0 7,13 0,60 8,80 0,73 TCB 1,5 7,29 0,28 8,64 0,33 OFZ 600,0 3,48 59,41 3,51 59,90 OFZ-SO2 600,0 5,96 101,59 6,44 109,80 FBZ 600,0 7,29 114,86 12,34 194,52 FEB 600,0 6,71 114,61 6,97 119,05 TBZ-OH 1,5 5,43 0,23 7,98 0,34 TBZ 1,5 2,84 0,12 3,33 0,15 FLU-NH2 600,0 5,15 81,14 6,50 102,34 FLU 600,0 3,31 53,06 6,47 103,60 LEV 1,5 5,75 0,22 14,68 0,56 OXI 0,3 5,92 0,05 7,98 0,06 FOX 90, CLOS 6, Albendazol 4,4 10,71 1,19 10,71 1,19 Mebendazol 4,9 6,17 0,82 6,17 0,82 Triclabendazol 24,2 9,39 5,97 9,39 5,97 Oxfendazol 1894,8 2,99 156,65 5,48 287,08 Fenbendazol 1894,8 2,99 156,65 5,48 287,08 Febantel 1894,8 2,99 156,65 5,48 287,08 Thiabendazol 3,0 3,62 0,31 5,00 0,43 Flubendazol LVM 1200,0 3,15 100,10 5,26 167,12 Flubendazol ei 600,0 3,31 53,06 6,47 103,60 LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

23 Evaluatiecriteria De waarden voor herhaalbaarheid en reproduceerbaarheid werden berekend met behulp van template LAB 00 P180 F004. Alle berekende RSD s voor precisie (herhaalbaarheid en reproduceerbaarheid) voldoen aan: RSD r zo laag mogelijk (alle concentraties < 100 ppb) voor het concentratieniveau relevante concentratie (volgens Beschikking 2002/657/EG) RSD R zo laag mogelijk (alle concentraties < 100 ppb) voor het concentratieniveau relevante concentratie (volgens Beschikking 2002/657/EG) RSD r RSD r max (of zo laag mogelijk voor concentraties < 100 ppb) voor de concentratieniveaus 1/2 MRL of de relevante concentratie, MRL of 2x de relevante concentratie en 3/2 MRL of 3x de relevante concentratie (volgens Beschikking 2002/657/EG) RSD R RSD wr max (of zo laag mogelijk voor concentraties < 100 ppb) voor de concentratieniveaus 1/2 of de relevante concentratie, MRL of 2x de relevante concentratie en 3/2 MRL of 3x de relevante concentratie (volgens Beschikking 2002/657/EG) LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

24 5 CC-α en CC-β CC-α en CC-β werden bepaald aan de hand van 20 monsters waarbij de kwantificatie gebeurde op basis van een volledige kalibratiecurve. Voor de verboden benzimidazolen werden de monsters belast op de relevante concentratie. Voor de toegelaten benzimidazolen werden de monsters belast op de MRL. CC-α en CC-β worden volgens onderstaande formules berekend: CC-α = relevante concentratie of MRL x standaardafwijking CC-β = CC-α x standaardafwijking In onderstaande tabel is een overzicht te vinden van de berekende waarden voor CC-α en CC-β. CC-α en CC-β concentratie CC-α CC-β (µg/kg) ABZ-NH2-SO2 0,5 0,59 0,68 ABZ-SO 0,5 0,62 0,74 ABZ-SO2 0,5 0,61 0,72 ABZ 0,5 0,63 0,77 MBZ-OH 0,5 0,64 0,78 MBZ-NH2 0,5 0,55 0,61 MBZ 0,5 0,56 0,63 TCB-keto 5,0 5,64 6,29 TCB-SO 2,0 2,37 2,73 TCB-SO2 1,0 1,19 1,39 TCB 0,5 0,55 0,60 OFZ 400,0 430,19 460,38 OFZ-SO2 400,0 444,07 488,14 FBZ 400,0 466,70 533,41 FEB 400,0 454,92 509,83 TBZ-OH 0,5 0,61 0,72 TBZ 0,5 0,61 0,72 FLU-NH2 400,0 448,75 497,51 FLU 400,0 428,02 456,03 LEV 0,5 0,62 0,73 OXI 0,1 0,12 0,14 FOX 10,0 - - CLOS 2,0 - - Albendazol 1,5 1,78 2,08 Mebendazol 1,6 1,83 2,03 Triclabendazol 8,1 9,04 10,02 Oxfendazol 1300,0 1371, ,70 Fenbendazol 1300,0 1371, ,70 Febantel 1300,0 1371, ,70 Thiabendazol 1,0 1,22 1,43 Flubendazol LVM 800,0 863,69 927,38 Flubendazol ei 400,0 428,02 456,03 LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

25 Evaluatiecriteria CC-α en CC-β werden berekend volgens de formules in Beschikking 2002/657/EG LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

26 6 Selectiviteit / specifiteit De selectiviteit /specificiteit werd nagegaan door 20 blanco-negatief monsters en 20 monsters belast op de relevante concentratie te analyseren. Voor alle uitgevoerde analysen kon de conformiteit van het blanconegatief monster aangetoond worden ten opzichte van het monsters belast op de relevante concentratie. Bovendien werd ook de helft van de respons ratio voor monsters belast op de relevante concentratie berekend aangezien dit criterium bij de screeningsmethode gebruikt wordt om te beslissen welke monsters bevestigd dienen te worden. In de onderstaande tabel is een overzicht te vinden van de gemiddelde en de berekende respons ratio s. Respons ratio s voor blanco-negatief, relevante concentratie, helft relevante concentratie (op basis van relevante concentratie) Respons ratio's blanco negatief relevante concentratie helft van relevante concentratie ABZ-NH2-SO2 0,001 0,183 0,091 ABZ-SO 0,001 0,117 0,059 ABZ-SO2 0,001 0,272 0,136 ABZ 0,014 0,645 0,322 MBZ-OH 0,001 0,420 0,210 MBZ-NH2 0,001 0,265 0,132 MBZ 0,014 0,581 0,290 TCB-keto 0,001 1,911 0,955 TCB-SO 0,001 0,140 0,070 TCB-SO2 0,006 0,128 0,064 TCB 0,001 1,250 0,625 OFZ 0,001 0,389 0,195 OFZ-SO2 0,001 0,401 0,201 FBZ 0,024 0,641 0,320 FEB 0,001 0,031 0,015 TBZ-OH 0,001 0,068 0,034 TBZ 0,001 0,229 0,115 FLU-NH2 0,266 1,966 0,983 FLU 0,468 2,294 1,147 LEV 0,001 0,152 0,076 OXI 0,001 0,051 0,026 FOX 0,001 1,462 0,731 CLOS 0,001 1,768 0,884 Evaluatiecriteria Alle blanco-negatief monsters waren conform ten opzichte van de monsters belast op de relevante concentratie. Alle respons ratio s voldoen aan de voorwaarde: Respons ratio blanco-negatief < respons ratio relevante concentratie Respons ratio blanco-negatief < respons ratio helft relevante concentratie (criterium bevestigingsmethode) LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

27 7 Identificatiecriteria door middel van massaspectrometrie Ter identificatie van de benzimidazolen worden de ionenverhoudingen van de productionen vergeleken met deze in het controlemonster. De precursor- en productionen zijn weergegeven in onderstaande tabel. Precursor- en productionen Benzimidazolen Precursorion Productionen ABZ-NH2-SO en ABZ-SO en ABZ-SO en ABZ en MBZ-OH en 79.0 MBZ-NH en 77.0 MBZ en TCB-keto en TCB-SO en TCB-SO en TCB en OFZ en OFZ-SO en FBZ en FEB en TBZ-OH en TBZ en FLU-NH en 95.0 FLU en LEV en 91.1 OXI en FOX 299,3 152,9 en 129,1 CLOS 660,8 126,8 en 344,8 De ionenverhoudingen werden voor vier verschillende concentraties (relevante concentratie, 1/2 MRL of relevante concentratie, MRL of 2x relevante concentratie en 3/2 MRL of 3x relevante concentratie) berekend en vergeleken met deze van het controlemonster. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

28 Evaluatiecriteria Alle ionenverhoudingen voldoen aan: Maximaal toelaatbare marges voor relatieve ionenintensiteiten voor LC-MS (Beschikking 2002/657/EG) Relatieve intensiteit (% van hoofdpiek) Maximaal toelaatbare marge > 50% ± 20% > 20% tot 50% ± 25% > 10% tot 20% ± 30% 10% ± 50% LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

29 8 Robuustheid De robuustheid wordt nagegaan aan de hand van controlekaarten. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

30 9 Meetonzekerheid De meetonzekerheden werden berekend volgens de procedure LAB P 508 Meetonzekerheid. De meetonzekerheid werd op drie verschillende concentratieniveaus bepaald (1/2 MRL of relevante concentratie, MRL of 2x relevante concentratie en 3/2 MRL of 3x relevante concentratie). Voor de toegelaten benzimidazolen werd er ook een meetonzekerheid berkeend voor de relevante concentratie. De kwantificatie van de gebruikte data gebeurde op basis van de data bekomen met een éénpuntskalibratie (voor de relevante concentratie) of met een volledige kalibratiecurve (1/2 MRL of relevante concentratie, MRL of 2x relevante concentratie en 3/2 MRL of 3x relevante concentratie). Meetonzekerheid voor vier concentratieniveaus LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

31 Meetonzekerheid niveau hoog niveau midden niveau laag niveau relevant (MO) % MO concentratiebereik % MO concentratiebereik % MO concentratiebereik % MO concentratiebereik ABZ-NH2-SO2 38 > 1,5 µg/kg 41 0,5-1,5 µg/kg 35 < 0,5 µg/kg ABZ-SO 47 > 1,5 µg/kg 54 0,5-1,5 µg/kg 46 < 0,5 µg/kg ABZ-SO2 37 > 1,5 µg/kg 41 0,5-1,5 µg/kg 43 < 0,5 µg/kg ABZ 25 > 1,5 µg/kg 29 0,5-1,5 µg/kg 38 < 0,5 µg/kg MBZ-OH 31 > 1,5 µg/kg 35 0,5-1,5 µg/kg 46 < 0,5 µg/kg MBZ-NH2 35 > 1,5 µg/kg 40 0,5-1,5 µg/kg 33 < 0,5 µg/kg MBZ 25 > 1,5 µg/kg 29 0,5-1,5 µg/kg 29 < 0,5 µg/kg TCB-keto 32 > 15,0 µg/kg 26 5,0-15,0 µg/kg 25 < 5,0 µg/kg TCB-SO 26 > 6,0 µg/kg 25 2,0-6,0 µg/kg 26 < 2,0 µg/kg TCB-SO2 29 > 3,0 µg/kg 31 1,0-3,0 µg/kg 33 < 1,0 µg/kg TCB 30 > 1,5 µg/kg 35 0,5-1,5 µg/kg 24 < 0,5 µg/kg OFZ 25 > 600 µg/kg µg/kg 27 10,0-200 µg/kg 31 < 10,0 µg/kg OFZ-SO2 26 > 600 µg/kg µg/kg 26 10,0-200 µg/kg 28 < 10,0 µg/kg FBZ 40 > 600 µg/kg µg/kg 36 10,0-200 µg/kg 35 < 10,0 µg/kg FEB 46 > 600 µg/kg µg/kg 49 10,0-200 µg/kg 56 < 10,0 µg/kg TBZ-OH 29 > 1,5 µg/kg 33 0,5-1,5 µg/kg 36 < 0,5 µg/kg TBZ 24 > 1,5 µg/kg 25 0,5-1,5 µg/kg 34 < 0,5 µg/kg FLU-NH2 30 > 600 µg/kg µg/kg 30 10,0-200 µg/kg 37 < 10,0 µg/kg FLU 29 > 600 µg/kg µg/kg 29 10,0-200 µg/kg 27 < 10,0 µg/kg LEV 40 > 1,5 µg/kg 50 0,5-1,5 µg/kg 40 < 0,5 µg/kg OXI 26 > 0,3 µg/kg 34 0,1-0,3 µg/kg 31 < 0,1 µg/kg Albendazol 33 > 4,4 µg/kg 37 1,5-4,4 µg/kg 36 < 1,5 µg/kg Mebendazol 23 > 4,9 µg/kg 28 1,6-4,9 µg/kg 27 < 1,6 µg/kg Triclabendazol 31 > 24,2 µg/kg 28 8,1-24,2 µg/kg 28 < 8,1 µg/kg Oxfendazol 22 > 1895 µg/kg µg/kg 22 31,6-632 µg/kg 23 < 31,6 µg/kg Fenbendazol 22 > 1895 µg/kg µg/kg 22 31,6-632 µg/kg 23 < 31,6 µg/kg Febantel 22 > 1895 µg/kg µg/kg 22 31,6-632 µg/kg 23 < 31,6 µg/kg Thiabendazol 22 > 3,0 µg/kg 25 1,0-3,0 µg/kg 33 < 1,0 µg/kg Flubendazol LVM 27 > 1200 µg/kg µg/kg 27 20,0-400 µg/kg 28 < 20,0 µg/kg Flubendazol ei 27 > 600 µg/kg µg/kg 28 10,0-200 µg/kg 25 < 10,0 µg/kg LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

32 10 Bijlagen 10.1 Overzicht MRL s voor benzimidazolen Verboden benzimidazolen in eieren: Albendazol ABZ-NH2-SO2 ABZ-SO ABZ-SO2 ABZ Mebendazol MBZ-OH MBZ-NH2 MBZ Triclabendazol TCB-keto TCB-SO TCB-SO2 TCB Thiabendazol TBZ-OH TBZ Levamisol LEV Oxibendazol OXI Closantel CLOS Toegelaten benzimidazolen in eieren (met MRL): Oxfendazol 1300 µg/kg OFZ OFZ-SO2 FBZ FEB Fenbendazol 1300 µg/kg OFZ OFZ-SO2 FBZ FEB Febantel 1300 µg/kg OFZ OFZ-SO2 FBZ FEB Flubendazol 400 µg/kg FLU-NH2 FLU Foxim 60 µg/kg FOX Formules berekening som: Albendazol = 1,109x ABZ-NH2-SO2 + 0,94x ABZ-SO + 0,89x ABZ-SO2 Mebendazol = 0,994x MBZ-OH + 1,244x MBZ-NH2 + 1x MBZ Triclabendazol = 1x TCB-keto + 0,878x TCB-SO + 0,842x TCB-SO2 + 0,916x TCB Oxfendazol = 1,051x OFZ + 1x OFZ-SO + 1,107x FBZ Fenbendazol = 1,051x OFZ + 1x OFZ-SO + 1,107x FBZ Febantel = 1,051x OFZ + 1x OFZ-SO + 1,107x FBZ Thiabendazol = 1x TBZ-OH + 1x TBZ Flubendazol LVM = 1x FLU-NH2 + 1x FLU Flubendazol ei = 1x FLU LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

33 10.2 Foto s Foto 1: Afwegen van ei. Foto 2: Extractie van benzimidazolen uit ei met behulp van ethylacetaat. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34

34 Foto 3: Centrifugeren bij 4 C. Foto 4: Indampen van extract. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /34