VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION

Transcriptie

1 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode Méthode d analyse Techniek Technique Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices Datum laatste aanpassing / Date du dernière adaption Bepaling van het aantal gisten en schimmels (25 C) (I-MET 048) Aanmaken verdunningsreeks - uitplaten aflezen platen ISO en 2 Voedingswaren 12/12/2012

2 Overzicht van de prestatiekenmerken : Herhaalbaarheid Intralab- Meetonzekerheid Relatieve juistheid reproduceerbaarheid Categorie 2 DRBC: 0.26 log DRBC: 0.37 DRBC: 0.26 log DRBC: < I 0.35 log I DG 18: 0.30 log DG 18: 0.41 log DG 18: 0.30 log DG 18: < I 0.35 log I Categorie 3 DRBC: 0.19 log DRBC: 0.45 log DRBC: 0.32 log DRBC: < I 0.40 log I DG 18: 0.17 log DG 18: 0.22 log DG 18: 0.15 log DG 18: < I 0.40 log I De validatie voldoet aan de procedure LAB 00 P180 De laboratoria die deze methode willen overnemen, moeten aantonen dat de criteria hieronder aangegeven voldaan zijn voor de betreffende matrices/parameters: Deelnemen aan een ringtest met het bekomen van goede resultaten. Behalen van een herhaalbaarheid van 0.50 log en intralabreproduceerbaarheid van 1 log. Historiek validatiedossier: Versie Herziening Reden Wijzigingen door / datum 1 EH/ Aanpassing dossier 2009, 2010 naar de nieuwe template en procedure P180 Samenvoegen dossier en aanvullen met extra gegevens en foto s

3 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode Méthode d analyse Techniek Technique Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices Type validatie Type de validation Verantwoordelijke (Naam en functie) Responsable (Nom et fonction) Opgesteld door Rédaction par Bepaling van het aantal gisten en schimmels (25 C) (I-MET 048) Aanmaken verdunningsreeks - uitplaten aflezen platen ISO en 2 Categorie 2 en 3 (volgens ISO 19036) Verificatie Elly Harnie Sectieverantwoordelijke biologische analyses Naam Nom: Elly Harnie Handtekeningen - Signatures: get. Functie - Fonction: Sectieverantwoordelijke biologische analyses Datum - Date: 05/12/2012 Medewerkers (Naam en functie) Collaborateurs (Nom et fonction) Periode van validatie Période de validation Methode goedgekeurd en geschikt bevonden door Méthode approuvée et jugé convenable pour la routine par Analisten microbiologie Liesbeth Stas, Kristof De Greif, Sandra De Cocker, Anja Van Beversluys, Stefanie Vanbiesbrouck, Conny De Schepper, Hilde Van Remoortel, Chantal Focquet, Mieke De Mits Start - Début: Einde - Fin: Dit rapport is een herwerking van het originele rapport, naar aanleiding van de nieuwe template. De oorspronkelijke validatie werd uitgevoerd in 2009, Naam Nom: Ronny Martens Handtekeningen - Signatures: get. Functie - Fonction: QAM Datum - Date: 06/12/2012 Hierna volgt een beschrijving van de resultaten van het validatieonderzoek zoals aangegeven in stap 8 van de procedure LAB 00 P 180. Ce qui suit est une description des résultats de l'étude de validation comme indiqué dans l'étape 8 de la procédure LAB P LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

4 Samenvatting validatiegegevens Résumé des données de validation Overzicht matrices / validatieparameters / criteria Matrices : (volgens ISO 19036) - categorie 2: gemengde vaste stoffen (bijvoorbeeld paté) - categorie 3: kleine (of zeer kleine) vaste stoffen (bijvoorbeeld versneden groenten) Validatieparameters : - Herhaalbaarheid - Intralabreproduceerbaarheid / meetonzekerheid - Relatieve juistheid Criteria: De bekomen resultaten voor proefmonsters en besmette monsters werden getoetst aan volgende criteria (= criteria voor andere bepalingen binnen het laboratorium): - Criterium voor de herhaalbaarheid: 0.22 log - Criterium voor de intralabreproduceerbaarheid: 0.47 log - Criterium voor de relatieve juistheid: 0.35 log De bekomen resultaten voor het referentiemonster werden getoetst aan volgende criteria (= criteria voor andere bepalingen binnen het laboratorium): - Criterium voor de herhaalbaarheid is 0.22 log - Criterium voor de relatieve juistheid is 0.20 log LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

