Welkom in de wereld van de Legionella kweek

Transcriptie

1 Welkom in de wereld van de Legionella kweek Simon in t Veld Teammanager Microbiologie Vitens Laboratorium

2 Inhoud Historie Invloed toepassing diverse technieken Legionella in praktijk Ontwikkelingen ISO norm Legionella

3 Legionella 1976 Philidelphia 1977 Legionella geïsoleerd 1978 Legionella gekweekt 1979 Genus Legionella > 50 Legionella species 21 pathogeen 70% Legionella pneumophila SG1 20%-30% Legionella pneumophila SG %-10% Legionella non pneumophila

4 Legionella in Nederland 1977 eerste patient Leiden patienten AMC 1991 Bonte Wever Slagharen

5

6 Legionella in Nederland 1977 eerste patient Leiden patienten AMC 1991 Bonte Wever Slagharen 1999 Bovenkarspel Westfriese Flora 2006 Koeltoren Amsterdam

7 Wetgeving 2001 Tijdelijke regeling legionellapreventie 2004 AI-32 Legionellapreventie voor industriële watersystemen 2004 Waterleidingbesluit 2007 Registratie van koeltorens 2011 Regeling Legionella preventie

8 Meldingen Legionella pneumonie Bron: RIVM Jaarrapportage Surveillance Respiratoire Infectieziekten 2013

9 Invloed toepassing diverse technieken

10 Ontwikkeling diverse media 1978 Mueller Hinton Agar + toevoegingen 1978 FG medium (L-cysteine en ijzerpyrofosfaat) 1979 CYE medium (actieve kool en gistextract) 1979 CYE+antibiotica (Polymixine en Vancomycine) 1980 BCYE (ACES buffer) 1981 WY (CYE+antibiotica + glycine) 1981 BMPα (CYE + mix antibiotica+ α-ketoglutaraat) 1982 MWY (WY+AB+kleurstoffen+α-ketoglutaraat) 1984 GVPC (WY + antibiotica + α-ketoglutaraat) 1984? BCYE+ab

11 Ontwikkeling diverse media 1978 Mueller Hinton Agar + toevoegingen 1978 FG medium (L-cysteine en ijzerpyrofosfaat) 1979 CYE medium (actieve kool en gistextract) 1979 CYE+antibiotica (Polymixine en Vancomycine) 1980 BCYE (ACES buffer) 1981 WY (CYE+antibiotica + glycine) 1981 BMPα (CYE + mix antibiotica+ α-ketoglutaraat) 1982 MWY (WY+AB+kleurstoffen+α-ketoglutaraat) 1984 GVPC (WY + antibiotica + α-ketoglutaraat) 1984? BCYE+ab

12 Normen wereldwijd ISO 11731: 1998 ISO : 2008 T90-431:2003 (Frankrijk) AZ/NZS 3896: 2008 (Australie/Nieuw Zeeland) Standard Methods (USA) NEN 6265:2007

13 Score ringonderzoek (1) Koloniegetal 22 C

14 Score ringonderzoek (2) Koloniegetal 37 C

15 Score ringonderzoek (3) Coliformen

16 Score ringonderzoek (4) Enterococcen

17 Score ringonderzoek (5) Clostridium perfringens

18 Score ringonderzoek (6) Legionella pneumophila

19 Recovery Legionella spp diverse media (1) Legionella pneumophila BCYE BCYE BMPα GVPC MWY non-selective +selective (Oxoid SR111) (Oxoid SR152 (Oxoid SR118) (=NEN) kve/l % % % % L. pneumophila 100 ± ± 6 75 ± 3 79 ± ± 5 serogroup ± ± ± 8 95 ± 4 80 ± 12 L. pneumophila 100 ± ± ± ± 8 86 ± 18 serogroup ± ± ± ± ± 18 L. pneumophila 100 ± ± 4 92 ± ± ± 3 serogroup ± ± ± ± ± 23

