Invloed van emm software op flagging voor Sysmex XE Dr. Annemie Vandermeersch Supervisor: Dr. Sc. Willy Goossens

Invloed van emm software op flagging voor Sysmex XE-5000. Dr. Annemie Vandermeersch Supervisor: Dr. Sc. Willy Goossens 26-04-2011

Overzicht Aanleiding Sysmex XE-5000 Algemene meet- en detectieprincipes Flagging Wat is emm? Vragen Retrospectieve analyse UZ Leuven Conclusies To Do

Aanleiding Sysmex XE-5000: upgrade softwareversie 00-05 naar 00-06 (=emm) Verhoogde efficiëntie voor flagging via nieuwe algoritmes en waarschuwingsregels???

Sysmex XE-5000 Algemene specificaties: vereist staalvolume: 200 µl/130 µl (closed/open mode) 40 µl voor capillary mode 150 stalen/uur gegevensopslag: 10000 stalen

37 parameters Witte bloedcellen WBC Absoluut aantal neutrofielen NEUT# Rode bloedcellen RBC Absoluut aantal lymfocyten LYMPH# Hemoglobine HGB Absoluut aantal monocyten MONO# Hematocriet HCT Absoluut aantal eosinofielen EO# Gemiddeld RBC volume MCV Absoluut aantal basofielen BASO# Gemiddeld RBC hemoglobine MCH Percentage immature granulocyten IG% Gemiddeld RBC HGB-concentratie MCHC Absoluut aantal immature granulocyten IG# Bloedplaatjes PLT Absoluut aantal hematopoïetische HPC# progenitorcellen RBC volumespreiding SD RDW-SD Percentage gekernde RBC NRBC% RBC volumespreiding CV RDW-CV Absoluut aantal gekernde RBC NRBC# PLT volumespreiding PDW Percentage reticulocyten RET% Gemiddeld PLT volume MPV Absoluut aantal reticulocyten RET# Percentage macrobloedplaatjes P-LCR Hoge fluorescentie ratio HFR Platocriet PCT Medium fluorescentie ratio MFR Percentage neutrofielen NEUT% Lage fluorescentie ratio LFR Percentage lymfocyten LYMPH% Immature reticulocytenfractie IRF Percentage monocyten MONO% Reticulocyten hemoglobine equivalent RET-He Percentage eosinofielen EO% Immature bloedplaatjesfractie IPF Percentage basofielen BASO%

Meet- en detectieprincipes Meetkanalen Hemoglobine PLT, RBC, HCT WBC DIFF-kanaal WBC/BASO-kanaal IMI-kanaal NRBC-kanaal RET-kanaal Technologie SLS-methode Elektrische impedantie Fluorescentie flowcytometrie Fluorescentie flowcytometrie RF-DC methode Fluorescentie flowcytometrie Fluorescentie flowcytometrie

Hemoglobine: SLS-methode SLS = natriumlaurylsulfaat (een detergens) Lyse RBC door absorptie van SLS aan RBC-membraan

Hemoglobine: SLS-methode Hydrofobe groepen van SLS binden aan Hb oxidatie van ijzer: Fe2+ Fe3+ Hydrofiele groepen van SLS binden met Fe3+ vorming van SLS-Hb = stabiel methemoglobinederivaat Fotometrische meting van SLS-Hb bij 540 nm

Elektrische impedantie (DC sheath flow) Cellen stromen één per één door nauw meetkanaal tussen 2 elektroden via concentrische vloeistofstromen ( hydrodynamic focusing ) Elke cel veroorzaakt weerstandsstijging elektrisch signaal Bepaling RBC/PLT: Grootte elektrische puls volume bloedcel Aantal signalen aantal cellen Integratie van meetsignalen vormt HCT

PLT, RBC, HCT: elektrische impedantie Histograms: RBC: Gaussiaanse verdeling Spreiding volume RBC: RDW-SD en RDW-CV PLT: lognormale verdeling Gemiddelde volume PLT: MPV Spreiding volume PLT: PDW Berekeningen: MCV (HCT/RBC) MCH (HGB/RBC) MCHC (HGB/HCT)

WBC DIFF-kanaal: fluorescentie flowcytometrie Surfactant (lyse RBC, WBC) Fluorochroom (polymethine): DNA/RNA Hydrodynamic focusing: cellen één per één belicht Lichtverstrooiing: onder 2 hoeken Fluorescentie: zijdelings 4 types celinformatie: Telling aantal WBC (lichtverstrooiingspulsen) FSC (forward scattered light): grootte cel SSC (side scattered light): inwendige structuur (kernvorm, granulen) SFL (side fluorescence light): DNA, RNA

WBC DIFF-kanaal: fluorescentie flowcytometrie SSC/SFL

WBC/BASO: fluorescentie flowcytometrie Zuur milieu (ph = 2) Lyse WBC, uitz. baso SSC/FSC (IG!)

IMI-kanaal: RF-DC methode IMI = immature myeloid information Lipofiel agens Lyse WBC, uitz. IG Impedantiemeting met gelijkstroom (DC) en wisselstroom (RF) Wisselstroom energierijker, dringt cel ten dele binnen Pulsgrootte granulariteit, onregelmatigheid kern Verspreiding volgens uitrijpingsgraad

NRBC: fluorescentie flowcytometrie Lyse RBC Reagens: WBC doorlaatbaar Kernen NRBC SFL/FSC Automatische correctie WBC

RET: fluorescentie flowcytometrie Fluorochroom (polymethine, RNA) Hydrodynamische focussing SFL/FSC fluorescentie-neg: RBC (geen RNA) Toenemende SFL: RET Kleine FSC/SFL: PLT Maturiteit (hoeveelheid RNA): LFR (low fluorescence rate) MFR (medium fluorescence rate) HFR (high fluorescence rate) IRF (immature reticulocyten fractie): MFR + HFR / LFR + MFR + HFR Ijzertherapie/EPO/BM-transplantatie

RET: fluorescentie flowcytometrie Optische meting PLT IPF (immature PLT fractie): hogere RNA-inhoud DD/ trombopenie BM-transplantatie

Flagging Aflijning celpopulaties: niet voldaan aan criteria Gecodeerde waarschuwingen ( IP-flags ) Pathologisch/microscopisch onderzoek Aanpassing gevoeligheid (Q-waarde, 0-300) IP-flags : morfologie- en numerieke vlaggen rules (=validatieregels) Bijkomende waarschuwingen Studie: IP-vlaggen WBC

Item Limiet (*) Meetkanaal WBC Abn Scattergram n.v.t. WBC/BASO, DIFF NRBC Abn Scattergram n.v.t. NRBC RBC Abn Distribution n.v.t. RBC Dimorphic Population n.v.t. RBC RET Abn Scattergram n.v.t. Retic PLT Abn Scattergram n.v.t. Retic PLT Abn Distribution n.v.t. PLT Blasts? 150 DIFF, IMI (scattergram) Immature Gran? 190 DIFF, IMI (scattergram) Left Shift? 190 DIFF, IMI (scattergram) Atypical Lympho? 100 DIFF, IMI (scattergram) Abn Lympho/L-Blasts? 100 DIFF, IMI (scattergram) NRBC? 100 DIFF (scattergram) + numerisch RBC Lyse resistance 100 DIFF, WBC/BASO (scattergram) + numerisch (techn.parameters) RBC Agglutination? 100 RBC + numerisch (MCHC, MCH, techn.parameters) Turbidity/HGB Interference? 100 Numerisch (MCHC) Iron Deficiency? 100 Numerisch (MCHC, MCV, RDW) HGB Defect? 100 Numerisch (MCV, RDW) Fragments? 100 Ret (scattergram) + numerisch (RDW, MCV, MCHC, techn.parameters) PLT Clumps? 100 DIFF, IMI, NRBC (scattergram) PLT Clumps (S)? 100 Numerisch (PLT, PDW, MPV, P-LCR, techn.parameters)

We laten Sysmex even aan het woord

Uitgangspunt IMI-kanaal Er kan overlap zijn tussen vlaggebieden voor blasten en immature granulocyten Geen overlap tussen vlaggebieden voor blasten en atypische lymfocyten DIFF-kanaal Geen overlap tussen vlaggebieden voor blasten en immature granulocyten Er is overlap tussen vlaggebieden voor blasten en atypische lymfocyten

Wat verandert er met emm emm = efficient Multichannel Messaging Flagging gebaseerd op combinatie van gegevens uit DIFF- én IMI-kanaal via nieuwe algoritmes Nieuwe algoritmes: Blasts? : algoritme 1 Blasts? : algoritme 2 Atypical Lymphocytes? : algoritme 1 Abnormal Lymphocytes/L-blasts? : algoritme 1

Sysmex claim: Reductie van het aantal gevlagde stalen - Blasts? - Abnormal Lymphocytes/Lymphoblasts? - Atypical Lymphocytes Geen toename van aantal vals-negatieven

Is dat zo???

Vragen Vraag 1: Hoe correleert de emm-software met versie 00-05? Vraag 2: Hoe correleert de emm-software met de microscopie? Vraag 3: Is de emm-software specifieker voor de aanwezigheid van blasten, zonder dat de sensitiviteit hierbij in het gedrang komt?

Studieontwerp Staalselectie: 489 bloedstalen afkomstig van hemato-oncologie patiënten pediatrische oncologie geselecteerde andere patiënten Analyses: Sysmex XE-5000 rev.00-05 Binnen 30 min. Sysmex XE-5000 rev.00-06 (emm) Microscopie 400 cel-diff (2 x 200, 2 uitvoerders) Dagelijks QC (low level/high level) Flagging volgens standaardinstellingen (flag = 100) Verzameling en verwerking van alle gegevens

Correlatie WBC emm vs. 00-05 Correlatiecoëfficiënt r = 1.00

% neutrofielen emm vs. 00-05 emm vs. microscopie Correlatiecoëfficiënt r = 1.00 Correlatiecoëfficiënt r = 0.97

% eosinofielen emm vs. 00-05 emm vs. microscopie Correlatiecoëfficiënt r = 0.94 Correlatiecoëfficiënt r = 0.94

% basofielen emm vs. 00-05 emm vs. microscopie Correlatiecoëfficiënt r = 0.88 Correlatiecoëfficiënt r = 0.46

% lymfocyten emm vs. 00-05 emm vs. microscopie Correlatiecoëfficiënt r = 0.99 Correlatiecoëfficiënt r = 0.96

% monocyten emm vs. 00-05 emm vs. microscopie Correlatiecoëfficiënt r = 0.97 Correlatiecoëfficiënt r = 0.80

% immature granulocyten emm vs. 00-05 emm vs. microscopie Correlatiecoëfficiënt r = 0.91 Correlatiecoëfficiënt r = 0.74

Blast-detectie volgens specifieke flagging Q-flag = rev.00-05 Q-flag = rev.emm Microscopisch blasten: 42/489 00-05: 26/42 stalen Blasts? : 25/26 Abn Ly/L_Bl? : 1/26 emm: 17/42 stalen Blasts? : 8/17 Abn Ly/L_Bl? : 9/17 1/9: ALL Blasten Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag (%) (Abn Ly/ (Abn Ly/ (Blasts?) or (Blasts?) or microsc. (Blasts?) (Blasts?) L_Bl?) L_Bl?) (Abn L/L_B?) (Abn L/L_B?) 1 86 300 300 300 300 2 76,5 300 300 300 300 3 68 300 300 300 300 4 58 300 140 300 140 5 29 300 300 300 300 6 21 300 300 300 300 7 19 300 300 300 300 8 17 300 300 300 300 9 17 280 260 280 260 10 13,5 120 120 11 13 300 300 12 11,5 300 300 13 11 120 100 120 100 14 9,5 300 300 300 300 15 8,5 120 120 16 7 300 300 300 300 17 4 120 120 18 4 19 3,5 20 3,5 300 220 300 220 21 3 300 300 300 300 22 3 23 2,5 300 300 24 2,5 25 2,5 26 2 300 300 27 2 28 2 29 1,5 300 300 300 300 30 1,5 300 300 300 300 31 1,5 32 1,5 300 300 33 1,5 300 300 34 1,5 35 1,5 300 300 36 1,5 37 1 38 1 200 200 39 1 40 1 41 1 42 1

Specificiteit blasten Microscopisch geen blasten: 447/489 stalen 00-05: 130/447 stalen met blastenvlag 111/130: Blasts? 19/130: Abnormal lymphocytes/lymphoblasts? emm: 50/447 12/50: Blasts? (8/12 met Q-waarde 300) 38/50: Abnormal lymphocytes/lymphoblasts? (11/38 met Q-waarde 300)

Sensitiviteit/specificiteit blasten XE-5000 rev.00-05 Microscopisch blasten 1% positief negatief positief 26 (TP) 130 (FP) negatief 16 (FN) 317 (TN) Sensitiviteit: 61.9% PPV: 16.7% Specificiteit: 70.9% NPV: 95.2% XE-5000 emm Microscopisch blasten 1% positief negatief positief 17 (TP) 50 (FP) negatief 25 (FN) 397 (TN) Sensitiviteit: 40.5% PPV: 25.4% Specificiteit: 88.8% NPV: 94.1%

Sensitiviteit/specificiteit blasten XE-5000 rev.00-05 Microscopisch blasten 1% positief negatief positief 26 (TP) 130 (FP) negatief 16 (FN) 2317 (TN) Sensitiviteit: 61.9% PPV: 16.7% Specificiteit: 94.7% NPV: 99.3% XE-5000 emm Microscopisch blasten 1% positief negatief positief 17 (TP) 50 (FP) negatief 25 (FN) 2397 (TN) Sensitiviteit: 40.5% PPV: 25.4% Specificiteit: 98.0% NPV: 99.0%

Blast-detectie aan de hand van meerdere morfologievlaggen Imm Gran? Left Shift? Atypical Ly? WBC Abn Scattergram Sensitiviteit (+ 18) 7 stalen worden nog gemist (%) microsc. (Blasts?) (Abn Ly/L_Bl?) (Imm Gran?) (Left Shift?) (Atypical Ly?) Abn Scattergram 86 300 300 280 1 29 300 19 300 300 9,5 300 3 300 300 300 180 1,5 300 300 300 300 1 1,5 300 300 300 270 1 17 260 76,5 300 300 68 300 300 300 1 21 300 300 210 300 1 17 300 300 300 300 1 7 300 300 300 1 3,5 220 300 58 140 120 4 120 11 100 100 3 300 110 2,5 300 1 2 300 220 1 290 1 240 2 300 1,5 300 1,5 210 13 200 11,5 160 3,5 140 110 8,5 100 1 100 1,5 100 4 1 2,5 1 2,5 1 2 1 13,5 1,5 1,5 1,5 1 1 1

