VALIDATIEDOSSIER DOSSIER DE VALIDATION SOP/MYC/ANA/07

Transcriptie

1 Leuvensesteenweg 17 - B 3080 Tervuren PRO/5.4/02/DOC01/V04 VALIDATIEDOSSIER DOSSIER DE VALIDATION SOP/MYC/ANA/07 1/02/13 Page 1 of 31

2 PRO/5.4/02/DOC02/V01 HISTORIEK VAN DE VALIDATIEDOSSIER / HISTORIQUE DU DOSSIER DE VALIDATION SOP/ DATUM / DATE FASE WIJZIGING / PHASE - MODIFICATION 1/02/13 Page 2 of 31

3 PRO/5.4/02/DOC03/V01 TOEPASSINGSGEBIED VAN DE SOP / DOMAINE D APPLICATION DE LA SOP: Deze handleiding beschrijft de bepaling in rijst, mais en pistachenoten met LC-MS/MS van de volgende mycotoxines: DON, AFB1, AFB2, AFG1, AFG2, HT2, T2, ZEN, OTA, FB1, FB2 & FB3. VALIDATIECRITERIA De beproevingen werden gebaseerd op de volgende in acht te nemen criteria : Tabel 1 : Validatiecriteria Mycotoxine Type levensmiddel MRL (µg/kg) Rec low (%) Rec high (%) RSD r RSD R AFLA mais From Horwitz 2* from Horwitz OTA onbewerkte granen DON brood FB1 + FB2 mais voor rechtstreekse menselijke consumptie T2 + HT2 onbewerkt graan ZEN onbewerkte mais ANALYSTEN De validatie werd gedaan door Fabienne Langenhaeck (staalvoorbereiding) of Bart Huybrechts (LC-MS analyse). VALIDATIEPARAMETERS / PARAMETRES DE VALIDATION De onderstaande parameters werden bepaald: 1. Factoren die de juistheid en de betrouwbaarheid van de beproevingen beïnvloedden; 2. Analytische specificiteit 3. Precisie: de herhaalbaarheid en de intralaboratoriumreproduceerbaarheid (intermediaite precision); 4. Juistheid of de terugvinding; 5. Beslissingsgrens (CCα), detectievermogen (CCβ) en rapporteringslimiet 6. Lineariteit; 7. Meetonzekerheid. NOTA: Tijdens de validatie werd gebruikt gemaakt van 7 standaarden (MS-1 tot en met MS-7, zie hoofdstuk lineariteit ) geïnjecteerd aan het begin en einde van de sequentie en ieder staal werd tweemaal geïnjecteerd. In de uiteindelijke methode zal de curve slechts uit drie punten bestaan die qua concentratie equivalent zijn aan MS-2, MS-4 en MS-7 (zie SOP voor verdere details) die eenmaal aan het begin van de sequentie geïnjecteerd worden. Ieder staal zal ook slechts eenmaal geïnjecteerd worden en gecorrigeerd worden met een standaardrecovery factor indien de spike aan de recovery voorwaarden zoals gesteld in de SOP voldoet. Naar deze ingekorte procedure zal in de rest van het document verwezen worden als korte methode. De onderstaande data (punt 2 tot en met 7) werden in dubbel berekent, 1 met alle data en 1 voor de korte methode. Om de data voor de korte methode te bekomen werd op de volgende manier gewerkt: telkens werd de sample list herschreven zodat ze overeenkomt met de verkorte procedure hierboven beschreven, voor het zo bekomen resultaat in targetlynx werden dan alle data in excel geherprocessed om de data voor reproduceerbaarheid en nauwkeurigheid te verkrijgen. De gedetailleerde berekeningen kunnen in de bijlages (...) teruggevonden worden. 1/02/13 Page 3 of 31

4 PRO/5.4/02/DOC04/V01 FACTOREN DIE DE JUISTHEID EN BETROUWBAARHEID VAN DE BEPROEVINGEN BEÏNVLOEDEN 1. UITRUSTING EN LABORATORIUMMATERIAAL / EQUIPEMENT ET MATERIEL DE LABORATOIRE Component Kenmerk Controle LC-MS/MS Relevant Jaarlijks onderhoud (logboek) + injectie QC Micropipetten Relevant Periodieke ijking Weegschaal Relevant Periodieke ijking + controlegewicht Diepvriezer/koelkast Relevant Dagelijkse controle Bottle top dispensor Relevant Periodieke ijking Glaswerk Relevant Standaard schoonmaakprocedure volgen 2. STALEN EN PRODUCTEN / ECHANTILLONS ET PRODUITS Component Kenmerk Controle Loopmiddelen/buffers voor LC-MS/MS Water Solventen/zouten voor extractie Bereidden Solventen LC Relevant Relevant Niet relevant Relevant Niet belangrijk zolang dezelfde kwaliteit bij dezelfde leverancier betrokken wordt Regelmatig onderhoud + dagelijkse controle Niet belangrijk indien van analytische kwaliteit of beter Niet problematisch zolang de bufferzouten nauwkeurig afgewogen worden en mierenzuur met een micropipet gedoseerd 3. PRINCIPE VAN DE METHODE / PRINCIPE DE LA METHODE Component Kenmerk Controle QuEChERS Niet relevant Methode omhelst geen enkele complexe manipulatie 1/02/13 Page 4 of 31

5 4. OMGEVING / MILIEU AMBIANT Component Kenmerk Controle Extractie LC Massaspectrometer Relevant Relevant Relevant Extractietijd (min 60 minuten) dient gerespecteerd te worden Aan het begin van iedere analyse wordt een QC geïnjecteerd Aan het begin van iedere analyse wordt een QC geïnjecteerd 5. PERSONEEL / PERSONNEL Component Kenmerk Controle Analysten + TV Relevant Complexe apparatuur vereist adequate opleiding, opgevolgd via de vorming van het personeel Analytische specificiteit De analytische specificiteit werd geverifieerd door een blanco solvent, een blanco procedure, een niet gespiked staal van mais, rijst en pistache te injecteren. Er is nergens interferentie waarneembaar (bijlage 2). Opmerking: Mais is niet blanco voor DON (± 150 ng/g) en ZEN (±100 ng/g), tijdens de validatieberekeningen zal dit signaal afgetrokken worden van het signaal van het gespikede staal. Er is wat carry-over voor fumonisines, hoewel het resulterend carry-over signaal van zelfs de hoogste standaard (equivalent µg/g) kleiner is dan de technische kwantificatielimiet zal deze op 100 gezet worden om te verhinderen dat een staal gelopen na een zwaar gecontamineerd staal als vals positief beschouwd worden. 1/02/13 Page 5 of 31

6 Precisie: de herhaalbaarheid en de intralaboratoriumreproduceerbaarheid (intermediate precision) Mais Tabel 2 : Herhaalbaarheid en de intralaboratoriumreproduceerbaarheid voor mais µg/kg % µg/kg gemeten 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) DON AFG2 AFG1 AFB2 AFB1 HT2 FB1 T2 FB3 OTA ZEN FB % 6% 37% 39% 26% % 22% 30% 36% 24% % 14% 17% 33% 22% % 0% 24% 44% 29% % 13% 16% 44% 29% % 9% 13% 44% 29% % 14% 22% 44% 29% % 14% 19% 44% 29% % 9% 13% 44% 29% % 12% 21% 44% 29% % 14% 17% 44% 29% % 10% 13% 44% 29% % 5% 19% 44% 29% % 13% 19% 44% 29% % 8% 12% 44% 29% % 20% 27% 44% 29% % 10% 16% 44% 29% % 11% 12% 43% 28% % 17% 23% 39% 26% % 0% 11% 36% 24% % 0% 7% 33% 22% % 13% 21% 44% 29% % 15% 19% 44% 29% % 12% 15% 43% 28% % 17% 23% 44% 29% % 0% 12% 39% 26% % 0% 7% 37% 25% % 14% 26% 44% 29% % 14% 18% 44% 29% % 9% 14% 44% 29% % 0% 30% 41% 27% % 25% 35% 37% 25% % 8% 18% 35% 23% % 13% 21% 39% 26% % 5% 13% 36% 24% % 1% 8% 33% 22% 1/02/13 Page 6 of 31

7 Tabel 3 : Herhaalbaarheid en de intralaboratoriumreproduceerbaarheid voor mais = korte methode µg/kg % µg/kg gemeten 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) DON AFG2 AFG1 AFB2 AFB1 HT2 FB1 T2 FB3 OTA ZEN FB % 14% 34% 39% 26% % 29% 34% 36% 24% % 33% 36% 33% 22% % 0% 28% 44% 29% % 21% 24% 44% 29% % 14% 16% 44% 29% % 6% 18% 44% 29% % 23% 26% 44% 29% % 18% 21% 44% 29% % 0% 14% 44% 29% % 31% 35% 44% 29% % 28% 30% 44% 29% % 0% 19% 44% 29% % 22% 26% 44% 29% % 19% 21% 44% 29% % 26% 32% 44% 29% % 16% 24% 44% 29% % 26% 26% 43% 28% % 18% 24% 39% 26% % 0% 12% 36% 24% % 0% 7% 33% 22% % 9% 18% 44% 29% % 18% 23% 44% 29% % 16% 18% 43% 28% % 15% 21% 44% 29% % 5% 13% 39% 26% % 2% 8% 37% 25% % 9% 20% 44% 29% % 16% 21% 44% 29% % 18% 23% 44% 29% % 0% 55% 41% 27% % 58% 66% 37% 25% % 31% 34% 35% 23% % 11% 19% 39% 26% % 9% 15% 36% 24% % 4% 8% 33% 22% 1/02/13 Page 7 of 31

8 Rijst Tabel 4 : Herhaalbaarheid en de intralaboratoriumreproduceerbaarheid voor rijst µg/kg % µg/kg gemeten 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) DON AFG2 AFG1 AFB2 AFB1 HT2 FB1 T2 FB3 OTA ZEN FB % 21% 24% 39% 26% % 0% 9% 36% 24% % 7% 15% 33% 22% % 12% 20% 44% 29% % 10% 12% 44% 29% % 10% 19% 44% 29% % 10% 16% 44% 29% % 9% 11% 44% 29% % 15% 22% 44% 29% % 16% 20% 44% 29% % 5% 9% 44% 29% % 15% 20% 44% 29% % 12% 15% 44% 29% % 11% 12% 44% 29% % 17% 23% 44% 29% % 23% 25% 44% 29% % 8% 12% 44% 29% % 12% 23% 43% 28% % 23% 26% 39% 26% % 11% 12% 36% 24% % 0% 13% 33% 22% % 6% 14% 44% 29% % 12% 14% 44% 29% % 16% 23% 43% 28% % 16% 19% 44% 29% % 9% 11% 39% 26% % 3% 17% 37% 25% % 6% 14% 44% 29% % 12% 14% 44% 29% % 18% 29% 44% 29% % 15% 20% 41% 27% % 20% 22% 37% 25% % 27% 34% 35% 23% % 18% 21% 39% 26% % 12% 14% 36% 24% % 10% 19% 33% 22% 1/02/13 Page 8 of 31

9 Tabel 5 : Herhaalbaarheid en de intralaboratoriumreproduceerbaarheid voor rijst = korte methode µg/kg % µg/kg gemeten 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) DON AFG2 AFG1 AFB2 AFB1 HT2 FB1 T2 FB3 OTA ZEN FB % 40% 54% 39% 26% % 26% 36% 36% 24% % 28% 32% 33% 22% % 19% 29% 44% 29% % 20% 21% 44% 29% % 21% 27% 44% 29% % 4% 12% 44% 29% % 18% 19% 44% 29% % 25% 29% 44% 29% % 12% 17% 44% 29% % 18% 20% 44% 29% % 27% 31% 44% 29% % 8% 14% 44% 29% % 18% 19% 44% 29% % 27% 31% 44% 29% % 21% 24% 44% 29% % 11% 17% 44% 29% % 22% 29% 43% 28% % 22% 25% 39% 26% % 10% 12% 36% 24% % 5% 14% 33% 22% % 6% 14% 44% 29% % 21% 22% 44% 29% % 22% 28% 43% 28% % 14% 16% 44% 29% % 10% 12% 39% 26% % 12% 20% 37% 25% % 11% 13% 44% 29% % 17% 18% 44% 29% % 29% 40% 44% 29% % 11% 16% 41% 27% % 27% 29% 37% 25% % 35% 41% 35% 23% % 14% 17% 39% 26% % 13% 15% 36% 24% % 15% 23% 33% 22% 1/02/13 Page 9 of 31

10 Pistache Tabel 6 : Herhaalbaarheid en de intralaboratoriumreproduceerbaarheid voor pistache µg/kg % µg/kg gemeten 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) DON AFG2 AFG1 AFB2 AFB1 HT2 FB1 T2 FB3 OTA ZEN FB % 9% 26% 39% 26% % 6% 15% 36% 24% % 18% 20% 33% 22% % 15% 28% 44% 29% % 12% 18% 44% 29% % 24% 25% 44% 29% % 16% 24% 44% 29% % 14% 16% 44% 29% % 20% 21% 44% 29% % 11% 23% 44% 29% % 14% 15% 44% 29% % 18% 20% 44% 29% % 19% 27% 44% 29% % 12% 14% 44% 29% % 20% 20% 44% 29% % 15% 30% 44% 29% % 11% 16% 44% 29% % 17% 20% 43% 28% % 10% 18% 39% 26% % 14% 15% 36% 24% % 15% 15% 33% 22% % 14% 23% 44% 29% % 16% 17% 44% 29% % 19% 21% 43% 28% % 15% 20% 44% 29% % 18% 19% 39% 26% % 19% 20% 37% 25% % 14% 23% 44% 29% % 13% 16% 44% 29% % 21% 22% 44% 29% % 13% 20% 41% 27% % 10% 16% 37% 25% % 20% 22% 35% 23% % 11% 18% 39% 26% % 13% 14% 36% 24% % 22% 23% 33% 22% 1/02/13 Page 10 of 31

11 Tabel 7 : Herhaalbaarheid en de intralaboratoriumreproduceerbaarheid voor pistache = korte methode µg/kg % µg/kg gemeten 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) 2 x Srepl 2 x Sdays 2 x Srw 2 x S(R) 2 x S(rw) DON AFG2 AFG1 AFB2 AFB1 HT2 FB1 T2 FB3 OTA ZEN FB % 0% 21% 39% 26% % 0% 20% 36% 24% % 25% 28% 33% 22% % 5% 23% 44% 29% % 0% 15% 44% 29% % 23% 24% 44% 29% % 0% 21% 44% 29% % 9% 12% 44% 29% % 17% 17% 44% 29% % 0% 20% 44% 29% % 11% 12% 44% 29% % 12% 14% 44% 29% % 0% 21% 44% 29% % 5% 9% 44% 29% % 12% 13% 44% 29% % 7% 29% 44% 29% % 0% 11% 44% 29% % 13% 17% 43% 28% % 14% 20% 39% 26% % 17% 18% 36% 24% % 7% 9% 33% 22% % 6% 19% 44% 29% % 13% 14% 44% 29% % 13% 15% 43% 28% % 12% 17% 44% 29% % 16% 19% 39% 26% % 7% 11% 37% 25% % 13% 24% 44% 29% % 7% 17% 44% 29% % 16% 18% 44% 29% % 13% 19% 41% 27% % 0% 11% 37% 25% % 21% 23% 35% 23% % 7% 17% 39% 26% % 14% 15% 36% 24% % 9% 11% 33% 22% 1/02/13 Page 11 of 31

12 Juistheid (terugvindingspercentage); Het terugvindingspercentage werd bepaald voor 0.5, 1 & 2 maal de vooropgestelde MRL. Tabel 8 : Terugvindingspercentage Component Mais Rijst Pistache Gemidddeld Algemeen gemiddelde DON 78% 87% 88% 84% AFG2 82% 92% 92% 88% AFG1 80% 90% 85% 85% AFB2 76% 89% 82% 82% AFB1 85% 91% 88% 88% 86% HT2 83% 93% 88% 88% T2 83% 93% 90% 88% OTA 80% 89% 84% 84% ZEN 78% 88% 79% 82% FB1 94% 103% 89% 96% FB2 99% 109% 89% 99% 97% FB3 94% 102% 90% 95% Tabel 9 : Terugvindingspercentage = verkorte methode Component Mais Rijst Pistache Gemidddeld Algemeen gemiddelde DON 78% 87% 89% 85% AFG2 79% 92% 91% 87% AFG1 79% 90% 89% 86% AFB2 80% 89% 85% 85% AFB1 84% 91% 89% 88% HT2 84% 93% 93% 90% T2 83% 93% 93% 90% OTA 79% 89% 86% 85% ZEN 77% 88% 83% 83% FB1 93% 103% 90% 95% FB2 96% 109% 90% 98% FB3 93% 102% 92% 95% 86% 96% 1/02/13 Page 12 of 31

13 Beslissingsgrens (CCα), detectievermogen (CCβ) & rapporteringslimiet CCα Tabel 10 : CCα MRL Mais Pistache Rijst µg/kg µg/kg % µg/kg % µg/kg % DON % % % AFG % % % AFG % % % AFB % % % AFB % % % HT % % % T % % % OTA % % % ZEN % % % FB % % % FB % % % FB % % % Tabel 11 : CCα = korte methode MRL Mais Pistache Rijst µg/kg µg/kg % µg/kg % µg/kg % DON % % % AFG % % % AFG % % % AFB % % % AFB % % % HT % % % T % % % OTA % % % ZEN % % % FB % % % FB % % % FB % % % CCβ Tabel 12 : CCβ MRL Mais Pistache Rijst µg/kg µg/kg % µg/kg % µg/kg % DON % % % AFG % % % AFG % % % AFB % % % AFB % % % HT % % % T % % % OTA % % % ZEN % % % FB % % % FB % % % FB % % % 1/02/13 Page 13 of 31

14 Tabel 13 : CCβ = korte methode MRL Mais Pistache Rijst µg/kg µg/kg % µg/kg % µg/kg % DON % % % AFG % % % AFG % % % AFB % % % AFB % % % HT % % % T % % % OTA % % % ZEN % % % FB % % % FB % % % FB % % % Rapporteringslimiet De rapporteringslimiet werd berekend door Targetlynx software op basis van het signaal in matrix en is gedefinieerd als 10 * S/N. Voor iedere matrix werd het gewogen gemiddelde genomen over drie dagen, van de drie matrices werd de hoogste waarde weerhouden en deze naar boven afgerond. Tabel 14 : Rapporteringslimiet LOQ (µg/kg) LOQ Afgerond (µg/kg) DON AFG AFG AFB AFB HT FB T FB OTA ZEN FB Tabel 15 : Rapporteringslimiet =korte methode LOQ (µg/kg) LOQ Afgerond (µg/kg) DON AFG AFG AFB AFB HT FB T FB OTA ZEN FB /02/13 Page 14 of 31

15 Lineariteit De ijkcurves bestaan uit 7 punten, deze werden berekent in Targetlynx. Voor DON, AFB1, AFB2, AFG1, AFG2, HT2, T2, ZEN & OTA werd een eerstegraads calibratiecurve met 1/X weging toegepast. Voor FB1, FB2 & FB3 werd een logarithmische curve gebruikt. De verschillende punten (niet gecorrigeerd voor toevoeging IS) staan in de onderstaande tabel. Tabel 16 : ijkcurve AFB1 AFB2 AFG1 AFG2 FB1 FB2 FB3 T2 HT2 DON ZEA OTA MS MS MS MS MS MS MS Alle ijkcurves hebben een R , alle residual curves vertonen een random patroon. Gedetailleerde curves kunnen teruggevonden worden in bijlage nr.. 1/02/13 Page 15 of 31

16 Meetonzekerheid. (*) u = sd (**) U = 2 sd (***) from modif. Horwitz for Srw, HorRat < 2x2/3, cfr Codex Alim - mth criteria - draft Mais Tabel 17: Meetonzekerheid Mais nom.ccn av.meas. uncertainty (k = 1) (*) U, ext. unc. (k = 2) (**) Umax. (k = 2) (***) ug/kg ug/kg ug/kg % ug/kg % ug/kg % % 7 37% % DON % % % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFB % % % % % % % % % AFB % % % % % % % % % HT % % % % % % % % % T % % % % % % % % % OTA % % % % % % % % % ZEN % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % 1/02/13 Page 16 of 31

17 Tabel 18: Meetonzekerheid Mais = korte methode nom.ccn av.meas. uncertainty (k = 1) (*) U, ext. unc. (k = 2) (**) Umax. (k = 2) (***) ug/kg ug/kg ug/kg % ug/kg % ug/kg % % % % DON % % % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFB % % % % % % % % % AFB % % % % % % % % % HT % % % % % % % % % T % % % % % % % % % OTA % % % % % % % % % ZEN % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % 1/02/13 Page 17 of 31

18 Pistache Tabel 19 : Meetonzekerheid Pistache nom.ccn av.meas. uncertainty (k = 1) (*) U, ext. unc. (k = 2) (**) Umax. (k = 2) (***) ug/kg ug/kg ug/kg % ug/kg % ug/kg % % % % DON % 7 15% % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFB % % % % % % % % % AFB % % % % % % % % % HT % % % % % % % % % T % % % % % % % % % OTA % % % % % % % % % ZEN % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % 1/02/13 Page 18 of 31

19 Tabel 20 : Meetonzekerheid Pistache = korte methode nom.ccn av.meas. uncertainty (k = 1) (*) U, ext. unc. (k = 2) (**) Umax. (k = 2) (***) ug/kg ug/kg ug/kg % ug/kg % ug/kg % % % % DON % % % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFB % % % % % % % % % AFB % 0.4 9% % % % % % % % HT % % % % % % % % % T % % % % % % % % % OTA % % % % % % % % % ZEN % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % 1/02/13 Page 19 of 31

20 Rijst Tabel 21 : Meetonzekerheid Rijst nom.ccn av.meas. uncertainty (k = 1) (*) U, ext. unc. (k = 2) (**) Umax. (k = 2) (***) ug/kg ug/kg ug/kg % ug/kg % ug/kg % % % % DON % % % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFB % 0.4 9% % % % % % % % AFB % % % % % % % % % HT % % % % % % % % % T % % % % % % % % % OTA % % % % % % % % % ZEN % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % 1/02/13 Page 20 of 31

21 Tabel 22 : Meetonzekerheid Rijst = korte methode nom.ccn av.meas. uncertainty (k = 1) (*) U, ext. unc. (k = 2) (**) Umax. (k = 2) (***) ug/kg ug/kg ug/kg % ug/kg % ug/kg % % % % DON % % % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFG % % % % % % % % % AFB % % % % % % % % % AFB % % % % % % % % % HT % % % % % % % % % T % % % % % % % % % OTA % % % % % % % % % ZEN % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % % % % FB % % % % % % 1/02/13 Page 21 of 31

22 RINGTESTEN Tabel 23 herneemt de resultaten van ringtesten waaraan deelgenomen werd. Telkens werd de sample list herschreven zodat ze overeenkomt met de verkorte procedure hierboven beschreven, voor het zo bekomen resultaat werd opnieuw een Z-score berekent (met de referentiewaarde en standaarddeviatie gecommuniceerd door de PT organisator), in de tabel weergegeven als korte methode. Alle zo bekomen Z-scores voldoen. Tabel 23 : Ringtesten Dag Sample Uitgever Matrix Component Referentie waarde Resultaat Korte methode Z- waarde Korte methode Z-score 30/10/ BIPEA Tarwe AFB AFB AFG AFG TOT AFLA OTA /03/12 12/2012 DLA Tarwe DON /03/ BIPEA Pistache AFB AFB AFG AFG TOT AFLA OTA /06/ /2012 DLA Mais FB FB TOT FB /02/13 Page 22 of 31

23 BESLISSINGEN Bij de rapportering van de stalen hanteert men de volgende criteria: Een resultaat kleiner dan de LOQ wordt gerapporteerd als <LOQ Indien een norm bestaat, hou dan rekening met de beslissingsgrens CCα Indien een norm voorgesteld is, maar nog niet van toepassing is, hou dan rekening met de beslissingsgrens CCα berekend zoals voorzien in de toekomstige norm 1/02/13 Page 23 of 31

