Overzicht pathogeenreductie (PR) methoden: effecten op in vitro kwaliteit van cellulaire bloedproducten. Pieter van der Meer 17 november 2010

Transcriptie

1 Overzicht pathogeenreductie (PR) methoden: effecten op in vitro kwaliteit van cellulaire bloedproducten Pieter van der Meer 17 november 2010

2 Marktklare methodes Trombocyten Rode cellen Vol bloed S59 (amotosalen)/uva Riboflavine/UVB UVC S303 S303 Riboflavine/UVB

3 Waarom pathogeen reductie? Bacteriële verontreiniging van trombocyten concentraten die je met BacT/Alert mist Incubatie-fase van virussen tot de testen positief zijn Bescherming tegen virussen/bacteriën waar je niet op test Opdoemende ziekteverwekkers Inactivatie van witte bloedcellen

4 Waarom pathogeen reductie? Publieke mening / maximale veiligheid Elsevier, 9 jan 2010, p.68

5 PASSPORT studie 16 gerapporteerde transmissies; [41/10 6 ; 95% CI: 24-67/10 6 ] geen doden Dumont, Transfusion 2010;50:589

6 Risico s op transmissie Ziekte en dood, ondanks bacteriële screening: MMWR dood in 2004 Te Boekhorst sepsis TRIP 4 ziek in 2008 Walther-Wenke dood

7 Trombocyten concentraten Bij kamertemperatuur bewaard Intercept (Cerus) - op de markt Mirasol (Caridian) - fase 3/marktklaar TheraFlex (MacoPharma) fase 1b

8 Intercept behandeling

9 Intercept behandeling

10 Intercept behandeling HLA-DQα Methode Dosis, µm mod/1000bp S59 gamma Gy Corash, Bone Marrow Transplant 2004;33:1

11 Intercept behandeling Trombocyten Dag 7 Controle Intercept ph 6.93± ±0.08 Glucose, mm 2.8± ±1.0 Lactaat, mm 14.6± ±1.9 ATP, µmol/10 11 PLT 4.5± ±0.6 HSR, % 32±13 29±7 ESC, % 5.6± ±2.8 gemiddelde±sd, n=8, verschillen niet significant Knutson, Vox Sang 2000;78:209

12 Mirasol behandeling + +

13 Mirasol behandeling Geactiveerd riboflavine geeft chemische wijziging aan functionele groepen pathogenen kunnen niet meer vermenigvuldigen

14 Vitamine B2/riboflavine Riboflavine en de foto-producten zijn niet schadelijk, en komen normaal in bloed voor Hoeven niet verwijderd te worden

15 Mirasol behandeling Trombocyten Dag 7 Controle Mirasol ph 7.32± ±0.22* ATP, % start 59±44 44±19* gemiddelde±sd, n=7, *p<0.05 Li et al. Transfusion 2005;45:920-6

16 Mirasol behandeling Trombocyten JC-1, % Li et al. Transfusion 2005;45:920-6

17 Mirasol behandeling Trombocyten MTT Li et al. Transfusion 2005;45:920-6

18 Mirasol behandeling Trombocyten Dag 7 GpIbα GpIIb-IIIa vwf Fibrinogeen Fibronectine P-selectine Annexine V Factor V Studie vs controle geen effect geen effect geen effect geen effect geen effect verhoogd, p<0.05 geen effect geen effect Perez-Pujol, Transfusion 2005;45:911

19 Vergelijking van methoden Trombocyten Dag 7 Controle Intercept Mirasol ph 7.05± ±0.04* 6.96±0.06 PO 2, mmhg 45±8 75±15* 37±6 PCO 2, mmhg 8±1 6±2* 8±2 ATP, µmol/dl 9.5± ± ±1.0 mediaan±95%ci, n=9, *=significant Picker, Vox Sang 2009;97:26

20 Vergelijking van methoden Trombocyten Dag 7 Controle Intercept Mirasol HSR, % 60±9 36±13 43±11 TRAP respons, % 76±9 14±10 43±24 CD62P expr., % 60±7 73±6 77±8 Annexine V, % 18±5 28±12 11±5 JC-1, % 87±5 64±12 83±9 mediaan±95%ci, n=9, *=significant Picker, Vox Sang 2009;97:26

21 Mohr, Transfusion 2009;49:1956 TheraFlex UVC

22 TheraFlex UVC UVC (en deels ook UVB): Directe interactie met DNA Vorming van cyclobutaanpyrimidine en (6-4) pyrimidone dimeren Blokkeren DNA transcriptie PLT in bewaarvloeistof Mohr, Transfusion 2009;49:1956

23 TheraFlex UVC Trombocyten Dag 7 Controle Theraflex ph 7.25± ±0.01* HSR, % 71±6 69±3 Aggregatie, % spontaan 7±1 9±1 collageen 54±6 67±2 CD62P, % 33±6 52±10 Annexine V, % 6±1 8±1 gemiddelde±sd, n=4, *p<0.01 Mohr, Transfusion 2009;49:1956

24 Samenvattend: Voor trombocyten concentraten methodes vergevorderd/reeds in gebruik enige vermindering van in vitro kwaliteit hogere activatie beeld van verminderde kwaliteit van mitochondriën maar klinische betekenis?

25 Rode cel concentraten Bij 2-6 C bewaard Maar wel vaker toegediend! S-303 (Cerus) fase 3 trial gestopt terug naar fase 1

26 S-303 Hanson, AABB poster, 2008 (

27 S-303 X wassen en bewaren Rios, Transfusion 2006;46:1778

28 S-303 Rode cellen Dag 4 Controle S-303 gewassen AS5 Hemolyse, % 0.02± ±0.01* ATP, µmol/g Hb 5.4± ±0.5 K +, mm 7.8± ±0.1** gemiddelde±sd, n=6, *p<0.05; **p<0.001 Mufti, Biologicals 2010;38:14

29 S-303 Rode cellen Dag 35 Controle S-303 gewassen AS5 Hemolyse, % 0.26± ±0.10* ATP, µmol/g Hb 2.9± ±0.6** K +, mm 44±3 38±2** gemiddelde±sd, n=6, *p<0.05; **p<0.001 Mufti, Biologicals 2010;38:14

30 S-303 Rode cellen Dag 35 Controle S-303 gewassen AS5 Hemolyse, % 0.2± ±0.1 ATP, µmol/g Hb 3.6± ±0.8** K +, mm 53±7 40±4*** gemiddelde±sd, n=27, *p<0.05; **p<0.01; ***p<0.001 Cancelas, Transfusion 2010;Suppl., abstract 10A.

31 Samenvattend: Voor rode cel concentraten methode pril effect op energiehuishouding van de rode cel

32 Vol bloed Eén processtap om alle componenten te behandelen S-303 (Cerus) experimenteel Mirasol (Caridian) - experimenteel

33 S-303 RCC uit behandeld VB Dag 22 Controle S-303 Hemolyse, % 0.44± ±0.25 K +, mm 18.6± ±0.9 ATP, µmol/g Hb 3.08± ±0.27 n=? Mufti, Biologicals 2010;38:14

34 S-303 PLT uit behandeld VB 20 h Controle S-303 PLT activatie, % Morfologie (Kunicky) n=1 Mufti, Biologicals 2010;38:14

35 S-303 Plasma uit behandeld VB 20 h Controle S-303 Fibrinogeen, mg/ml Factor II, IU/dL Factor V, IU/dL Factor VII, IU/dL Factor VIII, IU/dL Factor IX, IU/dL Factor X, IU/dL n=1 Mufti, Biologicals 2010;38:14

36 Mirasol Absorptie spectrum virusinactivatie DNA Vit.B2 Goodrich, Biologicals 2010;38:20

37 Mirasol RCC uit behandeld VB D42 D35 D28 Goodrich, Biologicals 2010;38:20

38 Mirasol RCC uit behandeld VB Dag 35 Controle Mirasol (80 J/mL RBC ) Hemolyse, % 0.74± ±1.07 ATP, µmol/g Hb 4.2± ±0.5 K +, mm 37±3 59±2 gemiddelde±sd, n=12 Cancelas, Transfusion 2010;Suppl., abstract 71A.

39 S-303 PLT uit behandeld VB Dag 5 Controle Mirasol (44 J/mL RBC ) Swirl ph 7.07± ±0.16 po 2, mmhg 47±36 77±16 pco 2, mmhg 33±6 23±3 gemiddelde±sd, n=6 Goodrich, Biologicals 2010;38:20

40 S-303 Plasma uit behandeld VB Controle Mirasol (44 J/mL RBC ) Fibrinogeen, mg/dl 323±97 251±58 Factor V, % 77±13 61±9 Factor VIII, % 108±61 92±20 Factor XI, % 80±20 69±13 gemiddelde±sd, n=6 Goodrich, Biologicals 2010;38:20

41 Samenvattend: Voor vol bloed experimenteel stadium, nog veel in vitro, ex vivo en in vivo onderzoek te doen the way to go

42 WBC inactivatie Intercept Intercept Methode Dosis, µm mod/1000bp S59 gamma Gy Corash, Bone Marrow Transplant 2004;33:1 Corash, Bone Marrow Transplant 2004;33:1

43 WBC inactivatie Mirasol Neg. controle Pos. controle Gamma Mirasol % gestimuleerde cellen Jackman, Transfusion 2009;49:2686

44 Afrondend: Pathogeen-reductie is niet zonder schade, maar klinische betekenis? Met name rode cel concentraten en vol bloed nog véél werk te doen Hoeveel kwaliteit zijn we bereid in te leveren voor toename van veiligheid?