Blast-detectie aan de hand van morfologievlaggen én numerieke vlaggen WBC < 0.6 x 10 9 /L WBC > 40 x 10 9 /L IG > 2.1% Mono > 20% Lymfo > 70% Baso > 5% Neutro > 95% Eo > 30% + 5 nog 2 stalen over (%) (Blasts?) (Abn Ly/ L_Bl?) (Imm Gran?) (Left Shift?) (Atypical Ly?) Abn Scatter -gram WBC<0.6 WBC>40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 86 300 300 280 1 54,02 51,7 40,5 0,2 7,4 29 300 1,90 47,4 34,2 0,5 16,9 19 300 300 0,82 2,4 25,6 26,8 0,0 44,0 9,5 300 7,12 16,0 27,9 0,4 53,9 3 300 300 300 180 5,70 7,4 17,2 4,2 1,9 68,6 1,5 300 300 300 300 1 14,75 2,3 31,5 20,5 4,9 40,7 1,5 300 300 300 270 1 46,12 4,5 29,1 11,3 3,2 51,7 17 260 2,48 25,0 61,3 1,2 11,3 76,5 300 300 6,94 37,5 61,5 0,1 ---- 68 300 300 300 1 14,94 61,0 38,5 0,3 0,0 21 300 300 210 300 1 41,02 49,6 18,5 31,1 0,0 17 300 300 300 300 1 24,60 6,1 40,8 23,0 2,0 27,9 7 300 300 300 1 45,96 20,5 26,6 17,3 2,2 32,5 3,5 220 300 41,22 21,5 36,4 9,7 1,0 30,3 58 140 120 5,34 69,1 29,6 0,2 ---- 4 120 2,58 43,4 47,7 1,2 6,9 11 100 100 2,76 10,1 12,3 49,3 0,4 26,8 3 300 110 0,77 61,0 26,0 0,0 11,7 2,5 300 1 8,03 5,1 10,3 32,8 0,6 51,0 2 300 220 0,92 60,9 2,2 4,3 30,4 1 290 1,03 25,2 63,1 3,9 5,8 1 240 0,53 66,0 34,0 0,0 ---- 2 300 10,23 9,3 24,0 8,7 0,2 57,8 1,5 300 17,08 20,4 19,3 4,6 1,2 54,5 1,5 210 13,48 11,9 15,7 20,5 1,1 50,8 13 200 8,58 18,5 18,8 14,5 0,3 47,8 11,5 160 6,04 16,7 15,2 15,1 0,2 52,8 3,5 140 110 10,33 10,8 17,5 21,8 4,2 43,7 1 100 2,65 14,0 50,9 17,4 1,1 15,8 8,5 100 2,75 9,1 8,0 50,5 0,4 30,5 1,5 100 4,92 22,0 44,1 0,8 30,5 4 1 0,37 18,9 67,6 2,7 2,7 2,5 1 0,42 4,8 90,5 2,4 2,3 2,5 1 0,36 8,3 86,1 0,0 5,6 2 1 0,29 0,0 72,4 6,9 20,7 1,5 6,03 8,1 6,0 23,1 1,0 61,0 1 5,00 3,6 11,6 19,6 2,2 60,6 1,5 1,96 21,9 48,5 2,0 27,1 1 1,16 20,7 54,3 0,0 23,2 1 1,43 2,8 78,3 0,0 17,5 13,5 1,40 14,3 68,6 0,0 16,4 1,5 3,39 17,1 49,9 1,2 28,5

Sensitiviteit IG Microscopisch 2% IG: 137/489 stalen IG-vlaggen : Immature granulocytes? en/of IG>2.1% 00-05: 131/137 stalen met IG -vlag 100 stalen: enkel IG>2.1% 19 stalen: IG>2.1% én Imm Gran? 12 stalen: enkel Imm Gran? emm: 127/137 stalen met IG -vlag 100 stalen: enkel IG>2.1% 17 stalen: IG>2.1% én Imm Gran? 10 stalen: enkel Imm Gran?

Specificiteit IG Microscopisch < 2% IG: 352/489 stalen 00-05: 79/352 stalen met IG -vlag 59 stalen: enkel IG>2.1% 3 stalen: IG>2.1% én Imm Gran? 17 stalen: enkel Imm Gran? emm: 72/352 stalen met IG -vlag 58 stalen: enkel IG>2.1% 10 stalen: enkel Imm Gran? 4 stalen: IG>2.1% én Imm Gran?

Sensitiviteit/specificiteit IG XE-5000 rev.00-05 Microscopisch IG 2% positief negatief positief 131 (TP) 79 (FP) negatief 6 (FN) 273 (TN) Sensitiviteit: 95.6% PPV: 63.0% Specificiteit: 77.6% NPV: 97.8% XE-5000 emm Microscopisch IG 2% positief negatief positief 127 (TP) 72 (FP) negatief 10 (FN) 280 (TN) Sensitiviteit: 92.7% PPV: 63.8% Specificiteit: 79.5% NPV: 96.6%

Sensitiviteit/specificiteit IG XE-5000 rev.00-05 Microscopisch IG 2% positief negatief positief 131 (TP) 79 (FP) negatief 6 (FN) 2273 (TN) Sensitiviteit: 95.6% PPV: 63.0% Specificiteit: 96.6% NPV: 99.7% XE-5000 emm Microscopisch IG 2% positief negatief positief 127 (TP) 72 (FP) negatief 10 (FN) 2280 (TN) Sensitiviteit: 92.7% PPV: 63.8% Specificiteit: 96.9% NPV: 99.6%

Sensitiviteit IG aan de hand van bijkomende morfologievlaggen en numerieke vlaggen IG Qflag IG% Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC<0.6 MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% (%) (Imm Gran?) IG>2,1% (Blasts?) (Abl Ly/ L_Bl?) (Left Shift?) (Atypical Ly?) Scattergram WBC>40 M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 84 4 300 300 190 85 4 120 43,4 98 3,5 21,9 117 3 1 126 2,5 133 2 134 2 135 2 1 0,33 136 2 137 2 Microscopisch 2% IG: 137/489 stalen emm: 127/137 stalen met IG -vlag (10 gemiste stalen) Uitbreiding flagging: 5/10 Nog 5 gemiste stalen

Hoe kunnen we de gevoeligheid van de flagging aanpassen om de sensitiviteit van de blasten/ig te verhogen?

