Welkom Gezond of ziek: Een vouwtje verkeerd
Eiwitstructuur niveaus Eiwitvouwing zorgt voor eiwitstructuur
Een Hersenschors Hersenkamers Hersenplooi Cystische fibrose (CF) Kanker De ziekte van Alzheimer Verkeerde eiwitvouwing Verkeerde eiwitvouwing Verkeerde eiwitvouwing Instabiel eiwit Inactief eiwit Te stabiel eiwit
180cm 10-15cm Eiwit Eiwitvouwing Eiwit in de cel 20µm 5-100nm Experimenten Aantonen eiwit in cellen Immunofluorescentie Eiwitstructuurbepaling Röntgendiffractie
Aantonen eiwit in de cel (fluorescentiekleuring) Observatie met lichtmicroscoop Immunofluorescentiekleuring Cellen met stabiel eiwit Observatie met fluorescentiemicroscoop Resultaat: verschil tussen eiwitten Cellen met instabiel eiwit
Aantonen eiwit in de cel (fluorescentiekleuring) Observatie met lichtmicroscoop Immunofluorescentiekleuring Cellen met stabiel eiwit Observatie met fluorescentiemicroscoop Resultaat: verschil tussen eiwitten Cellen met instabiel eiwit
Immunofluorescentiekleuring Specifieke antistof Gekoppelde fluorescente stof Microscopisch Antilichamen toevoegen Bekijken Wassen Eiwitten in of op de cel Cel
Experiment A: Immunofluorescentie De verschillen tussen eiwitten van gezonde en zieke mensen Immunofluorescentiekleuring Goed gevouwen eiwit: kleur/lichtsignaal aanwezig Niet goed gevouwen eiwit: geen of minder kleur/lichtsignaal Tubuline Fibronectine
Röntgendiffractie De vier stappen van röntgendiffractie: Eiwitkristallen maken Kristal bestralen met röntgenstraling Afgebogen röntgenstraling meten Constructie 3D eiwitstructuur
Röntgendiffractie Kristallisatie Bijzondere vorm Specifiek voor elk eiwit Experimenten Eiwitstructuurbepaling Röntgendiffractie Kristalrooster van NaCl
Röntgendiffractie Kristal bestralen met röntgenstraling De kristallen buigen de straling af in een specifieke richting, die afhankelijk is van de ruimtelijke oriëntatie van de kristallen Röntgenstralen Bron Kristal
Röntgendiffractie Afgebogen röntgenstraling meten
Röntgendiffractie Opgevangen patroon Berekeningen 3D structuur
Experiment B: Essentieel onderdeel van Röntgendiffractie Eiwitkristallen maken van het eiwit lysozym Geconcentreerde eiwitoplossing + Kristallisatiemix Microscopische observatie Resultaat: vorming van kristallen
Proeven doen! Werken met kleine hoeveelheden vloeistof! Pipetmannen Werken met µl volumes P20 = maximaal 20 µl P200 = maximaal 200 µl ALLES VOLGENS VOORSCHRIFT!
Tot ziens bij! Succes!
ERROR: stackunderflow OFFENDING COMMAND: ~ STACK: