Synovasure alfadefensine laterale-flowtestset

Transcriptie

1 Synovasure alfadefensine laterale-flowtestset Ga voor aanvullende productinformatie naar Gebruikers dienen deze bijsluiter volledig te lezen alvorens het product te gebruiken. Volg bij het uitvoeren van de test de instructies nauwgezet op. Als u dit niet doet, kan dit tot onnauwkeurige testresultaten leiden. BEPERKINGEN Deze assay is niet gevalideerd voor gebruik bij patiënten zonder een totale gewrichtsvervanging. NAAM EN BEOOGD GEBRUIK De Synovasure alfadefensine laterale-flowtestset is een visuele immunochromatografische assay die is bedoeld als aanvullend hulpmiddel voor de detectie van periprothetische gewrichtsinfectie (Periprosthetic Joint Infection; PJI) in het synoviale vocht van patiënten die pijn en/of ontsteking hebben in een gewricht met een prothese. De Synovasure alfadefensine laterale-flowtestset meet humane alfadefensines 1-3 in het synoviale vocht van personen met een totale gewrichtsvervanging. Alfadefensines zijn antimicrobiële peptiden die worden afgegeven door geactiveerde neutrofielen als reactie op een infectie. De resultaten van een Synovasure alfadefensine lateraleflowtestset zijn bedoeld voor gebruik samen met andere klinische en diagnostische bevindingen ter ondersteuning van een diagnose van infectie bij een patiënt. De Synovasure alfadefensine laterale-flowtestset is bedoeld om vast te stellen of er sprake is van een infectie in het synoviale vocht. De test is niet bedoeld ter identificatie van een specifiek type infectie of om de oorsprong of ernst van een infectie vast te stellen. De test is bedoeld om een arts een specifiek positief of negatief resultaat voor de aanwezigheid van alfadefensines 1-3 in het synoviale vocht als gevolg van de infectie te bieden. Alleen voor professioneel gebruik. Alleen bestemd voor in vitro-diagnostiek. PRINCIPES VAN DE TEST De Synovasure alfadefensine laterale-flowtestset is een immunoassay voor de detectie van het alfadefensinegehalte in het synoviale vocht van patiënten die mogelijk PJI hebben. Het testsysteem bestaat uit een hulpmiddel voor eenmalig gebruik, een van te voren afgemeten flacon met verdunningsbuffer, een wegwerpbaar Microsafe -buisje en een monsterpotje. Elk hulpmiddel bevat een reagensstrookje met alle belangrijke componenten voor de assay. Verdunning vindt plaats door met het wegwerpbare Microsafe -buisje synoviaal vocht op te vangen en het monster toe te voegen aan de van te voren afgemeten verdunningsbuffer. Vervolgens worden er drie (3) hele druppels van het verdunde monster aan het testhulpmiddel toegevoegd om te beginnen met de testprocedure. Het eerste kussentje verwijdert celmateriaal. Vervolgens komt de oplossing terecht in het bufferkussentje en wordt het vermengd met het goudkleurige conjugaat dat is gelabeld met een antistof tegen defensines. Het testmengsel migreert vervolgens over het teststreepje en het controlestreepje. Er verschijnt een testresultaatstreepje ( T ) als het alfadefensinegehalte in het monster hoger is dan de maximale concentratie. Er verschijnt een controlestreepje ( C ) om te controleren of de oplossing correct door het hulpmiddel is gestroomd. De resultaten worden binnen tien (10) minuten zichtbaar. WAARSCHUWINGEN EN VOORZORGSMAATREGELEN Als de instructies niet worden opgevolgd, kan dit leiden tot onnauwkeurige resultaten. Alle componenten van de testset mogen slechts eenmaal worden gebruikt en dienen op correcte wijze te worden afgevoerd. Geen van de testcomponenten mag opnieuw worden gebruikt. Deze set is alleen bedoeld voor gebruik met synoviaal vocht. Het gebruik van deze testset met andere soorten monsters kan leiden tot onnauwkeurige testresultaten. Het gebruik van synoviaal vocht dat is verdund met fysiologische zoutoplossing, bloed, contrastmiddel of stoffen die in het gewricht worden geïnjecteerd, kan leiden tot valse negatieven. De aanwezigheid van RBC'n in een hogere mate dan 1 miljoen/μl in het monster van synoviaal vocht kan leiden tot valse negatieven. Dit betekent verdunning van het monster van synoviaal vocht met meer dan 20% bloed. Deze test mag alleen worden gebruikt bij patiënten met een totale gewrichtsprothese. De prestaties van deze test zijn alleen gevalideerd voor aandoeningen die zijn beoordeeld aan de hand van criteria van de MSIS (Musculoskeletal Infection Society). Een afname van de gevoeligheid (een verhoogde kans op valse negatieven) is waargenomen bij aanwezigheid van een sinuskanaal dat communiceert met de prothese. Aangezien de aanwezigheid van een sinuskanaal een definitief bewijs is van PJI, raden we onder die omstandigheden het gebruik van deze test niet aan. Er zijn valse positieven gemeld bij aanwezigheid van metallose. Synoviaal vocht verkregen na herhaalde aspiraties binnen een korte tijdsperiode kan leiden tot valse negatieven vanwege het gebrek aan opbouw van alfadefensine. Deze test is niet bedoeld ter bepaling van het herimplantatietijdstip tijdens operaties die in twee fases worden uitgevoerd. Deze test moet bij kamertemperatuur (12-25 C) worden uitgevoerd en niet buiten dit temperatuurbereik. De aanbevolen opslagtemperatuur voor de testset is 2-30 C. Draag tijdens het hanteren en testen van monsters persoonlijke beschermingsmiddelen. Pagina 1 van 5

2 Gebruikte hulpmiddelen van Synovasure alfadefensine laterale-flowtestsets worden beschouwd als potentiële bio-risico s en moeten worden afgevoerd volgens de plaatselijke, nationale en federale voorschriften voor het afvoeren van afval. MEEGELEVERDE REAGENTIA EN MATERIALEN REF Synovasure alfadefensine laterale-flowtestset Hoeveelheid Gebruiksaanwijzing 1 REF P50023 Testhulpmiddel 5 Afgesloten zakje met gecoat membraan met een anti-alfadefensineteststreepje en een anti-muiscontrolestreepje; een alfadefensine gecoat kussentje van gouddeeltjes, een monsterbufferkussentje en een kussentje om celmateriaal te verwijderen in een beschermende plastic behuizing, in een afgesloten zakje met droogmiddel REF P50024 Monsterpreparatieconstructie Afgesloten zakje met: (1) REF P50025-monsterverdunningsflesje (voorgevuld, fosfaatbuffer, druppelflesje) (2) Wegwerpbaar Microsafe -buisje (1) Monsterbakje 5 Ook leverbaar als Hoeveelheid 1 (REF ); Hoeveelheid 10 (REF ); Hoeveelheid 30 (REF ) OPMERKING: wissel geen testhulpmiddelen of -componenten uit met andere hulpmiddelen of componenten van sets met andere chargenummers. NIET MEEGELEVERDE MATERIALEN Timer AANVULLENDE MATERIALEN Controlevloeistofset voor Synovasure alfadefensine (2pk) REF Leverbaar als accessoire bij de Synovasure alfadefensine laterale-flowtestset PROCEDURE VOOR DE SYNOVASURE ALFADEFENSINE LATERALE-FLOWTESTSET Bekijk de volgende checklist alvorens de test uit te voeren 1. Open de doos van de testset en controleer de componenten. Controleer de uiterste gebruiksdatum vóór gebruik. Gebruik testsets niet na de uiterste gebruiksdatum, die op de doos staat vermeld. Als een of meer van de componenten beschadigd zijn, gebruik dan een nieuwe testset. 2. De test moet worden uitgevoerd op een vlak, stabiel oppervlak in een ruimte met voldoende verlichting. 3. Voer de test uit bij kamertemperatuur, tussen 12 C en 25 C. 4. Zorg ervoor dat de timer beschikbaar is en is ingesteld op 10 minuten. 5. Controlevloeistofset voor Synovasure alfadefensine ( ) moet worden gebruikt in overeenstemming met de lokale vereisten. Stap Instructies Voorstelling 1 Verwijder 1 wit zakje en 1 zilveren zakje uit de doos van Synovasure en laat het op kamertemperatuur komen. Wit zakje Testhulpmiddel o 1 x Synovaure-hulpmiddel Zilveren zakje Monsterpreparatieconstructie o 1 x Monsterbakje o 2 x Microsafe -buisjes o 1 x Verdunningsflesje 2 Open de monsterpreparatieconstructie. Het geaspireerd synoviaal vocht moet zich in een vat bevinden waarin bemonstering met een Microsafe buisje of een pipet die positieve verplaatsing mogelijk maakt kan worden uitgevoerd. Indien nodig, is er een monsterpotje voorzien in de monsterpreparatieset. A. Testhulpmiddel B. Monsterpreparatieconstructie Pagina 2 van 5

3 3 Verdunning: Verwijder het paarse dopje van het druppelflesje en leg dit weg. Onttrek met het Microsafe -buisje synoviaal vocht om te verdunnen. Houd het Microsafe -buisje horizontaal en raak met het puntje van het Microsafe -buisje het synoviaalvochtmonster aan. Capillaire actie zal het monster automatisch naar de zwarte vullijn trekken en stoppen. Tijdens de monsterneming, niet samenknijpen. OPMERKING 1: Er mag een pipet die positieve verplaatsing mogelijk maakt, ingesteld op 15 µl, worden gebruikt om een monster te verkrijgen, indien beschikbaar. OPMERKING 2: Tijdens de monsterneming het Microsafe -buisje niet samenknijpen. Bedek de ventilatieopeningen bij de zwarte vullijn niet. Laat het vocht tot aan het vulstreepje komen voordat u verdergaat. Als het niet lukt om synoviaal vocht te verkrijgen uit de houder met het synoviaal vocht, breng dan een kleine hoeveelheid van het vocht over in het meegeleverde monsterbakje. Het nemen van zeer viskeuze monsters van synoviaal vocht kan meer tijd in beslag nemen. Als het eerste buisje geen synoviaal vocht kan verkrijgen, gooi het dan weg en gebruik het tweede meegeleverde buisje. 4 Doe het verkregen synoviaal vocht in het van tevoren gevulde druppelflesje. Spoel het Microsafe -buisje in het van tevoren gevulde druppelflesje door het bolletje aan het uiteinde van het Microsafe buisje vijf (5) keer in te knijpen en los te laten om viskeus synoviaal vocht te verwijderen. Plaats het dopje van het druppelflesje weer terug en meng de inhoud door het flesje voorzichtig om te draaien. OPMERKING: Op dit moment is het aangewezen om het bolletje samen te knijpen om ervoor te zorgen dat de inhoud volledig wordt overgedragen. 5 Laat het hulpmiddel vóór gebruik op kamertemperatuur komen. Haal het testhulpmiddel vlak voor gebruik uit het foliezakje. Niet gebruiken als het foliezakje niet intact is. Plaats het hulpmiddel op een vlakke ondergrond. Verwijder de dop van het druppelflesje. Houd het druppelflesje in een verticale positie (90 ) terwijl u drie (3) hele druppels van het monster van verdund synoviaal vocht in de monsterholte van het testhulpmiddel doseert. Tijdens het verwerken moet het hulpmiddel plat blijven liggen. NIET samenknijpen Zwarte vullijn 6 Controleer het teshulpmiddel om ervoor te zorgen dat het monster door het leesvenstertje stroomt (de achtergrond moet rood worden en uiteindelijk helder worden). Als er geen monster door het leesvenstertje stroomt, is het zeer waarschijnlijk dat er onvoldoende monstervolume aan het hulpmiddel is toegevoegd. Herhaal de testen met een nieuw hulpmiddel. Het eerder bereide verdunningsflesje kan worden gebruikt. De herhalingstest moet binnen 4 uur worden uitgevoerd. 7 Laat de test tien (10) minuten lang onaangeroerd ontwikkelen. Interpreteer de testresultaten volgens de beschrijving in het gedeelte Interpretatie van de testresultaten. Lees de resultaten niet af na 20 (twintig) minuten. Er verschijnt een rood-roze controlestreepje naarmate de achtergrond van het kijkvenstertje helderder wordt. Het controlestreepje [C] is het bovenste streepje in het testkanaal. PROCEDURE VOOR DE CONTROLEVLOEISTOFSET VOOR SYNOVASURE ALFADEFENSINE Externe controles moeten worden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen of vereisten van lokale, provinciale en/of federale voorschriften of accreditatie van organisaties. Het wordt aanbevolen om controles uit te voeren door een nieuwe gebruiker om de competentie te beoordelen, wanneer een nieuwe kitpartij wordt gebruikt of wanneer een nieuwe zending kits wordt ontvangen en/of indien de opslagomstandigheden van het materiaal buiten de gespecificeerde limieten fluctueren. 1. Prepareer de controlevloeistoffen volgens de gebruiksaanwijzing die is meegeleverd met de controlevloeistofset voor Synovasure alfadefensine. Pagina 3 van 5