24 Bijlage 1: Referenties J. Van Loco, H. Beernaert, An Alternative Method Validation Strategy for the European Decision 2002/657/EC, Proceedings of Euro Food Chem XII: Strategies for Safe Food 2003, 1, /657/EC: Commission Decision of 12 August 2002 implementing Council Directive 96/23/EC concerning the performance of analytical methods and the interpretation of results Guidelines for the implementation of 2002/657/EC (SANCO/2004/2726-rev 4-December 2008) 401/2006: Commission regulation No 401/2006 EC of 23 February 2006 laying down the methods of sampling and analysis for the official control of the levels of mycotoxins in foodstuffs 178/2010: Commission Regulation (EU) No 178/2010 of 2 March 2010 amending Regulation (EC) No 401/2006 as regards groundnuts (peanuts), other oilseeds, tree nuts, apricot kernels, liquorice and vegetable oil 1881/2006: Commission regulation (EC) No 1881/2006 of 19 December 2006 setting maximum levels for certain contaminants in foodstuffs 178/2010: Commission regulation (EU) No 178/2010 of 2 March 2010 amending Regulation (EC) No 401/2006 as regards groundnuts (peanuts), other oilseeds, tree nuts, apricot kernels, liquorice and vegetable oil J. Vogelgesang, J. Hädrich, Accredit. Qual. Assur., 3, (1998) J. Neter, M. Kutner, W. Wasserman, C. Nachtsheim, J. Neter, Applied Linear Statistical Models, McGraw-Hill Irwin, 4 th edition, 1996 J. Miller, J. Miller, Statistics and Chemometrics for Analytical Chemistry, Pearson Education, 6 th edition, 2010 M. Anastassiades, S.J. Lehotay, D. Stajnbaher, F.J. Schenck, J. AOAC International 86 (2003) 412. Bijlage 2: Analytische specificiteit Tabel 24 : Legende BH_ _QUECHERS_DAG5_005 BH_ _QUECHERS_DAG5_009 BH_ _QUECHERS_DAG5_015 BH_ _QUECHERS_DAG5_017 BH_ _QUECHERS_DAG5_018 BH_ _QUECHERS_DAG5_020 BH_ _QUECHERS_DAG5_048 BH_ _QUECHERS_DAG5_076 MS2 QUECHERS DILUTIE MS4 QUECHERS DILUTIE MS7 QUECHERS DILUTIE BLANK STAAL 1 BLANCO PROCEDURE MAIS BLANCO RIJST BLANCO PISTACHE BLANCO 1/02/13 Page 24 of 31

25 Bijlage 3: Calibratiecurves Figuur 1: Dag 1 = mais & rijst Compound name: DON Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 2 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA G2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 4 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA G1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 6 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA B2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 8 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA B1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 10 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: HT2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 12 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 14 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log Compound name: T2-NH4 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 16 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB3 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 18 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log Compound name: OTA Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 20 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: ZEA Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 22 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 24 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log /02/13 Page 25 of 31

26 Figuur 2: Dag 1 = Pistachenoten Compound name: DON Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 2 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA G2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 4 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA G1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 6 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA B2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 8 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA B1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 10 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: HT2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 12 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 14 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log Compound name: T2-NH4 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 16 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB3 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 18 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log Compound name: OTA Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 20 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: ZEA Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 22 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 24 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log /02/13 Page 26 of 31

27 Figuur 3: Dag 2 = mais & rijst Compound name: DON Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 2 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA G2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 4 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA G1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 6 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA B2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 8 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA B1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 10 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: HT2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 12 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 14 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log Compound name: T2-NH4 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 16 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB3 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 18 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log Compound name: OTA Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 20 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: ZEA Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 22 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 24 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log /02/13 Page 27 of 31

28 Figuur 4: Dag 2 = Pistachenoten Compound name: DON Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 2 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA G2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 4 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA G1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 6 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA B2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 8 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA B1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 10 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: HT2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 12 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 14 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log Compound name: T2-NH4 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 16 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB3 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 18 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log Compound name: OTA Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 20 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: ZEA Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 22 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 24 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log /02/13 Page 28 of 31

29 Figuur 5: Dag 3= mais & rijst & pistachenoten Compound name: DON Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 2 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA G2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 4 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA G1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 6 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA B2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 8 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: AFLA B1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 10 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: HT2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 12 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB1 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 14 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log Compound name: T2-NH4 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 16 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB3 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 18 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log Compound name: OTA Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 20 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: ZEA Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 22 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Compound name: FB2 Correlation coefficient: r = , r^2 = Calibration curve: * x type: Internal Std ( Ref 24 ), Area * ( IS Conc. / IS Area ) Curve type: Linear, Origin: Exclude, Weighting: Null, Axis trans: Log /02/13 Page 29 of 31