Gemiste stalen BL (Abn Ly/ IG (Atypical Scatter WBC<0.6 IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram WBC>40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 13,5 0,5 1,4 0,7 14,3 68,6 0 16,4 2 1,5 0 3,39 0,9 17,1 49,9 1,2 28,5 3 2,5 5,61 2 11,2 43,9 0,4 42 4 2 5,72 1,4 15,4 19,1 3,3 55,7 5 2 14,03 2,1 9,2 9,3 0,6 76,9 6 2 8,55 2,1 13,9 10,8 0,5 71,3 7 2 26,23 1,9 6,4 5,7 0,1 85,8 Stalen met microscopisch minimum 1% blasten en/of minimum 2% IG zonder vlag Blasten: 2 stalen IG: 5 stalen

Gemiste stalen BL (Abn Ly/ IG (Atypical Scatter WBC<0.6 IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram WBC>40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 13,5 0,5 1,4 0,7 14,3 68,6 0 16,4 2 1,5 0 3,39 0,9 17,1 49,9 1,2 28,5 3 2,5 5,61 2 11,2 43,9 0,4 42 4 2 5,72 1,4 15,4 19,1 3,3 55,7 5 2 14,03 2,1 9,2 9,3 0,6 76,9 6 2 8,55 2,1 13,9 10,8 0,5 71,3 7 2 26,23 1,9 6,4 5,7 0,1 85,8 Stalen met microscopisch minimum 1% blasten en/of minimum 2% IG zonder vlag blasten: 2 stalen 13.5% blasten, klinische achtergrond 1.5% blasten, blastaire cellen (geactiveerde lymfocyten?), kliniek

Gemiste stalen BL (Abn Ly/ IG (Atypical Scatter WBC<0.6 IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram WBC>40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 13,5 0,5 1,4 0,7 14,3 68,6 0 16,4 2 1,5 0 3,39 0,9 17,1 49,9 1,2 28,5 3 2,5 5,61 2 11,2 43,9 0,4 42 4 2 5,72 1,4 15,4 19,1 3,3 55,7 5 2 14,03 2,1 9,2 9,3 0,6 76,9 6 2 8,55 2,1 13,9 10,8 0,5 71,3 7 2 26,23 1,9 6,4 5,7 0,1 85,8 Stalen met microscopisch minimum 1% blasten en/of minimum 2% IG zonder vlag blasten: 2 stalen 13.5% blasten, klinische achtergrond 68.6% lymfocyten aanpassen grens? 1.5% blasten, blastaire cellen (nog geactiveerde lymfocyten?), kliniek

Lymfocyten: vlag vanaf 68%? BL Qflag Qflag IG Qflag Qflag Qflag Abn WBC<0.6 IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% (%) (Blasts?) (Abn Ly/ L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) (Atypical Ly?) Scattergram WBC>40 IG>2,1% M>20% L>68% B>5% N>95% E>30% 1 100 0 2,33 13,7 69,5 0,4 16 2 120 0 12,72 7,5 69,3 0,3 21 3 190 0,5 17,13 5,3 68,9 0,2 24,7 4 13,5 0,5 1,4 14,3 68,6 0 16,4 Indien grens lymfocyten > 68%: 4 stalen extra

Gemiste stalen BL (Abn Ly/ IG (Atypical Scatter WBC<0.6 IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram WBC>40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 13,5 0,5 1,4 0,7 14,3 68,6 0 16,4 2 1,5 0 3,39 0,9 17,1 49,9 1,2 28,5 3 2,5 5,61 2 11,2 43,9 0,4 42 4 2 5,72 1,4 15,4 19,1 3,3 55,7 5 2 14,03 2,1 9,2 9,3 0,6 76,9 6 2 8,55 2,1 13,9 10,8 0,5 71,3 7 2 26,23 1,9 6,4 5,7 0,1 85,8 Stalen met microscopisch minimum 1% blasten en/of minimum 2% IG zonder vlag IG: 5 stalen 4 stalen: 2% IG 1 staal: 2.5% IG

Hoe kunnen we de gevoeligheid van de flagging aanpassen om de specificiteit van de blasten/ig te verhogen?

Stalen met microscopisch blasten 1% én 1 vlag Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IG (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 9,5 300 0,5 7,12 16 27,9 0,4 53,9 2 1,5 8,5 6,03 8,1 6 23,1 1 61 3 1 0,5 5 3,6 11,6 19,6 2,2 60,6 4 1,5 3,5 1,96 21,9 48,5 2 27,1 5 1 0 1,16 20,7 54,3 0 23,2 6 1 0 1,43 2,8 78,3 0 17,5 Stalen met microscopisch blasten 1% en 1 vlag 6 stalen: 1 morfologievlag, 5 numerieke vlaggen

Stalen met microscopisch blasten 1% én 1 vlag Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IG (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 9,5 300 0,5 7,12 16 27,9 0,4 53,9 2 1,5 8,5 6,03 8,1 6 23,1 1 61 3 1 0,5 5 3,6 11,6 19,6 2,2 60,6 4 1,5 3,5 1,96 21,9 48,5 2 27,1 5 1 0 1,16 20,7 54,3 0 23,2 6 1 0 1,43 2,8 78,3 0 17,5 Stalen met microscopisch blasten 1% en 1 vlag 6 stalen: 1 morfologievlag, 5 numerieke vlaggen 2 stalen: monocyten 21.9% en 20.7% limietwaarde 20% behouden

Stalen met microscopisch IG 2% én 1 vlag 45 stalen: 44: IG>2.1% 1: WBC Abn Sc Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IG (Imm (Left (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) Gran?) Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 3 1 3,94 17,3 19,8 0,3 57,8 2 9 12,22 7,5 9,1 7,3 1 74,7 3 8 6,75 9,2 14,5 16,4 2,8 56,2 4 8 5,98 6,4 8,4 11 0,7 72,7 5 6 6,88 5,2 8,3 9 0,4 76,8 6 5,5 6,18 5,8 12,8 7,4 0,3 73,4 7 5 3,12 3,8 15,1 56,7 1,6 21,5 8 5 8,06 5,1 8,7 15,8 0,5 67,2 9 5 7,73 5,3 16,7 6,6 0,5 70,4 10 5 7 7,3 7,9 8,7 0,1 76 11 4,5 5,96 5,5 7 2,2 0,7 84,1 12 4,5 3,88 8,2 2,8 1,8 0,3 86,9 13 4,5 9,9 4,3 4,9 4,5 0,1 86,2 14 4 6,24 7,1 13,5 23,7 0,6 53,3 15 4 12,99 4,5 9,5 16,8 0,5 62,9 16 4 5,97 5,4 9 15,2 0,5 63,5 17 4 6,56 3,8 9,1 9,1 0,2 77,6 18 4 12,14 4,4 3,5 1,6 0,2 89,9 19 4 3,11 6,1 6,8 7,4 0 79,4 20 3,5 8,81 5,3 10,4 18,6 0,6 64,2 21 3,5 10,2 3,4 8,5 12,3 0,6 72,7 22 3,5 8,44 5,2 11,1 14,2 0,5 65,4 23 3,5 9,43 3,9 9,2 10 0,5 76,4 24 3,5 7,81 2,9 8,6 28,7 0,3 58,6 25 3,5 7,49 4,5 10,8 26 0,3 58,3 26 3,5 12,65 2,7 5,5 9,2 0,2 82,2 27 3 10,38 4,5 14,5 29,6 2 46,3 28 3 8,64 3,9 10,5 29,7 1,4 47,9 29 3 3,75 5,1 9,6 10,9 1,3 71,8 30 3 9,17 2,7 10,1 14,8 0,8 70,4 31 3 12,33 5,8 8,2 28,4 0,7 56,7 32 3 12,32 4,3 10,6 16 0,6 65,9 33 3 10,25 4,7 8 12 0,5 73,3 34 3 5,19 4,4 12,7 10,2 0,4 72,1 35 3 9,06 2,6 6,1 14,5 0,3 74,8 36 3 9,55 3 14,8 14 0,2 66,7 37 3 12,35 2,3 10,1 10,3 0,2 76,9 38 2,5 6,61 3,8 11,5 12,6 0,6 68,8 39 2,5 8,43 4,2 8,3 28 0,5 56,5 40 2,5 4,49 5,3 11,6 39,6 0,2 41,7 41 2,5 4,34 5,3 7,4 20,5 0,2 62,9 42 2 11,31 2,2 9,6 26,3 0,6 59,7 43 2 6,49 3,5 10,6 11,1 0,6 72,4 44 2 9,13 5 8,5 6,8 0,5 79,2 45 2 4,47 3,1 11,4 17,7 0,4 66,5

Stalen met microscopisch IG 2% én 1 vlag 45 stalen: 44: IG>2.1% (laagste waarde 2.2%) 1: WBC Abn Sc IG: limietwaarde >2.1% behouden Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IG (Imm (Left (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) Gran?) Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 3 1 3,94 17,3 19,8 0,3 57,8 2 9 12,22 7,5 9,1 7,3 1 74,7 3 8 6,75 9,2 14,5 16,4 2,8 56,2 4 8 5,98 6,4 8,4 11 0,7 72,7 5 6 6,88 5,2 8,3 9 0,4 76,8 6 5,5 6,18 5,8 12,8 7,4 0,3 73,4 7 5 3,12 3,8 15,1 56,7 1,6 21,5 8 5 8,06 5,1 8,7 15,8 0,5 67,2 9 5 7,73 5,3 16,7 6,6 0,5 70,4 10 5 7 7,3 7,9 8,7 0,1 76 11 4,5 5,96 5,5 7 2,2 0,7 84,1 12 4,5 3,88 8,2 2,8 1,8 0,3 86,9 13 4,5 9,9 4,3 4,9 4,5 0,1 86,2 14 4 6,24 7,1 13,5 23,7 0,6 53,3 15 4 12,99 4,5 9,5 16,8 0,5 62,9 16 4 5,97 5,4 9 15,2 0,5 63,5 17 4 6,56 3,8 9,1 9,1 0,2 77,6 18 4 12,14 4,4 3,5 1,6 0,2 89,9 19 4 3,11 6,1 6,8 7,4 0 79,4 20 3,5 8,81 5,3 10,4 18,6 0,6 64,2 21 3,5 10,2 3,4 8,5 12,3 0,6 72,7 22 3,5 8,44 5,2 11,1 14,2 0,5 65,4 23 3,5 9,43 3,9 9,2 10 0,5 76,4 24 3,5 7,81 2,9 8,6 28,7 0,3 58,6 25 3,5 7,49 4,5 10,8 26 0,3 58,3 26 3,5 12,65 2,7 5,5 9,2 0,2 82,2 27 3 10,38 4,5 14,5 29,6 2 46,3 28 3 8,64 3,9 10,5 29,7 1,4 47,9 29 3 3,75 5,1 9,6 10,9 1,3 71,8 30 3 9,17 2,7 10,1 14,8 0,8 70,4 31 3 12,33 5,8 8,2 28,4 0,7 56,7 32 3 12,32 4,3 10,6 16 0,6 65,9 33 3 10,25 4,7 8 12 0,5 73,3 34 3 5,19 4,4 12,7 10,2 0,4 72,1 35 3 9,06 2,6 6,1 14,5 0,3 74,8 36 3 9,55 3 14,8 14 0,2 66,7 37 3 12,35 2,3 10,1 10,3 0,2 76,9 38 2,5 6,61 3,8 11,5 12,6 0,6 68,8 39 2,5 8,43 4,2 8,3 28 0,5 56,5 40 2,5 4,49 5,3 11,6 39,6 0,2 41,7 41 2,5 4,34 5,3 7,4 20,5 0,2 62,9 42 2 11,31 2,2 9,6 26,3 0,6 59,7 43 2 6,49 3,5 10,6 11,1 0,6 72,4 44 2 9,13 5 8,5 6,8 0,5 79,2 45 2 4,47 3,1 11,4 17,7 0,4 66,5

Blasts? Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IG (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 86 300 4,0 300 280 1 54,02 51,7 40,5 0,2 7,4 2 29 300 0,0 1,9 47,4 34,2 0,5 16,9 3 19 300 1,5 300 0,82 2,4 25,6 26,8 0 44 4 9,5 300 0,5 7,12 16 27,9 0,4 53,9 5 3 300 15,0 300 300 180 5,7 7,4 17,2 4,2 1,9 68,6 6 1,5 300 23,0 300 300 300 1 14,75 2,3 31,5 20,5 4,9 40,7 7 1,5 300 16,5 300 300 270 1 46,12 4,5 29,1 11,3 3,2 51,7 8 300 23,0 300 300 1 32,28 26,7 6,5 20,9 3,7 41,2 9 300 21,0 210 9,64 17,5 7,8 9,3 1,3 63,1 10 300 16,5 300 29,49 16,8 15,9 4,6 2,3 59,7 11 300 15,5 300 300 180 1 46,67 3,9 25,4 8,8 2,2 59,7 12 300 12,5 110 12,42 10,8 14,3 11,8 1,2 61,1 13 300 10,0 170 300 18,02 9,9 9,9 18,4 4,1 56,5 14 300 6,0 4,7 4,9 8,7 13,6 0,2 62,4 15 300 4,0 300 190 8,55 6,3 13,6 0,6 76,2 16 17 260 0,0 2,48 25 61,3 1,2 11,3 17 200 18,0 290 210 7,6 11,8 24,2 10,8 2 49,6 18 180 11,0 110 2,91 10 8,9 22 1,4 55,6 19 150 10,5 300 300 300 1 8,4 6,3 25,5 8,8 2,1 57,2 20 130 6,5 300 270 18,32 7,6 7,4 18,1 3 59,8 20/489 stalen: 8/20: blasten, overige 12/20: IG geen stalen onterecht uitgestreken

Blasts? Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IG (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 86 300 4,0 300 280 1 54,02 51,7 40,5 0,2 7,4 2 29 300 0,0 1,9 47,4 34,2 0,5 16,9 3 19 300 1,5 300 0,82 2,4 25,6 26,8 0 44 4 9,5 300 0,5 7,12 16 27,9 0,4 53,9 5 3 300 15,0 300 300 180 5,7 7,4 17,2 4,2 1,9 68,6 6 1,5 300 23,0 300 300 300 1 14,75 2,3 31,5 20,5 4,9 40,7 7 1,5 300 16,5 300 300 270 1 46,12 4,5 29,1 11,3 3,2 51,7 8 300 23,0 300 300 1 32,28 26,7 6,5 20,9 3,7 41,2 9 300 21,0 210 9,64 17,5 7,8 9,3 1,3 63,1 10 300 16,5 300 29,49 16,8 15,9 4,6 2,3 59,7 11 300 15,5 300 300 180 1 46,67 3,9 25,4 8,8 2,2 59,7 12 300 12,5 110 12,42 10,8 14,3 11,8 1,2 61,1 13 300 10,0 170 300 18,02 9,9 9,9 18,4 4,1 56,5 14 300 6,0 4,7 4,9 8,7 13,6 0,2 62,4 15 300 4,0 300 190 8,55 6,3 13,6 0,6 76,2 16 17 260 0,0 2,48 25 61,3 1,2 11,3 17 200 18,0 290 210 7,6 11,8 24,2 10,8 2 49,6 18 180 11,0 110 2,91 10 8,9 22 1,4 55,6 19 150 10,5 300 300 300 1 8,4 6,3 25,5 8,8 2,1 57,2 20 130 6,5 300 270 18,32 7,6 7,4 18,1 3 59,8 laagste Q-waarde in staal met blasten 260, hoogste Q-waarde in staal zonder blasten 200. grens verhogen naar 200? Geen winst, te weinig gegevens grenswaarde 100 behouden

Abn Ly/L_Bl? 47/489 9/47 BL Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IM (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 76,5 300 0,0 300 6,94 37,5 61,5 0,1 ---- 2 68 300 3,0 300 300 1 14,94 61 38,5 0,3 0 3 21 300 0,5 300 210 300 1 41,02 49,6 18,5 31,1 0 4 17 300 2,0 300 300 300 1 24,6 6,1 40,8 23 2 27,9 5 7 300 14,5 300 300 1 45,96 20,5 26,6 17,3 2,2 32,5 6 300 0,0 48,19 4 62 0,6 32,5 7 300 0,0 36,49 5,4 56,4 0,6 37,1 8 300 0,0 122,97 1,8 95,1 0,4 2,5 9 300 0,0 30,71 2,3 87,1 0,3 9,8 10 300 0,0 58,59 1,4 88,6 0,2 9,4 11 300 0,0 39,41 2,6 86 0,2 10,4 12 300 0,0 25,36 3,3 78,7 0,2 16,4 13 300 0,0 1 22,88 10,3 63,7 0,2 23,9 14 300 0,0 300 180 1 53,58 43,3 53,9 0,2 2,3 15 300 0,0 41,95 1,4 94 0,1 4,3 16 300 0,0 27,52 3,1 67,6 0,1 28,4 17 290 0,0 16,37 18,1 52,3 3,8 25,4 18 280 0,5 24,99 4,3 60,8 0,1 33,8 19 280 0,0 26,45 0,8 58 0,2 40,5 20 270 0,0 25,76 0,5 58,9 0,1 40,2 21 3,5 220 11,0 300 41,22 21,5 36,4 9,7 1 30,3 22 190 0,5 17,13 5,3 68,9 0,2 24,7 23 180 0,0 28,9 1,2 38,9 0,1 59,3 24 160 0,0 13,32 4,6 79,7 0,2 14,8 25 150 0,5 16,19 7,6 62,8 0,2 28,3 26 150 0,0 15,67 5,6 63,9 0,3 28,9 27 150 0,0 16,03 30,3 12,4 0,2 55 28 58 140 2,5 120 5,34 69,1 29,6 0,2 ---- 29 140 0,0 280 1,76 0,6 97,7 1,1 0,6 30 140 0,0 3,27 1,2 94,8 0 3,7 31 130 3,5 300 5,91 3 27,1 40,3 7,8 19,3 32 130 0,0 12,02 12,2 44,8 3,6 38,4 33 130 0,0 3,13 40,6 33,9 1 23,2 34 130 0,0 16,15 5,3 57,4 0,2 34 35 4 120 4,0 2,58 43,4 47,7 1,2 6,9 36 120 0,0 3,4 28,8 61,5 0,6 8,8 37 120 0,0 2,63 12,9 75,7 0,4 7,2 38 120 0,0 12,72 7,5 69,3 0,3 21 39 110 1,0 110 1,65 29,7 55,8 0,6 12,7 40 110 0,0 3,59 12 74,4 1,1 5,8 41 110 0,0 12,24 5,9 71,7 0,2 20,9 42 110 0,0 9,05 20,3 26 0,2 51,1 43 11 100 9,5 100 2,76 10,1 12,3 49,3 0,4 26,8 44 100 1,5 4,03 21,3 59,1 0,7 15,7 45 100 0,5 120 3,25 30,2 50,2 2,5 15,3 46 100 0,5 12,75 5,2 65,6 0,2 27,6 47 100 0,0 2,33 13,7 69,5 0,4 16

Abn Ly/L_Bl? 47/489 9/47 BL 1 staal met 58%, Q-w=140 Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IM (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 76,5 300 0,0 300 6,94 37,5 61,5 0,1 ---- 2 68 300 3,0 300 300 1 14,94 61 38,5 0,3 0 3 21 300 0,5 300 210 300 1 41,02 49,6 18,5 31,1 0 4 17 300 2,0 300 300 300 1 24,6 6,1 40,8 23 2 27,9 5 7 300 14,5 300 300 1 45,96 20,5 26,6 17,3 2,2 32,5 6 300 0,0 48,19 4 62 0,6 32,5 7 300 0,0 36,49 5,4 56,4 0,6 37,1 8 300 0,0 122,97 1,8 95,1 0,4 2,5 9 300 0,0 30,71 2,3 87,1 0,3 9,8 10 300 0,0 58,59 1,4 88,6 0,2 9,4 11 300 0,0 39,41 2,6 86 0,2 10,4 12 300 0,0 25,36 3,3 78,7 0,2 16,4 13 300 0,0 1 22,88 10,3 63,7 0,2 23,9 14 300 0,0 300 180 1 53,58 43,3 53,9 0,2 2,3 15 300 0,0 41,95 1,4 94 0,1 4,3 16 300 0,0 27,52 3,1 67,6 0,1 28,4 17 290 0,0 16,37 18,1 52,3 3,8 25,4 18 280 0,5 24,99 4,3 60,8 0,1 33,8 19 280 0,0 26,45 0,8 58 0,2 40,5 20 270 0,0 25,76 0,5 58,9 0,1 40,2 21 3,5 220 11,0 300 41,22 21,5 36,4 9,7 1 30,3 22 190 0,5 17,13 5,3 68,9 0,2 24,7 23 180 0,0 28,9 1,2 38,9 0,1 59,3 24 160 0,0 13,32 4,6 79,7 0,2 14,8 25 150 0,5 16,19 7,6 62,8 0,2 28,3 26 150 0,0 15,67 5,6 63,9 0,3 28,9 27 150 0,0 16,03 30,3 12,4 0,2 55 28 58 140 2,5 120 5,34 69,1 29,6 0,2 ---- 29 140 0,0 280 1,76 0,6 97,7 1,1 0,6 30 140 0,0 3,27 1,2 94,8 0 3,7 31 130 3,5 300 5,91 3 27,1 40,3 7,8 19,3 32 130 0,0 12,02 12,2 44,8 3,6 38,4 33 130 0,0 3,13 40,6 33,9 1 23,2 34 130 0,0 16,15 5,3 57,4 0,2 34 35 4 120 4,0 2,58 43,4 47,7 1,2 6,9 36 120 0,0 3,4 28,8 61,5 0,6 8,8 37 120 0,0 2,63 12,9 75,7 0,4 7,2 38 120 0,0 12,72 7,5 69,3 0,3 21 39 110 1,0 110 1,65 29,7 55,8 0,6 12,7 40 110 0,0 3,59 12 74,4 1,1 5,8 41 110 0,0 12,24 5,9 71,7 0,2 20,9 42 110 0,0 9,05 20,3 26 0,2 51,1 43 11 100 9,5 100 2,76 10,1 12,3 49,3 0,4 26,8 44 100 1,5 4,03 21,3 59,1 0,7 15,7 45 100 0,5 120 3,25 30,2 50,2 2,5 15,3 46 100 0,5 12,75 5,2 65,6 0,2 27,6 47 100 0,0 2,33 13,7 69,5 0,4 16

Abn Ly/L_Bl? grens 140 2 BL, via andere vlaggen 5 minder uit te strijken Grens 140 Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IM (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 76,5 300 0,0 300 6,94 37,5 61,5 0,1 ---- 2 68 300 3,0 300 300 1 14,94 61 38,5 0,3 0 3 21 300 0,5 300 210 300 1 41,02 49,6 18,5 31,1 0 4 17 300 2,0 300 300 300 1 24,6 6,1 40,8 23 2 27,9 5 7 300 14,5 300 300 1 45,96 20,5 26,6 17,3 2,2 32,5 6 300 0,0 48,19 4 62 0,6 32,5 7 300 0,0 36,49 5,4 56,4 0,6 37,1 8 300 0,0 122,97 1,8 95,1 0,4 2,5 9 300 0,0 30,71 2,3 87,1 0,3 9,8 10 300 0,0 58,59 1,4 88,6 0,2 9,4 11 300 0,0 39,41 2,6 86 0,2 10,4 12 300 0,0 25,36 3,3 78,7 0,2 16,4 13 300 0,0 1 22,88 10,3 63,7 0,2 23,9 14 300 0,0 300 180 1 53,58 43,3 53,9 0,2 2,3 15 300 0,0 41,95 1,4 94 0,1 4,3 16 300 0,0 27,52 3,1 67,6 0,1 28,4 17 290 0,0 16,37 18,1 52,3 3,8 25,4 18 280 0,5 24,99 4,3 60,8 0,1 33,8 19 280 0,0 26,45 0,8 58 0,2 40,5 20 270 0,0 25,76 0,5 58,9 0,1 40,2 21 3,5 220 11,0 300 41,22 21,5 36,4 9,7 1 30,3 22 190 0,5 17,13 5,3 68,9 0,2 24,7 23 180 0,0 28,9 1,2 38,9 0,1 59,3 24 160 0,0 13,32 4,6 79,7 0,2 14,8 25 150 0,5 16,19 7,6 62,8 0,2 28,3 26 150 0,0 15,67 5,6 63,9 0,3 28,9 27 150 0,0 16,03 30,3 12,4 0,2 55 28 58 140 2,5 120 5,34 69,1 29,6 0,2 ---- 29 140 0,0 280 1,76 0,6 97,7 1,1 0,6 30 140 0,0 3,27 1,2 94,8 0 3,7 31 130 3,5 300 5,91 3 27,1 40,3 7,8 19,3 32 130 0,0 12,02 12,2 44,8 3,6 38,4 33 130 0,0 3,13 40,6 33,9 1 23,2 34 130 0,0 16,15 5,3 57,4 0,2 34 35 4 120 4,0 2,58 43,4 47,7 1,2 6,9 36 120 0,0 3,4 28,8 61,5 0,6 8,8 37 120 0,0 2,63 12,9 75,7 0,4 7,2 38 120 0,0 12,72 7,5 69,3 0,3 21 39 110 1,0 110 1,65 29,7 55,8 0,6 12,7 40 110 0,0 3,59 12 74,4 1,1 5,8 41 110 0,0 12,24 5,9 71,7 0,2 20,9 42 110 0,0 9,05 20,3 26 0,2 51,1 43 11 100 9,5 100 2,76 10,1 12,3 49,3 0,4 26,8 44 100 1,5 4,03 21,3 59,1 0,7 15,7 45 100 0,5 120 3,25 30,2 50,2 2,5 15,3 46 100 0,5 12,75 5,2 65,6 0,2 27,6 47 100 0,0 2,33 13,7 69,5 0,4 16

Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IG (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% Imm Gran? 41/489 32/41: BL en/of IG (groen) 9/41 (oranje) 6/9: Q-flag=300 1 76,5 300 0 300 6,94 37,5 61,5 0,1 ---- 2 68 300 3 300 300 1 14,94 61 38,5 0,3 0 3 21 300 0,5 300 210 300 1 41,02 49,6 18,5 31,1 0 4 17 300 2 300 300 300 1 24,6 6,1 40,8 23 2 27,9 5 7 300 14,5 300 300 1 45,96 20,5 26,6 17,3 2,2 32,5 6 300 0 300 180 1 53,58 43,3 53,9 0,2 2,3 7 86 300 4 300 280 1 54,02 51,7 40,5 0,2 7,4 8 19 300 1,5 300 0,82 2,4 25,6 26,8 0 44 9 3 300 15 300 300 180 5,7 7,4 17,2 4,2 1,9 68,6 10 1,5 300 23 300 300 300 1 14,75 2,3 31,5 20,5 4,9 40,7 11 1,5 300 16,5 300 300 270 1 46,12 4,5 29,1 11,3 3,2 51,7 12 300 23 300 300 1 32,28 26,7 6,5 20,9 3,7 41,2 13 300 15,5 300 300 180 1 46,67 3,9 25,4 8,8 2,2 59,7 14 150 10,5 300 300 300 1 8,4 6,3 25,5 8,8 2,1 57,2 15 3 3 300 110 0,77 61 26 0 11,7 16 2 24,5 300 220 0,92 60,9 2,2 4,3 30,4 17 2,5 0,5 300 1 8,03 5,1 10,3 32,8 0,6 51 18 11,5 300 300 100 1 32,4 11,9 13,1 7,7 2 64,7 19 11,5 300 300 2,48 12,9 18,1 8,9 0,4 59,7 20 11 300 300 1 14,48 13 11,9 2,2 1,1 71,7 21 8,5 300 300 2,52 7,5 17,5 8,7 2,8 62,3 22 8 300 100 1 14,06 7 7,6 1,7 1,6 81,2 23 8 300 300 300 3,56 9,6 21,9 7,9 1,1 59,5 24 7,5 300 300 300 1 11,4 12,3 9,9 14,6 5,2 57,6 25 7,5 300 300 280 2,73 11,7 17,9 7,7 1,1 61,2 26 6 300 300 1 22,68 4,7 3,6 2,2 88,4 27 6 300 300 6,06 5,3 12,4 0,2 81,6 28 2,5 300 1,27 38,6 31,5 0,8 26 29 2,5 300 1 9,31 14,5 18,3 0,4 63,4 30 1 300 300 3,59 13,9 9,5 0,3 74,9 31 1 300 300 18,83 0,3 5,3 0,2 91,2 32 0,5 300 300 1,13 2,7 3,5 22,1 0 71,7 33 0 300 200 2,66 24,4 22,9 0,4 48,5 34 0 300 300 4,97 9,1 24,5 0,2 65,6 35 1 2 290 1,03 25,2 63,1 3,9 5,8 36 1 1 240 0,53 66 34 0 ---- 37 3 130 1 2,39 2,9 53,6 24,7 2,5 16,3 38 1,5 130 0,78 2,6 25,6 28,2 1,3 34,6 39 58 140 2,5 120 5,34 69,1 29,6 0,2 ---- 40 1 120 1 12,15 12,3 7,2 0,3 76,2 41 0 120 1 20,01 14,4 8,8 0,8 72,3

Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IG (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% Imm Gran? 41/489 32/41: BL en/of IG (groen) 9/41 (oranje) 6/9: Q-w=300 grens 130-240 geen winst Standaardinst. (flag=100) Meer gegevens nodig 1 76,5 300 0 300 6,94 37,5 61,5 0,1 ---- 2 68 300 3 300 300 1 14,94 61 38,5 0,3 0 3 21 300 0,5 300 210 300 1 41,02 49,6 18,5 31,1 0 4 17 300 2 300 300 300 1 24,6 6,1 40,8 23 2 27,9 5 7 300 14,5 300 300 1 45,96 20,5 26,6 17,3 2,2 32,5 6 300 0 300 180 1 53,58 43,3 53,9 0,2 2,3 7 86 300 4 300 280 1 54,02 51,7 40,5 0,2 7,4 8 19 300 1,5 300 0,82 2,4 25,6 26,8 0 44 9 3 300 15 300 300 180 5,7 7,4 17,2 4,2 1,9 68,6 10 1,5 300 23 300 300 300 1 14,75 2,3 31,5 20,5 4,9 40,7 11 1,5 300 16,5 300 300 270 1 46,12 4,5 29,1 11,3 3,2 51,7 12 300 23 300 300 1 32,28 26,7 6,5 20,9 3,7 41,2 13 300 15,5 300 300 180 1 46,67 3,9 25,4 8,8 2,2 59,7 14 150 10,5 300 300 300 1 8,4 6,3 25,5 8,8 2,1 57,2 15 3 3 300 110 0,77 61 26 0 11,7 16 2 24,5 300 220 0,92 60,9 2,2 4,3 30,4 17 2,5 0,5 300 1 8,03 5,1 10,3 32,8 0,6 51 18 11,5 300 300 100 1 32,4 11,9 13,1 7,7 2 64,7 19 11,5 300 300 2,48 12,9 18,1 8,9 0,4 59,7 20 11 300 300 1 14,48 13 11,9 2,2 1,1 71,7 21 8,5 300 300 2,52 7,5 17,5 8,7 2,8 62,3 22 8 300 100 1 14,06 7 7,6 1,7 1,6 81,2 23 8 300 300 300 3,56 9,6 21,9 7,9 1,1 59,5 24 7,5 300 300 300 1 11,4 12,3 9,9 14,6 5,2 57,6 25 7,5 300 300 280 2,73 11,7 17,9 7,7 1,1 61,2 26 6 300 300 1 22,68 4,7 3,6 2,2 88,4 27 6 300 300 6,06 5,3 12,4 0,2 81,6 28 2,5 300 1,27 38,6 31,5 0,8 26 29 2,5 300 1 9,31 14,5 18,3 0,4 63,4 30 1 300 300 3,59 13,9 9,5 0,3 74,9 31 1 300 300 18,83 0,3 5,3 0,2 91,2 32 0,5 300 300 1,13 2,7 3,5 22,1 0 71,7 33 0 300 200 2,66 24,4 22,9 0,4 48,5 34 0 300 300 4,97 9,1 24,5 0,2 65,6 35 1 2 290 1,03 25,2 63,1 3,9 5,8 36 1 1 240 0,53 66 34 0 ---- 37 3 130 1 2,39 2,9 53,6 24,7 2,5 16,3 38 1,5 130 0,78 2,6 25,6 28,2 1,3 34,6 39 58 140 2,5 120 5,34 69,1 29,6 0,2 ---- 40 1 120 1 12,15 12,3 7,2 0,3 76,2 41 0 120 1 20,01 14,4 8,8 0,8 72,3

Left shift? 86/489 stalen gevlagd 66/86 stalen: microscopisch blasten 1% en/of IG 2% 20 vals positieven

Left shift? Qflag Qflag Qflag Qflag Qflag Abn WBC IG% MONO% LYMPH% BASO% NEUT% EO% BL (Abn Ly/ IG (Atypical Scatter <0.6 (%) (Blasts?) L_Bl?) (%) (Imm Gran?) (Left Shift?) Ly?) -gram >40 IG>2,1% M>20% L>70% B>5% N>95% E>30% 1 1 300 300 3,59 13,9 9,5 0,3 74,9 2 1 300 300 18,83 0,3 5,3 0,2 91,2 3 0,5 300 300 1,13 2,7 3,5 22,1 0 71,7 4 0 300 300 4,97 9,1 24,5 0,2 65,6 5 1,5 300 37,24 8,8 11,5 11,5 0,3 65,8 6 1 300 34,58 8,8 5,3 0,3 82,3 7 0,5 300 12,33 1,7 5,3 0,3 90,4 8 0 300 17,96 0,1 3,9 0,1 94,3 9 0 280 1,73 16,2 0,6 6,4 4 55,5 10 0 300 200 2,66 24,4 22,9 0,4 48,5 11 0,5 200 300 8,67 5,5 33,1 0,5 59,3 12 300 0 300 180 1 53,58 43,3 53,9 0,2 2,3 13 0 180 3,32 15,1 11,1 13,3 0,3 58,1 14 0 180 3,26 8,9 4,3 9,5 0,3 75,8 15 0 170 31,25 4,7 4,4 0,3 88,4 16 0 140 9,93 5,2 7,2 5,9 0,2 81,3 17 0,5 120 230 1,82 9,3 26,9 1,6 61,7 18 110 1 110 1,65 29,7 55,8 0,6 12,7 19 1 110 8,56 3,7 18,2 34,2 0,7 42,8 20 1,5 100 9,13 1,8 3,2 0,2 88,1 5/20 stalen: Left Shift enige vlag (Q-waarde: 3x300, 170, 100) grens 180 Slechts 2 stalen minder uit te strijken

Efficiëntie emm-software 1% BL en/of 2% IG (334 stalen) rev.00-05 rev.00-06 (emm) Criteria gevoeligheid flagging Blasts?' = 150 Abn Lymph/Lymphoblasts?' = 140 Immature granulocytes?' = 190 Left Shift' = 180 Left Shift' = 190 Lymfocyten > 68% Aantal uitgestreken stalen (op 334) 182 stalen 201 stalen Totaal aantal voorkomende vlaggen Blasts?' 30 0 Abnormal Lymph/Lymphoblasts?' 19 23 Immature granulocytes?' 10 9 Left Shift?' 15 14 Atypical Lymphocytes?' 14 26 Abnormal Scattergram' 18 14 WBC < 0,6/µl 8 8 WBC > 40/µl 5 5 IG > 2,1% 59 59 monocyten > 20% 64 73 lymfocyten > 70% 22 22 neutrofielen > 95% 5 6 basofielen >5% 0 0 eosinofielen >30% 1 1

Conclusies 1. Flagging met software rev.00-06 (emm): specifieker dan rev.00-05 voor de blast-flag. 2. Zowel software rev.00-05 als rev.00-06 emm: te weinig sensitief voor detecteren van alle blasten. 3. Aanvullende criteria (morfologieflags en/of numerieke flags) nodig voor voldoende betrouwbare detectie van blasten; dit heeft een prijs onder vorm van vals-positieve flagging. 4. Reduceren vals-positieve flagging door optimalisatie Q-flag criteria. 5. De flagging van Atypische Lymfocyten werd niet verder geëvalueerd bij gebrek aan eenduidig referentiekader.

Ter overweging 1. Specificiteit is sterk afhankelijk van de samenstelling van de onderzochte populatie. 2. Vals-positiviteit voor detectie van blasten (onterechte blast-flag en/of aanvullende criteria) betekent niet valspositiviteit voor eventuele andere abnormaliteiten. 3. Morfologische controles kunnen eventueel gereduceerd worden door microscopische screening ( smearscan ). Quid?

To Do 1. Aanpassen van de gevoeligheidsinstellingen van de Q- flags: Abnormal lymphocytes/lymphoblasts : 140 Left Shift : 180 2. Aanpassen gevoeligheid numerieke vlag voor het lymfocytenpercentage (68%). 3. Verdere expertise nodig voor verfijnen van de gevoeligheidsinstellingen van de Q-flags Blasts en Immature granulocytes.