4 2. Gebruik de controlevloeistoffen als klinische monsters volgens de bovenstaande instructies voor de Synovasure alfadefensine laterale-flowtestset. INTERNE KWALITEITSCONTROLE: Elk testhulpmiddel heeft een procedureel controlestreepje ( C ) dat laat zien of het vocht goed door het hulpmiddel stroomt. INTERPRETATIE VAN DE RESULTATEN OPMERKING: Alfadefensine wordt op het hulpmiddel weergegeven als T. De scherpheid van de streepjes voor de controle- en testresultaten kan variëren. Elke rood-roze streep, ongeacht scherpheid of grootte, is een streepje. Interpreteer de resultaten niet na twintig (20) minuten. Negatief: Er is sprake van een NEGATIEVE uitslag voor alfadefensine als er ALLEEN een rood-roze controlestreepje (C-streepje) verschijnt, zonder dat er na tien (10) minuten een (T-streepje) testresultaatstreepje verschijnt. Positief (niet negatief): er is sprake van een POSITIEVE uitslag voor alfadefensine als er een rood-roze controlestreepje (C-streepje) EN een rood-roze (T-streepje) testresultaatstreepje is verschenen. Test geldig: voordat u de streepjes voor het testresultaat afleest, dient u te controleren of het met C aangemerkte controlestreepje is verschenen. Als het controlestreepje niet volledig verschijnt of de achtergrond niet helder wordt, is de test ongeldig en mogen de testresultaten niet worden gebruikt. De test moet dan met een nieuw hulpmiddel worden herhaald. Het eerder bereide verdunningsflesje kan worden gebruikt. De herhalingstest moet binnen 4 uur worden uitgevoerd. Voorbeelden van resultaten Test geldig Test ongeldig Negatief Positief Positief Positief Er verschijnt geen controlelijn De testlijn verschijnt niet volledig De achtergrond wordt niet helder PRESTATIE KENMERKEN VAN ALFADEFENSINES De klinische prestatie van de biomarker voor alfadefensine voor de diagnose van periprothetische gewrichtsinfectie is vastgesteld aan de hand van een ELISA voor alfadefensine in een onderzoek waarbij 158 patiënten waren betrokken en waarvoor de volgende inclusiecriteria golden: (1) Een totale artroseplastiek/-spacer van de heup of knie, waarvan wordt bekeken of er een noodzaak tot revisie van de heup- of knieartroseplastiek is. (2) Voldoende klinische informatie voor het toepassen van de MSIS-criteria voor PJI. (3) Voldoende synoviaal vocht voor studiemethoden. Patiënten die antibiotica krijgen vóór de aspiratie, patiënten bij wie de diagnose van een systematische inflammatoire aandoening is gesteld en patiënten met een infectie uit de buurt van het gewricht zijn ook in deze studie opgenomen. Terechte diagnose van alfadefensine bij 152 van alle 158 patiënten met een algehele specificiteit van 95,8% (95% CI: 90,5-98,6%) en een gevoeligheid van 97,4% (95% CI: 86,1-99,6%). Voorts identificeerde alfadefensine correct cultuurnegatieve infecties bij ruwweg 36% van de PJI-patiënten in deze studie. Pagina 4 van 5

5 Prestatiekenmerken van laterale flow De prestaties van de laterale flow zijn beoordeeld ten opzichte van de laboratoriumtest. De positieve overeenstemming bedroeg 100% (59/59) en de negatieve overeenstemming bedroeg 95,6% (175/183). Nauwkeurigheid Nauwkeurigheidspools (4 pools; laag negatief; hoog negatief, laag positief en hoog positief) zijn dubbel getest, 5 dagen 2 maal per dag, om de nauwkeurigheid van de assay te schatten. De correcte resultaten in procenten (%) bedroegen respectievelijk 100, 97,5, 95, 100. Interfererende stoffen Het effect van hemoglobine, triglyceride en bilirubine (geconjugeerd en niet-geconjugeerd) is getest in een monster dat negatief en een monster dat positief was getest op alfadefensine 1-3 volgens de in CLSI-document EP7-A2 3 beschreven procedures. Voor elke stof bedroeg de hoogste concentratie, die geacht werd geen invloed te hebben op de klinische interpretatie van de resultaten: Hemoglobine 0,5 g/dl; triglyceriden 600 mg/dl; bilirubine, geconjugeerd 5 mg/dl en bilirubine, niet-geconjugeerd 15 mg/dl. Synovasure is een handelsmerk in licentie gegeven aan Zimmer Biomet Holdings Inc., de opvolger van Zimmer Holdings Inc. LITERATUUR 1. Deirmengian C, Kardos K, Kilmartin P, Cameron A, Schiller K, Parvizi J. Diagnosing Periprosthetic Joint Infection: Has the Era of the Biomarker Arrived? Clin Orthop Relat Res Nov; 472(11): Parvizi, J., Zmistowski, B., Della Valle, C., Bauer, T. W., Malizos, K. N., Alavi, A., Bedair, H., et al. (2013). Diagnosis of Periprosthetic Joint Infection. The Journal of Arthroplasty p CLSI. Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline Second Edition. CLSI document EP7-A2 (ISBN ). CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania USA, Ga voor aanvullende productinformatie naar CD Diagnostics, Inc. 650 Naamans Road Suite 100 Claymont, DE USA Zimmer GmbH Sulzerallee Winterthur Switzerland Pagina 5 van 5