20 Recovery Legionella spp diverse media (2) Legionella non-pneumophila L. dumoffii BCYE BCYE BMPα GVPC MWY non-selective +selective (Oxoid SR111) (Oxoid SR152 (Oxoid SR118) (=NEN) kve/l % % % % 100 ± 9 90 ± ± 7 52 ± ± ± 9 92 ± ± 9 47 ± 8 45 ± 8 L. longbeachae 100 ± 8 88 ± 6 71 ± 6 52 ± 6 70 ± 5 serogroup ± ± 5 88 ± ± 2 91 ± 11 L. longbeachae 100 ± ± ± 9 94 ± 7 95 ± 11 serogroup ± ± ± ± ± 20 L. anisa L. gormanii L. jordanis L. micdadei 100 ± 5 91 ± ± 9 78 ± 9 79 ± ± ± ± 6 71 ± 6 90 ± ± ± ± 7 35 ± 9 54 ± ± ± ± 3 40 ± 8 49 ± ± 16 7 ± ± 7 94 ± ± 3 66 ± ± ± ± ± ± ± ± 2 95 ± ± 11 L. bozemanii 100 ± 8 99 ± ± 7 88 ± 14 serogroup ± ± ± ± 5 L. bozemanii 100 ± ± ± ± 10 serogroup ± ± ± ± 9

21 Nederland vs Duitsland Vitens Jan2006 Dec % Legionella positief 20% Legionella pneumophila 80% Legionella species NLGA Jan2006-July % Legionella positief 89 % Legionella pneumophila 11 % Legionella species

22 Oorzaak verschillen opbrengst (1) Onbehandeld Hitte (30 min 50 C) Zuur (5 min ph2) MWY MWY MWY

23 Oorzaak verschillen opbrengst (2) Onbehandeld Hitte (30 min 50 C) Zuur (5 min ph2) Filter zuur (5 min ph2) MWY MWY MWY MWY

24 Oorzaak verschillen opbrengst (3) Onbehandeld Hitte (30 min 50 C) Zuur (5 min ph2) Filter zuur (5 min ph2) Filter onbehandeld MWY MWY MWY MWY MWY

25 Cellulose Nitrate membraan filters, 0,45µm L. pneumophila L. anisa L. bozemanii L. longbeachae Lab Lab Lab

26 Tuffryn membraan filters, 0,45µm L. pneumophila L. anisa L. bozemanii L. longbeachae Lab 1 NB Lab Lab

27 Legionella in de praktijk

28 % Positieve monsters Vitens lab Drinkwater 35,0 30,0 25,0 20,0 15,0 10,0 5,0 0,

29 % Positieve monsters Vitens lab Proceswater 35,0 30,0 25,0 20,0 15,0 10,0 5,0 0,

30 % monsters Niet Te Bepalen 5,0 4,5 4,0 3,5 3,0 2,5 2,0 drinkwater proceswater 1,5 1,0 0,5 0,

31 Verdeling Legionella spp drinkwater 5,8 2,1 1,5 0,3 0,1 NON_PN 4,0 SG2_14 SG1 NON_SG_1 NON_SG2_14 86,2 SG1_SG2_14 NONPN_SG1_SG2_14

32 Verdeling Legionella spp proceswater NON_PN SG2_14 SG1 NON_SG_1 NON_SG2_14 SG1_SG2_14 NONPN_SG1_SG2_14 18

33 Soorten Legionella species Legionella anisa Legionella gormanii Legionella feeleii Legionella dumoffi Legionella erythra Legionella micdadei Legionella maceachernii Legionella rubrilucens Legionella faurnensis Legionella jamestowniensis

34 Ontwikkelingen

35 Ontwikkeling ISO standaard Integreren beide normen Onderzoek QC voor membraanfilters Centrifugatietechniek; moeilijk filtreerbare monsters Hitte/zuurbehandeling combineren Introductie BCYE+ab en MWY Keuze in werkwijze

36 Ontwikkeling ISO standaard Schoon water Monster direct opbrengen Directe membraanfiltratie Membraanfiltratie aftrillen concentraat opbrengen Vervuild water Membraanfiltratie aftrillen concentraat opbrengen Verdunnen

37

38