Genotypering in de praktijk Joyce Curvers, klinisch chemicus Algemeen Klinisch Laboratorium Catharina Ziekenhuis Eindhoven
Genotyperingin de praktijk Wat zegt(de nieuwe) CBO richtlijn? Casus hemoglobinopathie Casus bloedgroepantagonisme Casus massaal bloedverlies Overwegingen
CBO en DNA-typering: Auto-Immuun-HemolytischeAnemie
CBO en DNA-typering: Hemoglobinopathie
Hemoglobinopathie Afwijking in hemoglobine-keten: Hb-S(Sikkelcel) is bekendste Afwezigheid van 1 of meerdere globuline ketens: thalassemie Vanaf 2007 in neonatale hielprikscreening HbS, betathalassemie en alfa-thalassemie
PatienteK. 1984 Komtbinnenmet Hb3.0 Voor zover bekend nooit eerder transfusie gehad(0+, CcDee) Bekend met beta-thalassemie minor
AIHA en alles positief, wat nu? Mogelijk dus zowel koude als warme agglutininen; Onderzoek primaire oorzaak (viraal infect? Autoimmuunziekte? ) Voorlopig geen bloed uit te geven ivmpos coombs
Vervolg patientek Start prednisolon: 1x dg 60mg Genotypering voor Kidd, Duffy, MNS Antistoffen in serum: - Anti-Wr(a) - Koude aspecifieke auto-antistoffen - Warmte auto-antistoffen anti-e en anti-ce en aspecifiek - Hemolysinen(zowel warm als koud) positief
Nog geen recidief conclusie AIHA eci Bloedgroeptypering uitgebreid: 0, Rh CcDee, Fy(a), Jk(a), Jk(b), S,s 8 hemoglobinegehalte (mmol/l) 7 6 5 4 3 2 1 0 01-okt 16-okt 31-okt 15-nov 30-nov 15-dec 30-dec 14-jan 29-jan 13-feb datum
Casus Mw I, 1983, G2P0
Bloedgroepantagonisme Uit praktijk
Fenotypering (juiste) vader Moeder:bloedgroep: A, Rh ccdee antistoffen: anti-d en anti-c Vader: bloedgroep: O, Rh CcDEe Kind:? zou C-positief kunnen zijn Actie: ADCC en genotyperingkind inzetten (nieuwe PSIE: genotypering Rh D afwachten)
Je wordt gebeld door de kinderarts 23:00 uur Vrouw, G2P0, 34+1, bekend in LUMC omdat ADCC 2½mndgeleden70% was Anti-D en anti-c Verwachting: Neonaat die wisselbloed gaat nodig hebben Status nu: 8 cm ontsluiting
Overwegingen Hoeveel weken is moeder nu? Wat is het geschatte geboortegewicht? Heeft ze (intra-uterien) transfusies ontvangen in het LUMC? Zijn er nog nieuwe antistoffen bijgevormd (anti-e)? Hebben we de info over vader en kind bij de hand?
Genotyperingen wisselbloed Gelukkig belde de kinderarts tijdig - Kruisbloed van moeder geregeld -(wissel) bloed op tijd besteld: tevens op basis van de genotyperingsgegevens kind Kind wordt geboren Met een Hbvan 3.0, hepatosplenomegalieen slechts een bili van 80umol/L overgeplaatst naar NICU-MMC
Je wordtgebeld Op een zonnigeaugustusmiddag 6 EC s ongekruist aangevraagd voor de SEH 6 x EC Een politieagent komt de eenhedenhalenop het laboratorium Waargaandie naartoe? Waaris kruisbloed? 4 x EC 1 x TC 4 x VP
De anesthesioloog (19:30) Patiente: - H.E.T. ; cabrio onder vrachtwagen(1,5 uur bekneld) -meerderebotbreuken(neus, linker polsen humerus, femur bilateraal, ramus superior en inferior) en een pneumothorax - Oppervlakkige wonden en hoofdwond(met nietjes gehecht) -Patientewordtdandirect naarok gebracht wegens een dissectie van de aorta descendens
Het kruisbloed - Om 21.00 uur eerste buisje kruisbloed - Voorlopige bloedgroep: 0 negatief We hebben geen tweede afname; die zal nietveelnieuwsopleverenen we zijnnu door de voorraad0-heen De bloedbank is ookdoor de voorraad0-aan het raken
Onbekendepatient - Ziekenhuis in de buurt van woonplaats: patient was bekend, maar bloedgroep niet - Huisarts; wellicht bloedgroep bekend uit zwangerschap(pen)? Huisarts was geschokt van het verhaal geen bloedgroep bekend - En dan? Bloedbankbellen?
GenotyperingAB0 - Dordrecht (Sanquin regio Zuidwest) typeert AB0 -Op basis van galactose-/galactosamine-transferase: het enzym data (galactosaminyltransferase) of B (galactosyltransferase) op de ery plakt -DmvPCR (forward en reversed primers) product gegenereerden op gel gezet
Patient, patient, laantje 3, A2B, 0101, 0102 en no template controle Patient heeft 01, maar niet homozygoot Patient heeft geen 02 Patient heeft geen A2 Patient heeft geen A2
Conclusie bloedgroep genotypering Rhesus (Sanquin Diagnostiek) : negatief AB0 (Sanquin regio Zuidwest): A1 (01) Eerste bloedgroep A negatief Tweede bloedgroep: mixed field A/0 negatief Conclusie: A neg
Casus massale transfusie na trauma Bij massale transfusie, ook na trauma is genotypering mogelijk Snelheid van bepaling was afdoende Bij vervolg-transfusie(reconstructie-chirurgiebinnen 120dgn) kan compatibel bloed worden geselecteerd
Overwegingen DNA typering is soms onvermijdelijk voor goed transfusiebeleid bij : - polytransfusees(evt bij auto/allo-antistofvorming) - complexe AIHA - genotypering foetaal DNA in maternaal bloed (- massale transfusie?) Identificatie van patient twee afnames? Na massale transfusie: zijn de leuko s van patient Kosten spelen mogelijk een rol 0-negatief is niet per definitie het veiligst (ccdee, anti-c vorming)
Typisch Sanquin? Toegespitst op hier-besproken casuistiek - Genotypering van bloedgroepantigenen (ook HPA) - De ADCC - Uitzoeken complexe transfusieproblemen - Makkelijk collegiaal overleg!