RhD typeren, wanneer alarmeren?

Transcriptie

1 RhD typeren, wanneer alarmeren? Peter Ligthart 8 juni

2 Casus 24 jarige vrouw, 12 weken zwanger Routine ABO Rhesus (Rh)D bepaling Ortho Biovue kolom techniek positief (2+) Verwachting: negatief of 4+ 8 juni

3 Algemene vraag Wat moet ik met RhD antigeen bepaling van 2+? Waarom test ik? (ontvanger of donor) Wat wil ik weten? 8 juni

4 Zwak RhD antigeen Verminderde expressie van het RhD antigeen minder dan 20% t.o.v. R 1 r (CcDee) 5-10% alleen aantoonbaar in de IAGT normaal RhD antigeen genetisch wel mutaties gevonden (verschillende typen) geen allo anti D vorming 8 juni

5 Variant RhD antigeen RhD antigeen waar een gedeelte van ontbreekt Een antigeen is opgebouwd uit epitopen Een variant RhD antigeen mist één of meer van die epitopen Zwakke expressie is mogelijk Totaal 30 verschillende epitopen bekend Minstens 40 verschillende RhD varianten mogelijkheid tot allo anti D vorming 8 juni

6 RhD negatief RhD positief Zwak RhD antigeen Variant RhD antigeen 8 juni

7 RH genen RHD gen D positief RHCE gen C/c E/e D negatief 8 juni

8 RhD varianten DIII DFR DVa DAR DVI R o Har / Crawford 8 juni

9 Zwak RhD antigenen Type 1 Type 5 Type 2 Type 6 Type 3 Type 7 8 juni

10 Zwak RhD of RhD variant? commerciele reagentia monoclonale en polyclonale anti D s Epitopen panel MoAbs waarvan je weet welk epitoop herkend wordt standaard DNA RHD Multiplex PCR / MLPA speciele serologie en DNA DNA sequencing en panel van ca. 80 anti D MoAbs 8 juni

11 8 juni

12 8 juni

13 8 juni

14 DNA onderzoek RHD gen D positief RHCE gen C/c D negatief E/e RHD variant 8 juni

15 Resultaten referentie diagnostiek Uitslag DNA onderzoek 5% 56% 39% Rh D positief Rh D variant Rh D negatief N = juni

16 Resultaten referentie diagnostiek RhD varianten 7% 3%1% 4% DIII DIVa DVa 40% 27% D VI D VII DFR RoHar 3% 9% 6% DAR?? 8 juni

17 Welke varianten zou je willen vinden Het liefste allemaal... maar dat lukt niet Welke komen het meeste voor? DAR, DVI Welke maken het snelst een klinisch relevante anti D? DVI, DFR DVI, DFR, DAR herkennen als RhD variant DFR en DAR kunnen lijken op een zwak RhD antigeen 8 juni

18 Richtlijn Bloedtransfusie, Rhesus-D-bloedgroep bepaling Aanbevelingen ontvangers 1 reagens, DVI als RhD negatief bepalen navelstreng bloed (i.v.m. ampul toediening), DVI als RhD positief bepalen 8 juni

19 Welke reagentia zijn er? Monoclonaal Polyclonaal Blend reagentia Buisjes Kolom methode Verschillende firma s 8 juni

20 Evaluatie van RhD reagentia Verschillende varianten en zwakke D antigenen zwakke D antigenen (4), DVI (6), DFR (3) en DAR (3) 2 donoren met een positieve directe antiglobuline test Getest in buisjes monoclonaal, polyclonaal, blend reagens Getest in kolommethode (Diamed en Ortho) 8 juni

21 Resultaten Anti D reagentia buisjes Anti D kolom methode blend Diamed Ortho RhD type Mono Poly KT 37 o C IAT DVI- DVI+ DVI - 1+/ / /3+ - DFR -/zw 1+/ / /3+ zw/3+ DAR 1+/2+ zw/1+ -/zw -/zw 2+/3+ 2+/3+ 2+/3+ 2+/3+ Zwak RhD zw/1+ - -/zw -/zw 1+/3+ 2+/3+ 2+/3+ 2+/3+ 8 juni

22 Samenvatting Kolom technieken zeer gevoelig voor D antigenen met een lage antigeen expressie DVI goed te herkennen (negatief), DFR en DAR moeilijk te herkennen met 1 reagens 8 juni

23 Wat is een reden voor vervolgonderzoek? Zwakkere reactie met standaard anti D reagentia minder dan 2+ (arbitraire grens) Grote verschillen in reactie sterkte tussen verschillende reagentia minimaal 2 stappen (4+/2+, 3+/1+, pos/neg) RhD positief met anti D zowel allo als auto 8 juni

24 Casus 24 jarige vrouw, 12 weken zwanger Routine ABO Rhesus (Rh)D bepaling Ortho Biovue kolom techniek positief (2+) 8 juni

25 Casus Serologie Anti D monoclonaal zwak + Anti D blend (IAT) 3+ Epitopen panel Passend bij DFR DNA (MPX-D) Passend bij DFR Conclusie RhD variant DFR Mevrouw als ontvanger RhD negatief beschouwen (30e week as onderzoek, ampul) 8 juni

26 Wat is een reden voor vervolgonderzoek? Zwakkere reactie met standaard anti D reagentia minder dan 2+ (arbitraire grens) Grote verschillen in reactie sterkte tussen verschillende reagentia minimaal 2 stappen (4+/2+, 3+/1+, pos/neg) RhD positief met anti D zowel allo als auto 8 juni

27 U bedankt voor de aandacht Verder dank aan; Claudia Folman Masja de Haas Marijke Overbeeke 8 juni