BacT/Alert meer dan 10 jaar ervaring met bacteriologische screening van trombocyten concentraten

Transcriptie

1 BacT/Alert meer dan 10 jaar ervaring met bacteriologische screening van trombocyten concentraten 26 November 2015 Regionale themamiddag Bloedtransfusie Dirk de Korte Sanquin Blood Bank and Sanquin Research Department R&D

2 Achtergrond Na alle aandacht voor HIV en HCV (1980/90); bacteriële contaminatie van bloed producten weer op agenda % transfusie geassocieerd overlijden was gevolg van bacteriële contaminatie (Transfusion Transmitted Bacterial Infection; TTBI) Risico voor TTBI veel hoger dan voor virale transmissie Vooral na transfusie Trombocyten concentraat (TC)

3 Trombocyten en TTBI Van bloedproducten het hoogste risico Bewaarcondities Bereiding uit buffy coats: Bacteriën geconcentreerd (in fagocyten of vrij) Risico gepoolde BC versus aferese trombocyten Hoger: extra handelingen + donor exposure Lager: leukocyten niet direct verwijderd Balans: in algemeen vergelijkbaar in screening

4 Bacteriële contaminatie Sanquin onderzoek naar bacteriële contaminatie van bloed componenten gestart in 1997 Getallen in literatuur en uit Nederlandse bloedbanken waren zeer variabel Eerst inventarisatie Betrouwbaar getal met 95% CI voor volbloed Is diversion effectief? Alle onderzoek uitgevoerd met BacT/Alert, anaëroob en anaëroob flesje; 7,5 ml per flesje; 7 dagen incubatie

5 Diversion van eerste bloedvolume Contaminatie voornamelijk met standaard huidbacteriën, huidplug belangrijkste bron Idee: Laat eerste volume afgenomen bloed met de huidplug (= bacteriën) niet in afnamezak komen Reproduced from Blajchman, Vox Sang.74S2,1998

6 Resultaten met volbloed Standard whole blood collection Diversion of the 1 st 10 ml Donations tested 18,257 7,115 Prevalence 0.34% 0.21% Confidence interval Significante afname: p = De Korte et al., Vox Sang. 2002;83:13-16

7 Screening van TC Projectgroep Bacteriële Contaminatie Risico in rapport beschreven Advies: 100 % screening van TC Groot volume, 2 flesjes, gevoeligheid BC-PC: <2 h na bereiding (16-24 na afname) Uitgifte als negative to date Sanquin start November 2001 (wereldwijd eerste 100% screening) en succesvol geintroduceerd Score: 1% TC initieel positief Onderzoek naar interventies om dat te verlagen

8 Screening van TC Twee interventies getest: I. 2-staps desinfectie met Iso-propylalcohol 70% Resultaat: ± 10% reductie Ingevoerd in de loop van 2002 II. Diversion of pre-donatie monsterzakje Resultaat: 50% reductie Ingevoerd juli 2004 Per januari 2005: 7 dagen bewaren TC

9 Resultaten BC-TC: diversion effect Diversion: NO YES Total tested 127, ,957 Initially positive (%) 1155 (0.90) 1829 (0.46) Positive determination culture (%) 1038 (0.81) 1429 (0.36) Negative determination Conclusie: culture (%) 117 (0.09) 400 (0.10) Significante reductie in TC uit gepoolde buffy coats (p<0.0001; one-sided) Zeer efficiënte interventie; alle typen bacteriën Missing subculture data 16 0 De Korte et al., Transfusion 2006;46:

10 Samenvatting 1 Sinds begin 2002: 100% screening TC 2-staps desinfectie: marginale reductie Sinds 2004 diversion: 50 % reductie Gemiddeld 4-5 TC per 1000 positief in screening Vrij constant beeld, met lichte afname laatste jaren, vooral door daling vals positief

11 Welke bacteriën? met monsterzakje aantal BC-TC bacillus sp 74 0,013 CNS 586 0,100 Overige gram pos cocci 130 0,022 combi 13 0,002 diphteroids ,172 gram neg staven 59 0,010 Geen microorganisme 533 0,091 peptostreptococci 28 0,005 S. aureus 9 0,002 streptococci 49 0,008 overigen 14 0,002 totaal ,428 bevestigd uit flesje ,336

