QIAsymphony DSP AXpH DNA Kit

Transcriptie

1 QIAsymphony DSP AXpH DNA Kit De QIAsymphony DSP AXpH DNA Kit is ontworpen voor volledig geautomatiseerde opzuivering van DNA uit cytologiemedia op vloeistofbasis met gebruik van de QIAsymphony SP. De QIAsymphony DSP AXpH DNA Kit levert DNA-eluaten die direct gebruikt kunnen worden in downstream toepassingen, zoals op hybridisatie gebaseerde assays of enzymreacties. De eluaten mogen niet worden gebruikt voor PCR. De QIAsymphony SP voert alle stappen van de procedure voor de monsterbereiding uit. In één enkele run kunnen maximaal 96 monsters, in batches van maximaal, worden verwerkt. Werkingseigenschappen Reproduceerbaarheid De reproduceerbaarheid is bepaald in onafhankelijke experimenten. DNA werd opgezuiverd uit 7 verdunningen van een HPV-positieve cellijn (SiHa) in een achtergrond van negatieve cellen in PreservCyt-media, met gebruik van de QIAsymphony DSP AXpH DNA Kit op de QIAsymphony SP. De eluaten werden geanalyseerd met de digene HC High-Risk HPV Test (Afbeelding ). 8 7 y =,65x.65x -,6.6 R =, Experiment () Experiment () Afbeelding. Gemiddelde -waarden van onafhankelijke experimenten waarin DNA werd opgezuiverd uit 7 verdunningen van een HPV-positieve cellijn. Sample & Assay Technologies

2 Nauwkeurigheid De nauwkeurigheid tussen apparaten en die tussen verschillende dagen van de opzuivering van DNA met de QIAsymphony DSP AxpH Kit op de QIAsymphony SP is bepaald op verschillende apparaten ( ) en op verschillende dagen (A G) (Tabel ). DNA werd opgezuiverd uit HPV-positieve cellen (SiHa-cellijn) in een achergrond van negatieve cellen in PreservCyt-media. De eluaten werden geanalyseerd met de digene HC High-Risk HPV DNA Test (Tabel ). Tabel. Strategie voor het bepalen van de nauwkeurigheid tussen apparaten en die tussen dagen. A G staan voor afzonderlijke runs op de QIAsymphony SP. Apparaat Dag Dag Dag Apparaat A + A D F Apparaat B E Apparaat C G Tabel. Reproduceerbaarheid, nauwkeurigheid tussen apparaten, nauwkeurigheid tussen dagen en nauwkeurigheid tussen apparaten én dagen. Runs Nauwkeurigheid (% VC) Reproduceerbaarheid A+A 7, Nauwkeurigheid tussen apparaten A+B+C,8 Nauwkeurigheid tussen dagen A+D+F,5 Nauwkeurigheid tussen apparaten én A+E+G 9,9 dagen Werkingseigenschappen QIAsymphony DSP AXpH DNA Kit Pagina van 6

3 7 6 5 Reproduceer- Nauwkeurigheid Nauwkeurigheid Nauwkeurigheid baarheid tussen apparaten tussen dagen tussen apparaten én dagen Afbeelding. Reproduceerbaarheid, nauwkeurigheid tussen apparaten, nauwkeurigheid tussen dagen en nauwkeurigheid tussen apparaten én dagen. Stabiliteit HPV-positieve celmonsters, positieve klinische monsters en negatieve celmonsters werden verdeeld in secundaire ml-buisjes van BD, volgens de voor de betreffende batch opgegeven tijd. De monsters werden bewaard bij 5 C ± C of bij C ± C. Op de tijdstippen,, 8 en uur werden monsters (n = ) afgenomen bij beide temperaturen, die werden gedefinieerd als een batch (totaal aantal monsters = ), en vervolgens direct verwerkt op de QIAsymphony SP. De eluaten werden geanalyseerd met de digene HC High-Risk HPV DNA Test (Afbeelding ). A Uren op werktafel Werkingseigenschappen QIAsymphony DSP AXpH DNA Kit Pagina van 6

4 B Uren op werktafel C Uren op werktafel Afbeelding. Stabiliteit van A positieve cellulaire, B positieve klinische en C negatieve cellulaire monsters na,, 8 en uur bij C op de werktafel. Variabiliteit tussen batches Er werd DNA opgezuiverd uit batches van gepoolde positieve klinische monsters (cervicale uitstrijkjes, bewaard in PreservCyt-medium), met de QIAsymphony DSP AxpH Kit op de QIAsymphony SP. De eluaten werden geanalyseerd met de digene HC High-Risk HPV DNA Test (Afbeelding ). Er werd voor de verschillende batches geen significante verandering van de waargenomen, wat aangeeft dat er geen significante variabiliteit tussen batches was. Werkingseigenschappen QIAsymphony DSP AXpH DNA Kit Pagina van 6

5 Batch Afbeelding. Variabiliteit tussen batches van gepoolde positieve klinische monsters, opgezuiverd op de QIAsymphony SP met de QIAsymphony DSP AXpH Kit. Er werd DNA opgezuiverd uit 8 batches van monsters van HPV-positieve cellijnen (SiHa-cellen in PreservCyt-medium), met de QIAsymphony DSP AXpH Kit op de QIAsymphony SP. Er werden batches afgenomen voordat de run werd gestart en batches vlak voordat elke batch werd verwerkt. De eluaten werden geanalyseerd met de digene HC High-Risk HPV DNA Test (Afbeelding 5). Wanneer de monsters vlak voordat de batch werd verwerkt, werden afgenomen, werd er geen verandering van waargenomen. Monsters die werden afgenomen aan het begin van de run tonen een afname van het -signaal. Daarom moeten monsters die op de QIAsymphony SP met de QIAsymphony DSP AXpH Kit worden verwerkt, vlak vóór het verwerken van de monsters worden afgenomen. Werkingseigenschappen QIAsymphony DSP AXpH DNA Kit Pagina 5 van 6

6 .5 Aliquoted Monsters afgenomen before vóór run de run Monsters afgenomen vóór het verwerken van Aliquoted de batch before batch processing Batch Afbeelding 5. Variabiliteit tussen batches van gepoolde klinische celmonsters, opgezuiverd op de QIAsymphony SP met de QIAsymphony DSP AXpH Kit. Zie voor actuele informatie over licenties en productspecifieke vrijwaringsclausules de handleiding of gebruikershandleiding van de betreffende QIAGEN kit. Handleidingen en gebruikershandleidingen van QIAGEN kits zijn verkrijgbaar via of kunnen worden aangevraagd bij de technische diensten (Technical Services) van QIAGEN of bij uw plaatselijke leverancier. Handelsmerken: QIAGEN, QIAsymphony, digene (QIAGEN Group). mei QIAGEN, alle rechten voorbehouden. France The Netherlands Australia Austria 8/8 Belgium Canada China Denmark Finland 8-96 Germany -9- Hong Kong Ireland Italy Japan Korea (South) 5 75 Luxembourg 8 76 Norway Singapore Spain Sweden -798 Switzerland UK 9--9 USA Sample & Assay Technologies