Autoimmuun Hemolytische Anemie Serologisch Onderzoek
Serologisch onderzoek AIHA Casus 1. Mevrouw vd H, 1924: Onderzoek bij aanwezigheid warmte autoantistoffen Casus 2. Mevrouw K, 1956: Onderzoek bij aanwezigheid koude autoantistoffen
Onderzoek verdenking AIHA (ery s) Hoe ziet materiaal eruit? Autoagglutinatie / Pseudoagglutinatie? Wat is gebonden op de erytrocyten van de patiënt: Directe antiglobulinetest Polyspecifiek (anti-igg en C3d) Anti-IgG Anti-complement (anti-iga) Eluaat: welke antistoffen zijn gebonden? C C
Onderzoek verdenking AIHA (serum) Hoe ziet het materiaal eruit? Hemolyse? Agglutinerende en/of hemolyserende antistoffen? Hoe reageren de antistoffen in de testen? Temperatuur (16 C / 37 C) Immunoglobuline klasse (IgG, IgM, IgA) Uitgebreid onderzoek ivm mogelijke transfusie Begrijpen In vivo effect Instellen therapie
Casus 1: Mevr. vd H. 1924 Juni 09 veel transfusies gehad In AMC bekend met warmte autoantistoffen en alloantistoffen anti- Jk(a).en gedacht aan anti-c? Vragen: Nu hemolyse op basis van warmte autoantistoffen? Verzorgen eenheden voor transfusie zijn er meer alloantistoffen? 4 februari 2014 5
Casus 1: Mevr. vd H.1924 Resultaten Sanquin (1) Onderzoek erytrocyten Bloedgroep O, Rh feno: ccdee Autoagglutinatie: geen DAT: alleen positief met anti-igg Eluaat: positief met alle testerytrocyten Onderzoek serum Positief met alle testerytrocyten Doorgeven serologisch beeld tbv kliniek Afstemmen urgentie transfusievraag 4 februari 2014 6
Warmte autoantistoffen Typeren voor: Spoed: RhCcDEe, K, Jk(a), Jk(b), S, s DNA: Fy(a), Fy(b), Jk(a), Jk(b), S, s (overdag) Adsorptie-onderzoek: Uitsluiten van alloantistoffen na adsorptie van autoantistoffen aan test- erytrocyten Vaststellen specifieke autoantistoffen Transfusieadvies: preventief matchen voor: RhCcDEe, K, Jka, Jkb, evt S, en Wr(a) (evt Cw/Kp(a) Bijstellen transfusieadvies: RhCcDEe en K compatibel (evt rekening houden met auto-rh) en neg indien alloas
Sanquin beschikt over uitgetypeerd donorbestand Typeringen staan op het etiket
Casus 1: Mevr vd H., 1924 Resultaat Sanquin (2) Bloedgroep O, ccdee, K-negatief Na adsorptie: Allo anti-c + anti Wr(a), de anti-jk(a) niet meer aantoonbaar Auto anti-e en aspecifieke warmte autoantistoffen Eluaat: aspecifiek (passend bij autoantistoffen) Typering DNA: Fy(a-), Fy(b+), S-, s+ 4 februari 2014 9
Casus 1: Mevr vd H, 1924 Transfusie advies Sanquin Conform CBO Richtlijn Bloedtransfusie 2011 ECs negatief voor C, Jk(a) en Wr(a) En in het kader van preventie eveneens E en K neg Vervolg Mevr. bleef gedurende langere tijd transfusiebehoeftig: Transfusie advies 72 uur geldig! Afspraak met KC AMC: volledig serol. onderzoek 1/2wkn en/of bij veranderde kliniek Tussentijds volledig compatibel transfunderen (dus ook Fy(a) en S neg, Kp(a))
Casus 2 Mevr., 1956 Resultaat Sanquin (1) Bloedgroep A, CcDee, K neg (alleen te bepalen na wassen van de erytrocyten met warm zout) Onderzoek erytrocyten: Autoagglutinatie: positief DAT sterk positief met anti-complement Eluaat: negatief Onderzoek serum: Aspecifieke koude autoantistoffen (onderzoek bij 16ºC) Antistof onderzoek in IAT: alle panels positief.
Koude agglutininen, uitgangsmateriaal klinisch belang vs transfusieadvies Klinisch belang Voor aantonen antistoffen: Buis warm afnemen en warm afdraaien Antistoffen blijven in plasma/serum Bepalen temperatuursamplitude: reactiviteit 30ºC: dan in vivo actief Bij transfusie: zo mogelijk toedienen via voorverwarmingselement
Koude agglutininen, uitgangsmateriaal klinisch belang vs transfusieadvies Uitsluiten achter koude antistoffen Buis in koelkast laten staan zodat zoveel mogelijk koude antistoffen uit het serum binden aan de erytrocyten (autoadsorptie) Uitsluiten van aanwezigheid van alloantistoffen: -Warm voegen -Warm voegen/warm wassen -Serum behandelen met DTT (afbraak IgM koude agglutininen)
Casus 2 mevr. K. Transfusieadvies Sanquin Meest voorkomende klinisch belangrijke antistoffen uitgesloten Conform CBO consensus 2011: Ivm aanwezige autoantistoffen: Rh en K compatibel In deze casus: E, K negatieve eenheden selecteren. Negatieve kruisproeven met serum niet mogelijk; kruisen met DTT-behandeld serum
Verder onderzoek bij complexe cases Let op bij koude agglutininen! Kolomtechniek: DAT in buisjestechniek Eluaat Anti-IgG: 2+ Anti-IgG: negatief negatief Anti-compl: 3+ Anti-compl: 2+ Antistofonderzoek: koude agglutininen Conclusie: fout-positieve reactie met anti-igg in kolomtechniek
Verder onderzoek bij complexe cases Let op zwakke reacties met anti-complement en tekenen van hemolyse bij patiënt. Kolomtechniek: DAT in buisjestechniek Eluaat Anti-IgG: negatief Anti-IgG: negatief negatief Anti-compl: + Anti-compl: (+) Antistofonderzoek: negatief Onderzoek naar monofasische hemolysinen: positief Gevoelige techniek met enzym-behandelde testerytrocyten Conclusie: antistof-gemedieerde complement-depositie en verkorte overleving van de erytrocyten