12 Hoe snel opgepikt? 90 Diphteroids CNS Gram-negative rods Bacillus species Total 80 % of total Bad guy s Relatively innocent time till positive

13 Negatief tot moment van uitgifte Hoe veilig is dit systeem? Over periode : 812 TC al toegediend op moment van positief signaal (totaal 2522 positief) Vooral propioni en geen microorganisme (83%) Sinds 2006 actief nagevraagd: soms milde symptomen, maar geen enkel geval imputability hoog (ongeveer 80 per jaar) snelgroeiende bacteriën: >95 % uit transfusieketen gehaald

14 Negatief tot moment van uitgifte Tijd tot positief Aërobe fles Anaërobe fles Aantal (gemiddeld) Alles 1,7 dagen 3,1 dagen 2522 Geen recall 1,3 dagen 2,1 dagen 1358 Recall 2,8 dagen 4,0 dagen 1164 Recall success 1,8 dagen 3,2 dagen 352 Toegediend 3,4 dagen 4,2 dagen 812 (32%) Trage groeiers grotere kans recall en/of reeds toegediend

15 Vals negatief Bacterie groeit niet in kweeksysteem Lage kans, zeer universeel Systeem niet gevoelig genoeg CFU/mL TC geeft positief signaal Sample error We zitten op ondergrens gevoeligheid (< 5 % beide flesjes positief waar in principe groei in beide mogelijk is) Monster bevat geen bacteriën, maar TC wel en die gaan toch groeien We weten dat we missen, maar hoeveel? Onderzoek uitgevoerd met outdated TC

16 Resultaten 4021 outdated 5BC-TC getest 4 vals negatief: 4/4021: 95% CI (0.10%) 4 x CNS Oververtegenwoordiging van TC in bewaarvloeistof Frequentie vergelijkbaar met literatuur Murphy (Ierland): 7/8282 = 0.08% (vooral BC-PC) Dumont (PASSPORT): 4/6039 = 0.07% (aferese) Pearce (Wales): 6/6438 = 0.09% (vooral BC-PC)

17 Vals negatief klinisch US Red Cross: 1 fatality per 10^6 na diversion & screening TRIP data :

18 S. Aureus in screening Aantal S. aureus Bijzonderheden x in BBLH over periode van 3 mnd Zonder diversion x met en 2x zonder diversion x met en 1x zonder diversion Met diversion Met diversion Met diversion Met diversion x ZW, mnd 5 en 10; 3x NO, mnd 3, 10 en 10. Met diversion Met diversion Met diversion Met diversion Na invoering diversion zeldzaam, vaak cluster? Snelle groeier; altijd onderschept in bloedbank Gerelateerde erytrocyten 108/110 gekweekt en negatief

19 UK data Geen screening 11 x grade 3/4; 3 deaths; 3 near miss S. aureus maart 2015 Bact/Alert ingevoerd; > 1x10^6 getest 0,31 % initieel positief (BC-TC); 11 x S. aureus 1 x transmissie; 3 near miss S. aureus > 3000 outdated: 0 positief

20 Groei na lage inoculatie S. aureus Internationale studie 14 labs, elk lab in triplo CFU per TC geënt Bact/Alert op dag 1 altijd negatief, evenals platen Tussen dag 2 en 4: Aggregaten swirl verdwijnt hoge concentratie bacteriën

21 S. aureus

22 S. aureus

23 Samenvatting 2 Meerderheid van gevonden bacterien: CNS en difteroids Meerderheid snelle groeiers onderschept Screening in combinatie met Negatief tot uitgifte is veilig systeem Vals negatief komt voor, ondanks gevoelige screening; Lab: 1 op 1000 Klinisch (TRIP): grade 1-2: gemiddeld 1 x per jaar (sinds diversion) grade 3: 1x (2005)

24 Donor counseling na positief 1. selectie van bacterien 2. Aantekening in donorbestand 1e keer en pas bij herhaling actie 3. Bij bevestiging (in RCC) direct actie 4. Onderzoek naar mogelijk acute of chronische infectie 5. Indien negatief: goedkeuren 6. Indien nogmaals betrokken: alsnog afkeuren

25 Vragen?