5 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION... 1 BEPALING VAN HET AANTAL GISTEN EN SCHIMMELS (25 C)... 1 (I-MET 048)... 1 SAMENVATTING VALIDATIEGEGEVENS RÉSUMÉ DES DONNÉES DE VALIDATION INLEIDING BESMETTE MONSTERS CATEGORIE WERKWIJZE RESULTATEN CATEGORIE Resultaten categorie 2 DRBC Resultaten categorie 2 DG BESMETTE MONSTERS CATEGORIE WERKWIJZE RESULTATEN CATEGORIE Resultaten categorie 3 DRBC Resultaten categorie 3 DG REFERENTIEMONSTER RINGTESTEN BESLUIT VALIDATIEPARAMETERS FOTO S VAN DE METHODE LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

6 Overzicht validatietesten 1 Inleiding Dit dossier bevat een herwerking van het oorspronkelijke validatiedossier van de bepaling van gisten en schimmels volgens ISO en 2, aangepast volgens de nieuwe validatieprocedure LAB 00 P 180. De oorspronkelijke validatie werd uitgevoerd in 2009, 2010; voorheen werd in het labo de ISO methode 7954 (YGC-agar) gebruikt. Volgens ISO en 2 wordt afhankelijk van de wateractiviteit (a w ) van het product een verschillende bodem gebruikt: indien de a w van het monster groter is dan 0.95 zal er gewerkt worden met Dichloraan Rose Bengaal Chloramphenicol agar (DRBC). Indien de a w kleiner is dan of gelijk aan 0.95 wordt Dichloraan18% glycerol agar (DG18) gebruikt. In dit medium werd 18% glycerol toegevoegd om de wateractiviteit van het medium te verlagen. In de validatieproeven werden beide media getest. Voor de bepaling van de a w wordt verwezen naar het desbetreffende validatiedossier. De validatieparameters werden bepaald aan de hand van besmette monsters. Het referentiemonster werd getest alsook werd deelgenomen aan ringtesten. 2 Besmette monsters categorie 2 De validatieparameters werden bepaald aan de hand van besmette monsters. 2.1 Werkwijze Besmettingsoplossing: - Een öse van één gistcultuur en een öse van één schimmelcultuur (LMG stammen op plaat) overbrengen in 10 ml BHI - BHI gedurende 1 dag incuberen bij 25 C - Aanmaken van de verdunningsreeks - Uitplaten van de verdunningen 10-4, 10-5, 10-6, 10-7 (0.1 ml / verdunning) op DRBC/DG18 - Incubatie zoals voorgeschreven in de I-MET Besmetten van monsters: - Weeg 10 g deelmonster van het proefmonster af in een Stomacherzak LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

7 - Voeg 300 µl van verdunning 10-1 (T) van de besmettingsoplossing toe - Voeg 90 ml peptoonwater toe = 10-1 = T - Homogeniseer - Maak de verdere decimale verdunningsreeks aan en plaat uit (10-1 (T), 10-2 (H) en 10-3 (D); telkens 0.1 ml) - Incubatie zoals voorgeschreven in de I-MET Proefopstelling (cfr. ISO 19036): Monster Analist 1: Analist 2: in duplo besmetten + analyseren in duplo besmetten + analyseren conditie A conditie B analyse blanco monsters analyse blanco monsters tellen opkweek Conditie A en B moeten verschillen in het gebruik van: - balans en stomacher - dilucupshaker en pipetten - broedstoven - incubatietijd (conditie A: ondergrens; conditie B: bovengrens) Deze verschillende condities werden genoteerd in het analyseboekje. 2.2 Resultaten categorie Resultaten categorie 2 DRBC De gegevens voor de herhaalbaarheid (DRBC) zijn aanwezig in onderstaande tabel. De herhaalbaarheid bedraagt 0.26 log en ligt in de lijn van de vooropgestelde waarde van 0.22 log. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

8 Datum Monster Analist Resultaat 1 cfu/g Resultaat 2 cfu/g verschil LOG 24/11/2009 Paté CDS MDM /11/2009 Vleessalade CDS MDM /01/2010 Paté AVB SDC /01/2010 Vleessalade AVB SDC /01/2010 Paté LS MDM /01/2010 Vleessalade LS MDM /02/2010 Paté KDG HVR /02/2010 Vleessalade KDG HVR In onderstaande tabel staan de resultaten voor de bepaling van de meetonzekerheid op DRBC. De intralabreproduceerbaarheid bedraagt 0.37 log en voldoet daarmee aan het vooropgestelde criterium van 0.47 log. De meetonzekerheid bedraagt 0.26 log. Resultaat A (kve/g of kve/ml) Resultaat B (kve/g of kve/ml) Datum Staal nummer Matrix Analisten /11/ paté CDS/MDM /11/ vleessalade CDS/MDM /01/ paté AVB/SDC /01/ vleessalade AVB/SDC /01/ paté LS/MDM /01/ vleessalade LS/MDM /02/ paté KDG/HVR /02/ vleessalade KDG/HVR /09/ filet américain AVB/CF /09/ filet américain AVB/CF Voor bovenstaande gegevens werd de relatieve juistheid (d) berekend. Deze wordt samengevat in onderstaande tabel. De blanco resultaten van de niet-besmette monsters zijn in de tweede tabel aanwezig. De relatieve juistheid is kleiner dan het vooropgestelde criterium van ± 0.35 log. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

9 Datum Monster Aard cfu / g log d (log) 24/11/ paté /11/ vleessalade 29/01/ paté 29/01/ vleessalade /02/ paté 5/02/ vleessalade a, b = duplo's Blanco Analist cfu / g 1 CDS < CDS LS < LS < HVR < HVR Resultaten categorie 2 DG18 De gegevens voor de herhaalbaarheid (DG18) zijn aanwezig in onderstaande tabel. De herhaalbaarheid bedraagt 0.30 log en ligt hoger dan de vooropgestelde waarde van 0.22 log. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

10 Datum Monster Analist 24/11/2009 Paté CDS MDM 24/11/2009 Vleessalade CDS MDM 15/01/2010 Paté AVB SDC 15/01/2010 Vleessalade AVB SDC 29/01/2010 Paté LS MDM 29/01/2010 Vleessalade LS MDM 5/02/2010 Paté KDG HVR 5/02/2010 Vleessalade KDG HVR Resultaat 1 cfu/g Resultaat 2 cfu/g verschil LOG In onderstaande tabel staan de resultaten beschikbaar voor de bepaling van de meetonzekerheid op DG 18. De intralabreproduceerbaarheid bedraagt 0.41 log en voldoet daarmee aan het vooropgestelde criterium van 0.47 log. De meetonzekerheid bedraagt 0.30 log. Resultaat A (kve/g of kve/ml) Resultaat B (kve/g of kve/ml) Staal nummer Matrix Analisten Datum /11/ paté CDS/MDM /11/ vleessalade CDS/MDM /01/ paté AVB/SDC /01/ vleessalade AVB/SDC /01/ paté LS/MDM /01/ vleessalade LS/MDM /02/ paté KDG/HVR /02/ vleessalade KDG/HVR /09/ filet américain AVB/CF /09/ filet américain AVB/CF LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

11 Voor bovenstaande gegevens werd de relatieve juistheid (d) berekend. Deze wordt samengevat in onderstaande tabel. De blanco resultaten van de niet-besmette monsters zijn in de tweede tabel aanwezig. De relatieve juistheid is meestal kleiner dan het vooropgestelde criterium van ± 0.35 log. Datum Monster Aard cfu / g log d (log) 24/11/ paté /11/ vleessalade /01/ paté /01/ paté /01/ vleessalade /02/ paté a, b = duplo's Blanco Analist cfu / g 1 CDS < CDS AVB < LS < LS < HVR < 100 LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

12 3 Besmette monsters categorie Werkwijze Zie Resultaten categorie Resultaten categorie 3 DRBC De gegevens voor de herhaalbaarheid (DRBC) zijn aanwezig in onderstaande tabel. De herhaalbaarheid bedraagt 0.19 log en is vergelijkbaar met het vooropgestelde criterium van 0.22 log. Resultaat 1 Resultaat 2 verschil Datum Monster Analist cfu/g cfu/g LOG 24/11/ CDS MDM /01/ LS MDM /02/ KDG HVR In onderstaande tabel staan de resultaten voor de bepaling van de meetonzekerheid op DRBC. De intralabreproduceerbaarheid bedraagt 0.45 log en voldoet daarmee aan het vooropgestelde criterium van 0.47 log. De meetonzekerheid bedraagt 0.32 log. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

13 Resultaat A (kve/g of kve/ml) Resultaat B (kve/g of kve/ml) staal nummer Matrix Analisten Datum /11/ geraspte groenten /01/ geraspte groenten /01/ geraspte groenten CDS/MDM AVB/SDC LS/MDM /02/ geraspte groenten KDG/HVR /09/ versneden groenten AVB/CF /09/ versneden groenten AVB/CF /11/ versneden wortelen AVB/KDG /11/ versneden wortelen AVB/KDG /11/ AVB/KDG /11/ versneden wortelen AVB/LS Voor bovenstaande gegevens werd de relatieve juistheid (d) berekend. Deze wordt samengevat in onderstaande tabel. De blanco resultaten van de niet-besmette monsters zijn in de tweede tabel aanwezig. De relatieve juistheid is kleiner dan het vooropgestelde criterium van ± 0.35 log. Datum Monster Aard cfu / g log d (log) 24/11/ versneden CDS wortelen MDM /01/ versneden LS wortelen MDM /02/ versneden KDG a, b = duplo's Blanco Analist cfu / g 1 MDM MDM KDG < 100 wortelen HVR LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

14 3.2.2 Resultaten categorie 3 DG 18 De gegevens voor de herhaalbaarheid (DG18) zijn aanwezig in onderstaande tabel. De herhaalbaarheid bedraagt 0.17 log en voldoet aan het vooropgestelde criterium van 0.22 log. Resultaat 1 Resultaat 2 Datum Monster Analist cfu/g cfu/g verschil LOG 24/11/ CDS MDM /01/ AVB SDC /01/ LS MDM /02/ KDG HVR In onderstaande tabel staan de resultaten voor de bepaling van de meetonzekerheid op DG18. De intralabreproduceerbaarheid bedraagt 0.22 log en voldoet daarmee aan het vooropgestelde criterium van 0.47 log. De meetonzekerheid bedraagt 0.15 log. Resultaat A (kve/g of kve/ml) Resultaat B (kve/g of kve/ml) staal nummer Matrix Analisten Datum /11/ geraspte groenten CDS/MDM /01/ geraspte groenten AVB/SDC /01/ geraspte groenten LS/MDM /02/ geraspte groenten KDG/HVR /09/ geraspte groenten KDG/SV /09/ geraspte groenten KDG/SV /09/ geraspte groenten KDG/AVB /09/ versneden groenten KDG/AVB /09/ versneden groenten AVB/CF /11/ AVB/KDG Voor bovenstaande gegevens werd de relatieve juistheid (d) op DG18 berekend. Deze wordt samengevat in onderstaande tabel. De blanco resultaten van de niet-besmette monsters zijn in de tweede tabel aanwezig. De relatieve juistheid is meestal kleiner dan het vooropgestelde criterium van ± 0.35 log. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

15 Datum Monster Aard cfu / g log d (log) 24/11/ versneden CDS wortelen MDM /01/ versneden AVB wortelen SDC /01/ versneden LS wortelen MDM /02/ versneden KDG a, b = duplo's Blanco Analist cfu / g 1 MDM < AVB < MDM < KDG < 100 wortelen HVR Referentiemonster Gedurende de validatietesten werd het referentiemonster van Senate meegenomen op zowel DRBC als op DG18-agar. Het monster werd telkens tweemaal uitgeplaat. De resultaten (cfu/g) zijn aanwezig in onderstaande tabel. Datum Analist DRBC 1 DRBC 2 DG18 1 DG /09/2009 LS /09/2009 SV /09/2009 AVB Deze waarden voldoen aan het criterium voor de herhaalbaarheid, namelijk 0.22 log. En voldoen ook aan het criterium van het certificaat (14400 cfu/g). LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

16 In januari 2010 werd het referentiemonster viermaal geanalyseerd (cfu/g). Het gemiddelde logverschil was kleiner dan 0.20 log. Analist DRBC 1 DRBC 2 Logverschil KDG LS AVB HVR Ringtesten Op 07/12/2009 werd door SV een ringanalyse uitgevoerd voor gisten en schimmels bij QM en Senate. Het staal werd in duplo geanalyseerd op 3 bodems: DRBC, DG18 en YGC. De resultaten (cfu/g) worden samengevat in onderstaande tabel. Organisator Monsternummer DRBC DG18 YGC QM GA GA duplo 800 GA 1200 Senate duplo GA = geschat aantal Het logverschil met de resultaten op YGC is kleiner dan 0.2 log. De resultaten kwamen overeen met de organisator. 6 Besluit validatieparameters Een samenvatting van de validatieparameters is aanwezig in onderstaande tabel. Herhaalbaarheid Intralab- Meetonzekerheid Rel. juistheid reproduceerbaarheid Categorie 2 DRBC: 0.26 log DRBC: 0.37 DRBC: 0.26 log DRBC: < I 0.35 log I DG 18: 0.30 log DG 18: 0.41 log DG 18: 0.30 log DG 18: < I 0.35 log I Categorie 3 DRBC: 0.19 log DRBC: 0.45 log DRBC: 0.32 log DRBC: < I 0.40 log I DG 18: 0.17 log DG 18: 0.22 log DG 18: 0.15 log DG 18: < I 0.40 log I LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

17 De herhaalbaarheid ligt hoger dan voor andere parameters, de intralabreproduceerbaarheid is vergelijkbaar en de relatieve juistheid ook. 7 Foto s van de methode Hieronder volgen enkele foto s van de methode. Uitplaten van stalen Uitwrijven van stalen LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16

18 Aflezen van platen LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /16