Erfelijke rode bloedcelafwijkingen: diagnostiek en kliniek. A.J. (Adriaan) van Gammeren KCHL Amphia Ziekenhuis, Breda,

Transcriptie

1 Erfelijke rode bloedcelafwijkingen: diagnostiek en kliniek A.J. (Adriaan) van Gammeren KCHL Amphia Ziekenhuis, Breda,

2 Casus TB, anamnese Nederlandse jongen, 5 jaar oud Blanco voorgeschiedenis Sinds 7 dagen koorts tot 40 graden Celsius. Lusteloos, verminderde intake Geen huiduitslag Erg moe en bleek Alert, vrolijk, geen erg zieke indruk

3 Casus TB, laboratoriumdiagnostiek Test Referentie Uitslag Hemoglobine mmol/l 2.0 (PL) Leukocyten E9/L 5.3 Trombocyten E9/L 132 (L) MCV fl 82 Reticulocyten E9/L 4 (L) Lymfocyten E9/L 3.00 Monocyten E9/L 0.21 Eosinofielen E9/L 0.33 Basofielen E9/L 0.01 Segmenten E9/L 1.73 Microplanie ++ Hyperchromasie +++ Sferocyten ++ Irregulaire a.s. Negatief Dir. AG test Negatief

4 Casus TB, laboratoriumdiagnostiek, vervolg Test Referentie Uitslag CRP mg/l <1 Bilirubine totaal µmol/l 11 ASAT 0-35 U/L 24 ALAT 0-45 U/L 15 LD U/L 398 (H) Alkalisch fosfatase U/L 72 gamma-gt 0-55 U/L 11 Haptoglobine g/l <0.10 (L) Ferritine µg/l 701 (H) Foliumzuur nmol/l 20.9 Vitamine B pmol/l 704 (H)

5 Casus TB, laboratoriumdiagnostiek, vervolg CMV IgM: CMV IgG: EBV-VCA IgM: EBV-EBNA IgG: Mycoplasma IgM: Parvovirus (B19) IgG: Parvovirus (B19) IgM: zwak positief negatief zwak positief negatief zwak positief negatief positief Serologie meest passend bij acute Parvo infectie. Advies: over 2-3 weken serologie herhalen voor definitieve bevestiging primaire infectie.

6 Conclusie: Transient Erythroblastopenia in Childhood (TEC) Parvo B19 infectie en hemolytische anemie obv hereditaire sferocytose

7 Pathophysiology of Parvovirus B19 Infection. Pathofysiologie van Parvovirus B19 infectie Hemolyse / erytropoetische stress Young NS, Brown KE. N Engl J Med 2004;350:

8 Casus TB, laboratoriumdiagnostiek Test Referentie Uitslag Hemoglobine mmol/l 2.0 (PL) Leukocyten E9/L 5.3 Trombocyten E9/L 132 (L) MCV fl 82 Reticulocyten E9/L 4 (L) Lymfocyten E9/L 3.00 Monocyten E9/L 0.21 Eosinofielen E9/L 0.33 Basofielen E9/L 0.01 Segmenten E9/L 1.73 Microplanie ++ Hyperchromasie +++ Sferocyten ++ Irregulaire a.s. Negatief Dir. AG test Negatief Spectrine % 91% eosin-5-maleimide (EMA) Band 3 expressie: >75 % 75 % AGLT 50 % lysis na 50 sec >1800 sec

9 Hyperchromasie microplanie Microscopische diff.

10 Hereditaire Sferocytose South-East Asian ovalocytosis (SAO) Hereditaire stomatocytose Hereditaire Elliptocytose

11 Spectrine netwerk

12 Levenscyclus van de rode bloedcel Levensduur ~ 120 dagen ~ 0.8% klaring per dag Vesiculatie Fagocytose (milt) Verkorte levensduur

13 Shearstress en deformatie

14 De milt en sferocytose filtersysteem kwaliteitscontrole van erytrocyten Vergrote milt door dichtslibben ws. ook een effect op de trombocyten. Reina E. Mebius and Georg Kraal Nature Reviews Immunology 5, (August 2005)

15 De milt en sferocytose

16 Mutaties in erfelijke membraanafwijkingen P.F.H. Franck en dr. P. Wijermans, NTVH 2014 (11), p13-21

17 Osmotische resistentie test (NaCl gradiend) Zure-glycerol lysis test (AGLT) Lysistijd van ery s in hypotoon milieu in aanwezigheid van glycerol Sterk verkort bij HS, niet specifiek Bij baby s jonger dan 1 jaar kan HS worden gemaskeerd door een normale osmotische rigiditeit Na TEC reticulocyten-boost Cave: transfusie

18 Scheiding van membraaneiwitten d.m.v. gelelectrofores Kleuring en densitometrische kwantificatie Spectrine: kwantitatieve bepaling mbv I-125 gelabeld anti-spectrine (normaal > 85%) Band 3/Rh(AG): eosine 5 malaemide (EMA) kleuring

19 Vervormbaarheid door een ektacytometer LORRCA toevoegen NGS?

20 Vervormbaarheid door een ektacytometer voorbeeld P.F.H. Franck en dr. P. Wijermans, NTVH 2014 (11), p13-21

21 Take Home: Parvo B19 TEC reticulocytopenie met diepe anemie. Denk ook aan andere oorzaken! Hemolyse meestal mild, soms normocytaire anemie, meestal geen anemie door compensatoire reticulocytose. Sluit een AIHA uit (DAGT + IAGT positief) Geen conclusieve test: gebruik en interpretatie van meerdere testen noodzakelijk Diagnostiek bij pasgeborenen en na TEC episode mogelijk fout-negatief. Cave: transfusie!

22 Vragen?

23

24

25 Reserve dias

26 Beenmerg (parvob19-geinfecteerd) Grote pro-erytroblasten Geen erytropoese

27 Band 3/Rh(AG): eosine 5 malaemide (EMA) kleuring Olga Ciepiela et al. Clin Chem Lab Med 2013; 51(4):

28 Microscopische diff. Hyperchromasie microplanie

29